周紅茹 金 俊 楊 嬌 金青哲

油脂中3－氯丙二醇酯形成的化學(xué)反應(yīng)機(jī)制

周紅茹 金 俊 楊 嬌 金青哲

(江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江南大學(xué)食品學(xué)院，無(wú)錫 214122)

3－氯丙二醇酯是油脂及油脂食品在熱加工過(guò)程中生成的副產(chǎn)物，目前被認(rèn)為是潛在的食品安全危害因子之一。本文介紹了油脂中3－氯丙二醇酯形成的3種化學(xué)反應(yīng)機(jī)制，普遍認(rèn)為是氯離子的親核進(jìn)攻導(dǎo)致了3－氯丙二醇酯的形成。其中，第1種機(jī)制認(rèn)為氯離子親核反應(yīng)的中間體環(huán)酰氧鎓離子是3－氯丙二醇酯的前體;第2種機(jī)制認(rèn)為是親核的氯離子直接攻擊甘油骨架上的酯基或質(zhì)子化羥基;第3種機(jī)制認(rèn)為縮水甘油酯可能作為氯離子親核反應(yīng)的中間體而成為其前體。

3－氯丙二醇酯 環(huán)酰氧鎓離子 縮水甘油酯 形成機(jī)制

3－氯丙二醇酯(3－monochloropropane－1，2－diol esters，3－MCPD酯)是油脂在熱加工過(guò)程中形成的副產(chǎn)物，目前被認(rèn)為是潛在的食品安全危害因子之一。在食品加工、儲(chǔ)藏中，尤其在機(jī)體內(nèi)有關(guān)酶作用下，3－MCPD酯可能水解生成游離的3－氯丙醇(3－MCPD)從而顯示毒性［1］。

Davídek等［2］于1980年首次在酸水解植物蛋白(HVP)中發(fā)現(xiàn)3－MCPD酯，但并未引起普遍關(guān)注。3－MCPD酯廣泛存在于食品，尤其是精煉油脂及其油脂食品中，則是最近幾年才被注意到的事。Svejkovská等［3］于2004年報(bào)道了多種加工食品中存在3－MCPD酯，Zelinkova等［4］于2006年報(bào)道了精煉油脂中普遍存在3－MCPD酯?，F(xiàn)在，歐美多個(gè)實(shí)驗(yàn)室已從多種食品中分離出氯丙醇酯類物質(zhì)，其中最普遍的是3－MCPD酯，其余氯丙醇酯物質(zhì)如2－MCPD酯、1，3－ 二氯丙醇酯(1，3－DCP酯)和2，3－ 二氯丙醇酯(2，3－DCP酯)雖也有檢出，但含量很低。

了解油脂體系中3－MCPD酯的形成機(jī)制，對(duì)于采取有效措施防止和減少油脂食品中3－MCPD酯的形成十分重要。

目前主要提出了3種3－MCPD酯的形成機(jī)制，普遍認(rèn)為是氯離子的親核進(jìn)攻導(dǎo)致了3－氯丙二醇酯的形成。第1種機(jī)制認(rèn)為氯離子親核反應(yīng)的中間體環(huán)酰氧鎓離子是3－MCPD酯的前體;第2種機(jī)制認(rèn)為是親核的氯離子直接攻擊甘油骨架上的酯基或質(zhì)子化羥基;第3種機(jī)制認(rèn)為縮水甘油酯可能作為氯離子親核反應(yīng)中的中間體而成為3－MCPD酯的前體。

油脂中親核試劑氯離子的來(lái)源比較廣泛，含氯的包裝材料(如聚氯乙烯PVC、聚偏二氯乙烯PVDC)，油脂在精煉過(guò)程中使用的各種加工輔料(如水、酸、堿液、脫色土等)，以及食用油脂在使用(尤其煎炸)過(guò)程中由食品或原料引入的含氯的調(diào)味劑或添加劑(氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂等)。另外，油料作物生長(zhǎng)過(guò)程中從土壤中吸收的含氯無(wú)機(jī)鹽類、以及殘留的含氯殺蟲(chóng)劑，在油料種子加工的過(guò)程中也會(huì)部分進(jìn)入到油脂原料中。

1 環(huán)酰氧鎓離子中間體機(jī)制

此機(jī)制認(rèn)為TAG、DAG、MAG是形成3－MCPD酯的前體物質(zhì)，環(huán)酰氧鎓離子是反應(yīng)過(guò)程中的中間體，親核試劑氯離子攻擊環(huán)酰氧鎓離子的環(huán)結(jié)構(gòu)，將環(huán)打開(kāi)，從而形成3－MCPD酯。

Collier等［5］基于對(duì)醋酸存在條件下3－MCPD與2－MCPD比率變化的觀察，首次提出了環(huán)酰氧鎓離子是游離氯丙醇形成過(guò)程中的中間體。Rahh［6］等采用FTIR監(jiān)測(cè)到了60℃以上條件下三棕櫚酸甘油酯中環(huán)酰氧鎓離子的形成，該反應(yīng)用Lewis酸ZnCl2催化，在約1 651 cm－1處觀察到了環(huán)酰氧鎓離子的特征吸收峰，此特征吸收峰又進(jìn)一步通過(guò)同位素13C標(biāo)記羰基碳進(jìn)行了證實(shí)。

1．1 前體物質(zhì)形成環(huán)酰氧鎓離子的途徑

在酸催化條件下，環(huán)酰氧鎓離子可通過(guò)TAG、DAG或MAG酯羰基的內(nèi)部親核進(jìn)攻以及甘油骨架上離去基團(tuán)的同步分離而形成。當(dāng)前體物質(zhì)為MAG時(shí)離去基團(tuán)是質(zhì)子化羥基(水)，前體物質(zhì)為TAG時(shí)離去基團(tuán)是羧酸基，前體物質(zhì)為DAG時(shí)，離去基團(tuán)可以是羧酸基，也可以是水。盡管從分子大小來(lái)看，質(zhì)子化羥基(水)是更好的離去基團(tuán)，但油脂體系是疏水環(huán)境，相比之下，羧酸基基團(tuán)的離去傾向可能會(huì)更大些。

DAG可通過(guò)兩種途徑形成環(huán)酰氧鎓離子。

一是在酸性條件下，通過(guò)DAG酯羰基的內(nèi)部親核進(jìn)攻以及甘油骨架上離去基團(tuán)羧酸基的同步分離而形成(圖1)。

二是在酸性條件及鄰近的DAG酯基的鄰助作用下，質(zhì)子化羥基(水)同步分離，形成環(huán)酰氧鎓離子中間體(圖2)。

與DAG的反應(yīng)歷程相似，1－MAG和2－MAG通過(guò)環(huán)化也可以得到環(huán)酰氧鎓離子(圖3)。

圖3 MAG形成環(huán)酰氧鎓離子過(guò)程(R=?；?

TAG可通過(guò)兩種途徑形成環(huán)酰氧鎓離子。

一是在酸性條件下，通過(guò)TAG酯羰基的內(nèi)部親核進(jìn)攻以及甘油骨架上離去基團(tuán)羧酸基的同步分離而形成(圖4)。

圖4 TAG形成環(huán)酰氧鎓離子過(guò)程(R=?；?

二是在酸性條件下，TAG水解失去一分子脂肪酸生成DAG，DAG也可進(jìn)一步水解生成MAG;DAG或MAG在酸性條件下，同步分離羧酸基或質(zhì)子化羥基(水)，形成環(huán)酰氧鎓離子(圖5)。值得一提的是，3－MCPD二酯在酸性條件下也可以形成環(huán)酰氧鎓離子5(圖6)。

圖5 TAG形成環(huán)酰氧鎓離子過(guò)程(R=?；?

圖6 3－MCPD二酯形成環(huán)酰氧鎓離子6的過(guò)程(R=酰基)

1．2 環(huán)酰氧鎓離子的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)及其開(kāi)環(huán)后的產(chǎn)物

由DAG及MAG生成的環(huán)酰氧鎓離子的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)如圖7所示。

圖7 環(huán)酰氧鎓離子1～4的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)(R=酰基)

3－MCPD二酯生成的環(huán)酰氧鎓離子的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)如圖8所示，此含氯的環(huán)酰氧鎓離子含環(huán)酰氧鎓離子5和6兩種，且處于平衡狀態(tài)。

圖8 環(huán)酰氧鎓離子5和6的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)(R=?；?

環(huán)酰氧鎓離子能在3個(gè)不同的位點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)，如圖9～圖11中a、b、c所示。

在氯離子、羥基等親核試劑進(jìn)攻C－4(b)和C－5(a)情況下，環(huán)酰氧鎓離子1和2的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)被開(kāi)環(huán)，并生成3－MCPD酯(圖9)。

氯離子對(duì)C－5的進(jìn)攻(a)較容易，這是因?yàn)樵撐稽c(diǎn)C原子富電子且空間位阻小。因此，由DAG生成的環(huán)酰氧鎓離子共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)開(kāi)環(huán)后的主要產(chǎn)物是3－MCPD二酯。氯離子進(jìn)攻C－4(b)可得到2－MCPD二酯。

環(huán)酰氧鎓離子3和4共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)開(kāi)環(huán)后的產(chǎn)物見(jiàn)圖10。與DAG類似，由MAG生成的環(huán)酰氧鎓離子共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)開(kāi)環(huán)后的主要產(chǎn)物是3－MCPD－2－酯。3－MCPD－2－酯與3－MCPD－1－酯可以相互轉(zhuǎn)化，在體系中它們處于平衡狀態(tài);3－MCPD單酯之間的異構(gòu)化與MAG之間的異構(gòu)化類似。氯離子進(jìn)攻C－4(b)可得到2－MCPD單酯。

環(huán)酰氧鎓離子5和6共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)開(kāi)環(huán)后的產(chǎn)物見(jiàn)圖11。羥基(水)進(jìn)攻由3－MCPD雙酯生成的環(huán)酰氧鎓離子的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，將環(huán)打開(kāi)，可得到3－MCPD－1－酯和3－MCPD－2－酯;氯離子打開(kāi)該環(huán)酰氧鎓離子的共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)可得到二氯丙醇酯(DCP酯)。圖11列出了3－MCPD雙酯生成的環(huán)酰氧鎓離子被親核試劑羥基或氯離子進(jìn)攻開(kāi)環(huán)后的可能產(chǎn)物。

圖9 環(huán)酰氧鎓離子1和2共軛穩(wěn)定結(jié)構(gòu)開(kāi)環(huán)后的產(chǎn)物(R=?；?

2 氯離子直接親核取代機(jī)制

在鹽酸催化酸解條件下，TAG的酰基被氯離子直接親核取代，生成3－MCPD二酯。類似的，偏酰基甘油(DAG、MAG)的羥基也可被氯離子直接親核取代生成氯丙醇酯，見(jiàn)圖12。

3 縮水甘油酯中間體機(jī)制

2009年，Weiβhaar等［7］報(bào)道了精煉油脂中存在縮水甘油脂肪酸酯，最近發(fā)現(xiàn)，在精煉棕櫚油和棕櫚油配方食品中縮水甘油酯含量相對(duì)較高。初步研究表明，縮水甘油酯在精煉油脂中的出現(xiàn)可能與其DAG含量相關(guān)［8］。

由于親電子的環(huán)氧結(jié)構(gòu)，縮水甘油酯具有烷基化性能，可直接與親核試劑發(fā)生反應(yīng)，見(jiàn)圖13。

由此，縮水甘油酯有可能是3－MCPD酯形成(氯離子開(kāi)環(huán))過(guò)程中的中間體，但此假說(shuō)還未得到徹底證實(shí)。

圖12 TAG、DAG被Cl陰離子直接取代形成3－MCPD酯的過(guò)程(R=?；?

圖13 縮水甘油酯的氧環(huán)被氯離子親核進(jìn)攻形成3－MCPD酯的過(guò)程(R=?；?

4 結(jié)語(yǔ)

油脂中3－MCPD酯的出現(xiàn)引起了業(yè)界廣泛關(guān)注，本文所介紹的3種3－MCPD酯的形成機(jī)制中，環(huán)酰氧鎓離子中間體已被研究者監(jiān)測(cè)到，但大多數(shù)反應(yīng)過(guò)程仍需大量試驗(yàn)數(shù)據(jù)的支持，探求油脂中3－氯丙二醇酯形成的化學(xué)反應(yīng)機(jī)制，有助于在實(shí)際生產(chǎn)、儲(chǔ)藏以及使用過(guò)程中減少或避免3－MCPD酯生成。

［1］Hamlet C G，Sadd P A，Crews C，et al．Occurrence of 3－chloro－propane－1，2－diol(3－MCPD)and related compounds in foods:A review［J］．Food Additives and Contaminants，2002，19(7):619－631

［2］Davídek J，Velí?ek J，Kubelka V，et al．Glycerol chlorohydrins and their esters as products of the hydrolysis of tripalmitin，tristearin and triolein with hydrochloric acid［J］．Lebensmittel－Untersuchung und－Forschung，1980，171:14－17

［3］SvejkovskáB，Novotny O，DivinováV，et al．Esters of 3－chloropropane －1，2－diol in foodstuffs［J］．Czech Journal of Food Sciences，2004，22(5)，190－196

［4］Zelinkova Z，Svejkovska B，Velisek J，et al．Fatty acid esters of 3－chloropropane－1，2－diol in edible oils［J］．Food Additives and Contaminants，2006，23(12)，1290－1298

［5］Collier PD，Cromie D D O，Davies A P．Mechanism of formation of chloropropanols present in protein hydrolysates［J］．Journal of American Oil Chemists Society，1991，68(10)，785－790

［6］Rahn A K K，Yaylayan V A．Monitoring cyclic acyloxonium ion formation in palmitin systems using infrared spectroscopy and isotope labelling technique［J］．European Journal of Lipid Science and Technology，2011，113(3):330－334

［7］Wei?haar R，Perz R．Fatty acid esters of glycidol in refined fats and oils［J］．European Journal of Lipid Science and Technology，2009，112(2)，158－165

［8］Collison M W．Direct determination of MCPDesters and glycidyl esters by LCMS．Berlin:OVID－Association of the oilseed crushing and oil refining Industry in Germany，2010，A-vailable at:http://www．ovid－verband．de/fileadmin/user_upload/ovid－verband．de/downloads/ADM_Collison．pdf［accessed September 2010］．

The Chemical Reaction Mechanism of 3－MCPD Esters Formed in the Oil

Zhou Hongru Jin Jun Yang Jiao Jin Qingzhe
(State Key Laboratory of Food Science and Technology School of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi 214122)

3－MCPD esters is a by－product during the thermal processing of oils and fatty food．Nowadays，3－MCPD esters is considered as a kind of potential food safety hazard factors．This paper describes three kinds of the chemical reaction mechanism of 3－MCPD esters formed in the oil．Generally speaking，the nucleophilic reaction of chloride ions leads to the formation of 3－MCPD esters．The first mechanism regards the acyloxonium ion as the precursor of 3－MCPD esters，while the acyloxonium ion is a reactive intermediates formed before the nucleophilic reaction of chloride ions．The second mechanism considers that the ester group or a protonated hydroxyl group of the glycerol carbon atoms is directly nucleophilic attacked by the chloride ion which leads to the formation of 3－MCPD esters．The third mechanism accounts that glycidol ester might be a reactive intermediates before nucleophilic reaction of chloride ions，which can be regarded as the precursor of 3－MCPD esters．

3－MCPD esters，acyloxonium ion，glycidol ester，formation mechanism

TS221

A

1003－0174(2012)10－0118－05

“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2010BAD01B07)，“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2011BAD02B03、2012BAK 08B03)

2012－02－28

周紅茹，女，1980年出生，博士，脂質(zhì)科學(xué)與技術(shù)

金青哲，男，1962年出生，教授，油脂化學(xué)