許世琴 田鵬飛

慢性乙性肝炎是我國常見病多發(fā)病，乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物非常重要，指導(dǎo)臨床診治，血清HBeAg和HBV DNA含量反映了乙肝的復(fù)制狀態(tài)，是選擇抗病毒治療及評價藥物療效最重要的指標(biāo)［1，2］。為了進(jìn)一步了解慢性乙性肝炎患者血清HBV DNA與e抗原含量的關(guān)系，對此進(jìn)行了研究，現(xiàn)匯報如下:

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年4月至2011年4月診治的慢性乙性肝炎198例，其中男108例，女90例;年齡21～68歲，平均32.6歲。病程3～9年，平均病程4.2年;所有病例均符合1995年5月北京第5次全國傳染病寄生蟲病學(xué)術(shù)會議制定的病毒性肝炎防治方案診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 儀器及檢查方法 HBeAg定量檢測采用上海新波生物技術(shù)有限公司提供Anytest 2000時間分辨熒光免疫分析儀，試劑由安圖綠科提供時間分辨熒光免疫分析法乙肝兩對半試劑。檢測嚴(yán)格按試劑盒要求操作。奧地利產(chǎn)的BC2010酶標(biāo)儀，洗板機(jī)是北京優(yōu)利特。

HBV DNA定量檢測使用DA-7600型熒光定量擴(kuò)增檢測儀，采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)的信號引物能量轉(zhuǎn)移熒光標(biāo)記法(AmpliSensor)HBV DNA試劑盒進(jìn)行定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測，靈敏度為5.0×102copies/ml，陽性取≥1×103copies/ml為陽性，陰性時取實(shí)測拷貝值，低于靈敏度以下作零拷貝處理。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

本組198例慢性乙性肝炎患者檢測中血清HBeAg陰性68例，其中41例HBV DNA檢測為陽性。對本組病例進(jìn)行HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量進(jìn)行觀察。具體見表1。

表1 HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量觀察(±s)

表1 HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量觀察(±s)

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3 討論

乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物的檢測多采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，該方法快速簡便，試劑穩(wěn)定期長，測試成本低，但只能定性檢測，不能反映抗原抗體含量的變化，敏感度低，不能夠全面反映疾病變化［3］。時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)是以鑭系元素銪(Eu)等作為熒光標(biāo)記物，具有測量靈敏度高，示蹤物穩(wěn)定，定量分析量程寬，無放射污染和應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。血清HBV DNA以被廣泛應(yīng)用，被認(rèn)為是評估HBV復(fù)制水平的金指標(biāo)［4］。

HBeAg被公認(rèn)為乙肝病毒復(fù)制及傳染性的標(biāo)志，HBeAg是HBV核心區(qū)基因的一部分，在HBV DNA復(fù)制過程中，由前C基因與C基因一起產(chǎn)生一個P25前體多肽鏈，在經(jīng)轉(zhuǎn)膜作用及自身消化后剪去頭尾兩段，最終形成HBeAg。由于產(chǎn)生HBeAg的前體多肽鏈P25來自HBV復(fù)制過程中前基因RNA，因此外周血中HBeAg是HBV體內(nèi)復(fù)制過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物。由此可見，乙肝患者血清中存在HBeAg是病毒復(fù)制活躍的標(biāo)志，通過本組定量檢測HBV DNA及HBVM，發(fā)現(xiàn)隨HBV DNA載量增加，其各組HBeAg值也增加，HBeAg值與HBV DNA定量間有一定的相關(guān)性。

通過本組病例觀察部分HBeA g陰性病例HBV DNA檢測陽性。由于HBV DNA復(fù)制，與HBV DNA載量水平不一定平行。HBeAg陰性的患者仍有半數(shù)以上可檢出HBV DNA，說明HBeAg與HBV DNA的變化并不一致，因此不能僅以ELISA法測定血清HBeAg陰性就確定HBV在體內(nèi)無復(fù)制現(xiàn)象，而要以敏感性較高的熒光定量PCR法檢測HBV DNA載量水平，才能更確切地判斷HBV復(fù)制狀況。

血清HBeAg陰性而抗HBe陽性的患者有高滴度的HBV DNA。個別HBeAg陰性或e系統(tǒng)雙陽的患者其HBV DNA定量水平高于HBeAg陽性組均值，呈高水平復(fù)制，可能與病毒變異有關(guān)［5］。

［1］王功遂，王曼曼，明朗，等.HBeAg定量在慢性乙型肝炎診斷和治療中的價值.中華傳染病雜志，2004，22(4):255-258.

［2］王添章，張宜俊，劉樹人，等.慢性HBV感染者血清HBV DNA與HBeAg量的關(guān)系及臨床意義.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，19(1):71-72.

［3］袁漢堯，呂世靜，黃胺，等.乙肝病毒標(biāo)志物時間分辨免疫測定與放射免疫測定的分析比較.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2003，16(5):456-458.

［4］周小平.乙肝病毒基因定量分析的臨床意義及應(yīng)用價值.中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，13(5):311-313.

［5］李君，陳娟，臧桂珍，等.慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA與HBeAg、HBeAb含量的關(guān)系.東南大學(xué)學(xué)報，2004，23(4):250-252.