鄒成林，陳維鈞，孫曉順，方 璟

(荊州市第二人民醫(yī)院內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

促血小板生成素在急性腦梗死患者血清中的表達(dá)及臨床意義

鄒成林，陳維鈞，孫曉順，方 璟

(荊州市第二人民醫(yī)院內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

目的：探討促血小板生成素(TPO)在急性腦梗死患者血清中的表達(dá)及臨床意義。方法：應(yīng)用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對(duì)腦梗死患者45例及健康體檢者45例進(jìn)行血小板參數(shù)及血清促血小板生成素檢測(cè)，按不同發(fā)病時(shí)間分為急性期(1～3d)和恢復(fù)期組(10～14d)；按梗死面積分為腔隙性梗死組(19例)、小面積梗死組(16例)、大面積梗死組(10例)。對(duì)各組與對(duì)照組之間的促血小板生成素及血小板參數(shù)進(jìn)行比較。結(jié)果：腦梗死急性期血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血小板平均體積(MPV)和血小板體積分布寬度(PDW)與對(duì)照組比較均統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；腦梗死恢復(fù)期 PDW與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PLT、MPV較對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。急性期和恢復(fù)期血清TPO水平較正常組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腔梗組和小面積梗死組血清 TPO與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)，小面積梗死組與腔梗組以及大面積梗死組與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。腦梗死急性期組及恢復(fù)期組，血清TPO水平和血小板總數(shù)與梗死面積無明顯相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論：腦梗死后TPO水平改變?cè)谀X梗死發(fā)病中有一定的作用，可能在腦梗死后腦保護(hù)中發(fā)揮一定的作用。

促血小板生成素；急性腦梗死；血小板計(jì)數(shù)；血小板平均體積；血小板分布寬度

促血小板生成素(thrombopoeitin，TPO)是體內(nèi)促進(jìn)巨核細(xì)胞增殖、分化、成熟的主要細(xì)胞因子之一，與外周血中血小板數(shù)量有關(guān)，近年來研究表明TPO/促血小板生成素受體(TPOR)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的小腦、脊髓、皮質(zhì)、垂體、腦干、扁桃體和海馬可表達(dá)，并通過發(fā)揮生物學(xué)活性，起到腦保護(hù)作用[1]。同時(shí)也有研究認(rèn)為，TPO對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有促進(jìn)生長(zhǎng)和抗凋亡的作用[2]。TPO可通過選擇性抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡、促進(jìn)血管生成、抗炎癥及營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)來發(fā)揮腦保護(hù)作用。本研究旨在探討促血小板生成素在急性腦梗死患者血清中的表達(dá)及臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1對(duì)象

2010年12月至2011年12月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者45例，均符合全國(guó)第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的缺血性腦血管病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，全部經(jīng)頭顱CT或MRI檢查證實(shí)。腦梗死患者中男25例，女20例，年齡40～75(61.2±11.3)歲。對(duì)照組為健康體檢者45例，男24例，女21例，年齡44～75(62.6±10.7)歲，均無心、肝、肺、腎、血液和代謝性疾病。兩組年齡、性別間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有患者按照頭部CT照片及報(bào)告病灶大小，參照Adama分類法[4]將所有病例分為3組。①大面積梗死組：10 例，梗死灶面積>3cm2；②小面積梗死組：16例，腦梗死灶面積處于1.5～3cm2之間；③腔隙性腦梗死組：19例，腦梗死灶面積<1.5cm2。

1.2方法

1.2.1 標(biāo)本采集 腦梗死組急性期(1～3d)及恢復(fù)期(10～14d)分別抽血5ml，其中1ml置于EDTA-K2抗凝管中，完成血小板參數(shù)檢測(cè)。余4ml分離血清于-80℃冰箱保存待測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法 取患者入院后次日晨空腹肘前靜脈血，用2%EDTA-K2抗凝，采血1h內(nèi)在Sysmex2100 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行血小板參數(shù)如 PLT、MPV以及PDW的檢查。

血清TPO采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)，嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行操作。在MultiskanAscentV2.6型酶標(biāo)儀檢測(cè)各份樣本吸光度，并繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定的樣本吸光度均以此標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1腦梗死急性期組、恢復(fù)期組與對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果比較

腦梗死急性期PLT、MPV、PDW與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；腦梗死恢復(fù)期 PDW與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，PLT、MPV與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。急性期血清TPO水平較正常組升高，恢復(fù)期血清TPO水平較正常組仍升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組TPO及血小板參數(shù)的比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.2不同梗死面積急性腦梗死患者血清TPO水平及血小板計(jì)數(shù)比較

梗塞面積越大，PLT越低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而腔隙性腦梗死PLT與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。腔梗組和小面積組血清TPO與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)，小面積組與腔梗組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，大面積組與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表2。

表2 不同病灶大小組PLT及TPO結(jié)果比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.3相關(guān)性分析

腦梗死急性期組及恢復(fù)期組，血清TPO水平與血小板總數(shù)之間無明顯相關(guān)性(P>0.05)。血清TPO與梗死面積無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

TPO是一種造血正調(diào)控因子，可刺激巨核細(xì)胞增殖分化、成熟和血小板生成。TPO在腦缺血后的腦保護(hù)作用機(jī)制目前不十分清楚。近來發(fā)現(xiàn)，造血外組織中也有TPO受體C-mpl的表達(dá)，Yang等[1]發(fā)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)中存在C-mpl，其能對(duì)抗細(xì)胞凋亡，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)。本研究結(jié)果表明，在腦梗死急性期和恢復(fù)期患者血清TPO水平較正常組均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。本研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)腦梗死急性期雖然血小板計(jì)數(shù)較正常對(duì)照組明顯減少，但TPO水平與血小板計(jì)數(shù)無明顯相關(guān)性。這與侯曉平等[5]研究結(jié)果一致。朱在卿等[6]研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者血小板活化標(biāo)記物CD62P、CD63的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血小板活化增強(qiáng)，在急性腦梗死疾病發(fā)生過程中起了重要作用。血小板活化因子被激活，損傷處的肌纖維和膠原纖維使血小板迅速在此處聚集、消耗，使血循環(huán)中的血小板數(shù)量減少。

目前調(diào)控體內(nèi)TPO水平的機(jī)制還不清楚，其主要受巨核細(xì)胞數(shù)及PLT與巨核細(xì)胞表面TPO受體(C-MPL)總量的調(diào)控[7]。當(dāng)血小板及成熟巨核細(xì)胞減少時(shí)，TPO水平增高，反之，當(dāng)血小板或成熟巨核細(xì)胞增多時(shí)，血清中TPO與受體結(jié)合后即被吸附或降解，致使TPO水平降低[8]。本研究結(jié)果顯示，急性期PLT大量消耗，血清TPO水平反饋性增高?；謴?fù)期雖然 PLT、MPV恢復(fù)正常，但血清PLT水平較對(duì)照組仍增高，提示血清TPO升高不僅與PLT數(shù)量變化有關(guān)。由于腦是TPO表達(dá)的一個(gè)場(chǎng)所，且急性缺血性腦血管病發(fā)病后，存在缺血-再灌注損傷，可導(dǎo)致炎性介質(zhì)表達(dá)，釋放白介素及多種炎性物質(zhì)，引發(fā)機(jī)體一系列炎性反應(yīng)。在缺氧缺血時(shí)，大量的炎性細(xì)胞因子滲出，導(dǎo)致機(jī)體處于炎性狀態(tài)。TPO是一種快反應(yīng)蛋白，在急性缺氧缺血狀態(tài)下，TPO水平可應(yīng)激性增高。炎癥過程中TPO基因表達(dá)增加，發(fā)揮抗炎癥的作用，并且炎癥因子IL-6、IL-12等還可誘導(dǎo)TPO的合成[9]。

本研究發(fā)現(xiàn)，梗死面積越大，PLT越低。腦梗死面積大的患者血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷更為嚴(yán)重，內(nèi)皮細(xì)胞中存在C-mpl的表達(dá)，TPO可以通過C-mpl受體介導(dǎo)激活內(nèi)皮細(xì)胞合成血小板激活因子并通過STAT信號(hào)通路誘導(dǎo)血管生成[10]。同時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞損傷能夠產(chǎn)生較多的炎癥介質(zhì)，可以消耗血液中大量的血小板。腔梗組和小面積組血清 TPO較對(duì)照組升高，說明TPO產(chǎn)生增多，大腦的保護(hù)作用加強(qiáng)，缺氧缺血性腦損傷減輕，但大面積組血清TPO與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清TPO與梗死面積也無明顯相關(guān)性。究其原因，一方面可能是隨著腦血管病的病程延長(zhǎng)，血清TPO消耗增多，導(dǎo)致其含量下降，另一方面可能是隨著其損傷程度加重，機(jī)體產(chǎn)生TPO 的能力降低；這樣，腦損傷后的保護(hù)作用減弱，損傷嚴(yán)重，預(yù)后也就越差。因此，TPO水平作為評(píng)估腦損傷嚴(yán)重程度的指標(biāo)，反映腦損傷的嚴(yán)重程度。但TPO在腦梗死發(fā)病過程中的作用機(jī)制尚不十分明確，研究其作用機(jī)制，將對(duì)腦梗死的治療有一定的指導(dǎo)意義。

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[編輯] 一 凡

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.10.005

2012-07-28

鄒成林(1981-)，男，湖北宜昌人，主治醫(yī)師，碩士，主要從事血液病發(fā)病機(jī)制及治療的研究與臨床工作。

R743.3

A

1673-1409(2012)10-R013-03