張曉欣 吳論 彭學(xué)強 鄭偉

參附注射液對自體血回輸患者圍術(shù)期體液免疫功能的影響

張曉欣①吳論①彭學(xué)強①鄭偉①

目的：探討參附注射液對自體血回輸患者圍術(shù)期體液免疫功能的影響。方法：擇期行脊柱手術(shù)患者40例，將其隨機分成對照組(C組)和參附注射液組(SF組)，每組20例。C組采用常規(guī)自體血回輸法，SF組于術(shù)前3 d開始注射參附注射液50 ml，1次/d，連續(xù)3 d，術(shù)中于收集自體血前30 min，經(jīng)5 min靜脈輸注參附注射液50 ml，并在回收血液的肝素鹽水和洗滌鹽水內(nèi)加入?yún)⒏阶⑸湟?，?00 ml加入?yún)⒏阶⑸湟?5 ml。于麻醉誘導(dǎo)前(T0)、術(shù)后1 h(T1)、1 d(T2)及5 d(T3)時取靜脈血樣，采用ELISA法測定血清免疫球蛋白(IgG、IgM)的濃度；記錄手術(shù)時間、術(shù)中出血量、回輸血量。 結(jié)果：兩組患者手術(shù)時間、術(shù)中出血量、回輸血量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與T0時比較，對照組T1～T3時血清IgG和IgM濃度降低，SF組T 1、T2時血清IgG濃度降低(P<0.05)，T3時差異無統(tǒng)計學(xué)意義，T1～T3時血清IgM濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與C組比較，SF組T2、T3時血清IgG濃度、T1～T3時血清IgM濃度升高(P<0.05)。結(jié)論：參附注射液可在一定程度上減輕自體血回輸患者體液免疫抑制，改善體液免疫平衡狀態(tài)。

參附注射液； 輸血； 自體； 抗體生成

紅細胞具有識別、黏附、殺傷抗原及清除免疫復(fù)合物的功能，參與機體免疫調(diào)控，并有完整的自我調(diào)控系統(tǒng)，是機體免疫系統(tǒng)中的一個子系統(tǒng)[1]。采用自體血回輸實施血液保護時，由于紅細胞與人工管道和回收裝置的接觸，血紅蛋白氧化變性，紅胞腫脹破碎，同時伴隨白細胞凋亡，產(chǎn)生白細胞碎片及可溶性抗原，影響機體免疫功能[2]。研究表明，參附注射液可在一定程度上保護紅細胞，改善自體血回輸患者的免疫功能[3]。體液免疫指B細胞在T細胞輔助下，接受抗原刺激后形成效應(yīng)B細胞和記憶細胞，效應(yīng)B細胞產(chǎn)生的具有專一性的抗體與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合后完成的免疫反應(yīng)，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用[4]。因此，體液免疫在機體免疫反應(yīng)中有十分重要的地位。本研究擬探討參附注射液對自體血回輸患者圍術(shù)期體液免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，患者均簽署知情同意書。擇期脊柱手術(shù)(經(jīng)后路全椎板切除減壓、椎弓根螺釘固定或椎間植骨融合術(shù))40例，年齡18～64歲，體重指數(shù)14～20 kg/m2，ASA分級Ⅰ或Ⅱ級，預(yù)計術(shù)中出血量500～1000 ml，無免疫、血液及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，非腫瘤患者。采用隨機數(shù)字表法，將患者隨機分成2組：對照組(C組 )和參附組(SF組)，每組20例。

1.2 麻醉方法 患者入室后，開放外周靜脈用于輸液，常規(guī)監(jiān)測ECG、HR、BP、SpO2，局麻下行左側(cè)橈動脈穿刺，置入留置導(dǎo)管，連續(xù)監(jiān)測動脈壓。靜脈注射異丙酚1.5 mg/kg、芬太尼 3 μg/kg、阿曲庫銨1.0 mg/kg麻醉誘導(dǎo)后，氣管內(nèi)插管，行機械通氣，潮氣量 8～10 ml/kg， HR 10～14次/min，維持PETCO235～45 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。行右頸內(nèi)靜脈穿

刺，用于監(jiān)測CVP和進行補液。術(shù)中吸入七氟醚1%～4%，靜脈輸注異丙酚4～8 mg/kg、瑞芬太尼0.1～0.2 μg/(kg·min)維持麻醉，術(shù)中間斷靜脈注射阿曲庫銨維持肌松。術(shù)中根據(jù)HR、動脈壓、CVP調(diào)整輸血及輸液，維持收縮壓80～100 mm Hg，尿量≥1 ml/(kg·h)。

1.3 血液回輸方法 采用C22.2 NO.601.1全自動血液回收機(Medtronic公司，美國)回收血液。手術(shù)開始前用肝素鹽水(肝素12 500 U加入到生理鹽水500 ml)200 ml預(yù)充雙腔管和過濾器。切皮時啟動負壓吸引回收出血，控制吸引壓力100～150 mm Hg。根據(jù)出血量調(diào)節(jié)肝素鹽水的滴速，使肝素鹽水與回收血的容積比為1:5。血液經(jīng)過濾后(過濾網(wǎng)眼直徑為40 μm)進入貯血器，當貯血器內(nèi)血液達到800 ml以上時，血液回收機自動將回收血液進行離心(轉(zhuǎn)速5000 r/min)及鹽水洗滌(每次使用250 ml)，同時將清洗液、抗凝劑、游離血紅蛋白、細胞碎屑、脂肪滴等雜質(zhì)分流到廢液袋內(nèi)，所得濃縮紅細胞泵入儲血袋內(nèi)。C組采用上述常規(guī)自體血回輸法，SF組于術(shù)前3 d開始

注射參附注射液(雅安三九藥業(yè)有限公司)50 ml，1次/d，連續(xù)3 d，術(shù)中于收集自體血前30 min，經(jīng)5 min靜脈輸注參附注射液50 ml，并在回收血液的肝素鹽水和洗滌鹽水內(nèi)加入?yún)⒏阶⑸湟?，?00 ml加入?yún)⒏阶⑸湟?5 ml；對照組給予等容量生理鹽水。術(shù)中及術(shù)后使用止血藥、輸異體血者排除本研究。

1.4 觀察指標 記錄手術(shù)時間、術(shù)中出血量、回輸血量。于麻醉誘導(dǎo)前(T0)、術(shù)后1 h(T1)、1 d(T2)及5 d(T3)時取靜脈5 ml，采用ELISA法測定血清免疫球蛋白(IgG、IgM)的濃度，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以(x-±s)表示，重復(fù)測量數(shù)據(jù)比較采用重復(fù)測量設(shè)計的方差分析，組間比較采用成組t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般情況和術(shù)中情況各指標比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組患者一般情況和術(shù)中情況各指標的比較

2.2 兩組T0時血清IgG和IgM濃度比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與T0時比較，C組T1～T3時血清IgG和IgM濃度降低，SF組T1、T2時血清IgG濃度均降低(P<0.05)，T3時差異無統(tǒng)計學(xué)意義，T1～T3時血清IgM濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與C組比較，SF組T2、T3時血清IgG濃度、T1～T3時血清IgM濃度升高(P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者不同時點血清IgG和IgM濃度的比較(±s) g/L

表2 兩組患者不同時點血清IgG和IgM濃度的比較(±s) g/L

*與T0時比較，P<0.05；△與C組比較，P<0.05

組別 IgG IgM T0 T1 T2 T3 T0 T1 T2 T3 C組(n=20) 17.31±0.32 10.22±0.17* 11.02±0.15* 10.51±0.14* 1.26±0.08 0.71±0.05* 0.60±0.04* 0.65±0.01* SF組(n=20) 15.32±0.31 12.20±0.24* 12.10±0.19*△ 10.78±0.09△ 1.29±0.01 1.26±0.01△ 1.25±0.02△ 1.27±0.01△

3 討論

本研究參照文獻[5]及預(yù)試驗結(jié)果，選擇參附注射液的給藥方法為：于術(shù)前3 d開始注射參附注射液50 ml，1次/d，連續(xù)3 d，術(shù)中于收集自體血前30 min，經(jīng)5 min靜脈輸注參附注射液50 ml，并在回收血液的肝素鹽水和洗滌鹽水內(nèi)加入?yún)⒏阶⑸湟?，?00 ml加入?yún)⒏阶⑸湟?5 ml。本研究結(jié)果顯示：患者回輸自體血后血清免疫球蛋水平明顯降低，表明自體血回輸后機體免疫系統(tǒng)正向調(diào)節(jié)受到抑制，負向調(diào)節(jié)加強，體液免疫受到抑制；應(yīng)用參附注射液后可提高血清免疫球蛋白水平，表明參附注射液可在一定程度上減輕體液免疫抑制，改善體液免疫平衡狀態(tài)。

淋巴細胞功能相關(guān)抗原-3(LFA-3)是紅細胞膜上一種糖蛋白分子。LFA-3能與T細胞CD2結(jié)合，激活T淋巴細胞的免疫功能，并間接增強B淋巴細胞的免疫功能[6]。IgG為五類免疫球蛋白中血清水平最高者，也是再次抗體應(yīng)答中所產(chǎn)生的主要抗體類別，主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細胞合成。IgM占血清免疫球蛋白總量的5%～10%，是個體發(fā)育過程中最早合成和分泌的抗體，也是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，是機體抗感染的“先頭部隊”。

自體血回輸過程中，在收集和洗滌自體血時，由于紅細胞與人工管道和回收裝置的接觸，血紅蛋白氧化變性，形成高鐵血紅蛋白沉積于紅細胞內(nèi)，紅細胞腫脹甚至破碎[7]。由于紅細胞的破壞可刺激組織釋放炎性介質(zhì)、氧自由基等，在其作用下，各類免疫細胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，細胞膜上鈣通道開放，導(dǎo)致大量鈣離子內(nèi)流，引起鈣超載、三磷酸腺苷代謝障礙[8]，從而引起免疫功能的抑制。參附注射液具有良好的鈣阻滯作用，可防止收集和洗滌自體血時紅細胞鈣超載，減輕紅細胞損傷[9]。而且參附注射液是一種帶負性電荷的生物堿，可以吸附于管道表面，具有去電荷作用，以防止管道對紅細胞的破壞。同時，參附注射液還可抑制炎性介質(zhì)的合成和釋放，消除氧自由基，具有良好的抗氧化功能[10]，從而阻斷炎性反應(yīng)及氧自由基之間的惡性循環(huán)，可阻止Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶失活，因此，可以防止免疫球蛋白受到炎性反應(yīng)及氧自由基的損傷。

綜上所述，參附注射液對可在一定程度上減輕自體血回輸患者體液免疫抑制，改善體液免疫平衡狀態(tài)。

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Effect of Shenfu Injection on Perioperative Humoral Immune Function in Patients Required for Autologous Blood Transfusion

ZHANG Xiao-xin，WU Lun，PENG Xue-qiang，et al.

Objective:To investigate the effect of Shenfu injection on humoral immune function in patients required for autologous blood transfusion. Method:Sixty ASAⅠ orⅡ patients undergoing elective spinal surgery were randomly divided into 2 groups (n=20 each):Shenfu group and control group.In Shenfu group， Shenfu injection 50 ml was infused intravenously over 5 min at 30 min before the autologous blood was collected. Shengfu injection was added to the heparinized saline and washing saline at the same time (25 ml) until the final concentration reached 0.005%. Shenfu injection was not given in control group. Venous blood samples were taken before anesthesia induction (T0) and at 1 h after operation (T1)， and on day 1 and 5 after operation (T2-T3) for measurement of serum IgG and IgM concentrations by ELISA. The operation time， intraoperative blood loss and amount of salvaged blood reinfused were recorded.Result:There was no significant difference in the operation time， intraoperative blood loss and amount of salvaged blood reinfused between the two groups (P>0.05). Compared with the baseline value at T0，serum IgG and IgM concentrations were significantly decreased at T1-T3 in control group and the serum IgG concentration was significantly decreased at T1，T2 in Shenfu group (P<0.05). The serum IgG concentration at T2，T3 and serum IgM concentration at T1-T3 were significantly increased in Shenfu group than in control group (P<0.05).Conclusion:Shenfu injection can reduce humoral immunosuppression to some extent and improve the balance of humoral immunity in patients required for autologous blood transfusion.

Shenfu injection； Blood transfusion; Autologous； Antibody formation

Zhongshan Hosptial Affiliated to Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Zhongshan 528400，China

Medical Innovation of China，2012，9(23):004-006

10.3969/j.issn.1674-4985.2012.23.002

①廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山醫(yī)院 廣東 中山 528400通

訊作者：張曉欣

2012-06-02) (本文編輯：陳丹云)