張 興, 鄭炎松

(華中科技大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院,湖北 武漢 430074)

在轉(zhuǎn)錄因子中，核因子κB(NF-κB)與炎癥、免疫、細(xì)胞的增殖和死亡等生理功能密切相關(guān)，而NF-κB的信號(hào)通路能夠受到髓樣分化蛋白88(MyD88)的介導(dǎo)，因此用小分子模擬MyD88的功能，可以阻止MyD88與NF-κB的作用，起到調(diào)節(jié)上述生理功能的目的，從而篩選出小分子藥物[1～4]。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MyD88的小分子擬似物——N-(N′-3-苯丙酰-L-纈氨酰)四氫吡咯(AS-1),能夠抑制NF-κB的信號(hào)通路，可望用于治療細(xì)菌感染和炎癥[3，4]、對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的消炎和保護(hù)[1]、以及治療心血管疾病[5～7]等。由于AS-1分子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、毒性小、作用機(jī)理明確，極有可能發(fā)展成臨床用藥，但有關(guān)全合成方法的報(bào)道[4，8]較少，而且不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

Bartfai等[4]首次報(bào)道了AS-1的全合成：以N-Boc-L-纈氨酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯(2)為原料，用四氫吡咯酰胺化、再脫去Boc保護(hù)基、最后與3-苯丙酸對(duì)硝基苯酚酯(苯丙?；噭?完成苯丙?；磻?yīng)制得AS-1。該路線雖然產(chǎn)率高，但2與苯丙?；噭﹥r(jià)格昂貴，不適宜工業(yè)化生產(chǎn)。

Scheme1

陶李明等[8]以文獻(xiàn)[4]方法為基礎(chǔ)，在最后一步苯丙?；瘯r(shí)用價(jià)格便宜的3-苯丙酸乙酯代替3-苯丙酸對(duì)硝基苯酚酯。但在這篇報(bào)道中，有關(guān)AS-1的結(jié)構(gòu)是錯(cuò)誤的，錯(cuò)將其N-?；臍溥量┗嫵闪薔-羥基四氫吡咯酯基，將酰胺基變成了酯基。此外，AS-1的命名也不準(zhǔn)確，按照以丁酮為母體命名，甲基取代基既不是在N-上，也不是在四氫吡咯基上，而應(yīng)該在丁酮的3-位上。更為重要的是，我們?cè)谥貜?fù)文獻(xiàn)[8]方法時(shí)發(fā)現(xiàn)，用3-苯丙酸乙酯為原料進(jìn)行苯丙?；淖詈笠徊椒磻?yīng)，用硅膠薄層色譜監(jiān)測(cè)，在室溫下纈氨酸的氨基完全不與3-苯丙酸乙酯進(jìn)行?；磻?yīng)，即使在回流的溫度下，也不見任何反應(yīng)。而且該反應(yīng)路線關(guān)鍵的兩步酰胺化反應(yīng)均要用硅膠柱色譜進(jìn)行分離純化，也不利于今后的工業(yè)化生產(chǎn)。

針對(duì)文獻(xiàn)[4，8]工藝路線的問題，本文以容易得到的N-Boc-L-纈氨酸(1)為起始原料，最后一步用苯丙酰氯為苯丙?；噭弋a(chǎn)率地合成了AS-1(Scheme 1)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和MS確證，總收率42%，純度高于98%。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1．1 儀器與試劑

X-5型數(shù)字顯微熔點(diǎn)儀(溫度未校正);WZZ-2B型自動(dòng)旋光儀；Bruker AVANCE-400型核磁共振譜儀(CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo));1100 LC/MSD Trap型二維液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)。

CH2Cl2經(jīng)無水氯化鈣干燥后重蒸；甲苯經(jīng)無水氯化鈣干燥，鈉絲回流后重蒸；氯仿經(jīng)水洗、無水硫酸鎂干燥、重蒸；DME(乙二醇二甲醚)經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，通入高純氮?dú)?，加入鈉絲回流后重蒸;其余所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1) 2的合成

(2)N-(N′-Boc-L-纈氨酰)四氫吡咯(3)的合成

(3)N-(L-纈氨酰)四氫吡咯三氟乙酸鹽(4)的合成

(4) AS-1的合成

2 結(jié)果與討論

本文首次報(bào)道了AS-1以及所有中間體的比旋光度，這將有利于研究AS-1的光學(xué)活性對(duì)生理活性的影響。分別于4 ℃[9]和25 ℃反應(yīng)，考察了反應(yīng)溫度對(duì)由1合成2的光學(xué)活性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其比旋光度分別為-36.5°和-35.5°，兩者相差不大，所以可以在室溫下進(jìn)行反應(yīng)。

在改進(jìn)的全合成路線中，所有中間產(chǎn)物不需經(jīng)硅膠柱色譜分離純化，只通過重結(jié)晶、洗滌等簡(jiǎn)單操作，就能使AS-1的純度在98%以上。所有中間產(chǎn)物及AS-1的1H NMR和MS數(shù)據(jù)以及物理狀態(tài)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道吻合。改進(jìn)路線有望用于工業(yè)化生產(chǎn)。

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