劉 煌，楊云凈，羅 艷

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科 400016）

慢性心力衰竭（CHF）是嚴(yán)重危害人類健康的心血管疾病之一。臨床檢驗診斷學(xué)方法對CHF的診斷、病情評估及預(yù)后所進行的相關(guān)研究在近年來受到廣泛關(guān)注，包括肌鈣蛋白T（c Tn T）、肌紅蛋白（Mb）和BNP前體N端肽（NT－proBNP）和心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H－FABP）等多種生物標(biāo)記物逐漸成為研究的熱點。H－FABP是近年來發(fā)現(xiàn)在早期診斷急性心肌梗死（AMI）中具有重要價值的一種小分子生物標(biāo)記物[1－2]，然而目前關(guān)于H－FABP在CHF中作用研究較少。本研究通過檢測CHF患者血清中H－FABP、c Tn T、Mb和NT－proBNP，觀察以上標(biāo)記物的表達水平并行統(tǒng)計分析，以探討H－FABP在CHF患者中可能的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年7月1日至2011年2月28日于重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院的63例CHF患者（CHF組）及20名健康體檢者（對照組）為研究對象。CHF組包括男36例，女27例；依照紐約心臟病學(xué)會（NYHA）心功能分級標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級共3個亞組（分別20、22、21例），各亞組間在性別、年齡、病因等方面比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。健康對照組包括男12名，女8名。CHF組所有病例均排除AMI、不穩(wěn)定型心絞痛、腦梗死、肺動脈栓塞等疾??；CHF診斷標(biāo)準(zhǔn)參照中國2007年《慢性心力衰竭診斷治療指南》[3]。

1.2 方法 CHF組患者均入院后24 h內(nèi)采血，對照組空腹采血，均取5 mL。經(jīng)4 500 r／min離心5 min后分離血清，檢測c Tn T、Mb和NT－proBNP（雙抗體夾心法），余血清于－20℃保存待測H－FABP（生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法）。c Tn T、Mb和NT－proBNP檢測儀器為Roche公司Cobas?e411電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析系統(tǒng)，試劑由Roche公司配套；H－FABP檢測用TECAN公司Sunrise－basic酶標(biāo)儀，試劑盒由重慶申博科技公司提供，操作步驟均參照說明書進行。H－FABP、c Tn陽性界值分別取4.3 ng／mL、0.03 ng／mL；Mb陽性界值：男為72 ng／mL，女為58 ng／mL，高于陽性界值即判為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示。非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以M±Q 表示。用獨立樣本均數(shù)的t檢驗和獨立樣本秩和檢驗（Wilcoxon法）分析CHF組及各亞組和對照組的差異，用方差分析法和多樣本秩和檢驗（Kruskal－Wallis法）比較各亞組間差異，用行×列表資料的χ2檢驗分析兩個及以上率的差異，用直線相關(guān)分析法觀察兩個指標(biāo)間的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組H－FABP、c Tn T、Mb和NT－proBNP的表達變化 見表1、2。

表1 各組H－FABP、cTnT的表達變化（±s，ng／mL）

表1 各組H－FABP、cTnT的表達變化（±s，ng／mL）

△：P＜0.05，與對照組比較；＊：P＜0.05與Ⅱ級組比較；＃：P＜0.05，與Ⅲ級組比較。

組別nH－FABP c Tn T CHF組 63 5.18±1.58△0.56±0.05△ Ⅱ級組 20 3.96±0.77△0.04±0.03△Ⅲ級組 22 5.05±0.86△＊0.07±0.06△＊Ⅳ級組 21 6.49±1.77△＊＃0.07±0.03△＊對照組20 2.61±0.82 0.02±0.01

表2 各組Mb、NT－proBNP水平比較（M±Q）

2.2 CHF組H－FABP、c Tn T和Mb陽性率的比較分析 CHF組H－FABP、c Tn T和Mb的總體陽性率分別為58.7%、44.4%和68.3%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；在Ⅲ級組和Ⅳ級組患者中，H－FABP陽性率（76.7%）與Mb的陽性率（79.1%）相近，高于c Tn T的陽性率（55.8%，P＜0.05）；HFABP、c Tn T和Mb聯(lián)合分析的陽性率則為92.1%。

2.3 CHF組H－FABP與NT－proBNP相關(guān)性 Spearman相關(guān)分析提示：H－FABP與NT－proBNP呈顯著性正相關(guān)（r＝0.874，P＜0.01）。

3 討 論

H－FABP是近年來發(fā)現(xiàn)的一種小分子生物標(biāo)記物，在心肌中高表達，約在AMI后0.5～1.5 h能檢出，于6～8 h左右達到高峰，約在20 h左右下降至正常[4]。研究表明，CHF患者可能發(fā)生進行中的心肌損傷（ongoing myocardial damage，OMD），其具體機制目前尚不明確，可能與心肌細胞的凋亡或壞死有關(guān)[5－6]，而Setsuta等[7]則認 為 其與TNF和Fas／Fas配體系統(tǒng)的激活可能相關(guān)。本研究通過觀察63例CHF患者血清中H－FABP、c Tn T和Mb的表達變化，結(jié)果表明這3種標(biāo)記物的表達較對照組均明顯升高。Mb是目前公認AMI發(fā)生后早期可檢出的敏感心肌損傷標(biāo)記物[8]，而c Tn T則為目前診斷AMI特異性最高的指標(biāo)[9]，由此可推測H－FABP可用于OMD的檢測。同時本研究通過對CHF組上述3個指標(biāo)總體陽性率比較，結(jié)果表明H－FABP的總體陽性率較c Tn T高而低于Mb，這一結(jié)果近似于Niizeki等[10]的報道；而這3項指標(biāo)行聯(lián)合分析后的陽性率則高達92.1%（58／63），表明H－FABP反映CHF患者心肌損傷敏感性高于c Tn T，而特異性強于Mb，且聯(lián)合檢測H－FABP、c Tn T和Mb能明顯提高發(fā)現(xiàn)OMD的敏感性。

值得注意的是，在心力衰竭嚴(yán)重病例中（Ⅲ級組和Ⅳ級組患者），H－FABP陽性率與Mb相近，均顯著高于c Tn T。在本研究中，通過對H－FABP在CHF組各亞組的表達進行觀察，發(fā)現(xiàn)H－FABP表達隨心功能分級增加而逐漸升高，組間及各亞組之間均有明顯差異，表明CHF患者心肌損傷程度與心功能密切相關(guān)，并與病情嚴(yán)重程度一致。這一研究結(jié)果基本同于Arimoto等[11]的報道?？紤]可能的分子機制為：CHF時心肌細胞無氧代謝顯著增強，利用脂肪酸代謝供能相應(yīng)增加，因此心肌細胞內(nèi)H－FABP迅速升高；當(dāng)心肌細胞損傷細胞膜破壞后，H－FABP由于相對分子質(zhì)量較小而極易透過受損的細胞膜，被大量釋放入血。CHF患者隨病情加重，心肌組織灌注也越差，心肌細胞缺血缺氧加重，一方面脂肪酸代謝增強產(chǎn)生大量的H－FABP，另一方面心肌細胞損傷增多釋放H－FABP也增多，最終結(jié)果是細胞內(nèi)H－FABP釋放入血量也明顯增加。本研究同時也對NT－proBNP、c Tn T和Mb在CHF組各亞組的表達進行了比較。各亞組的NT－proBNP水平亦隨心功能分級增加而逐漸升高，組間差異及各亞組間差異均顯著；而c Tn T和Mb無明顯規(guī)律，表明c Tn T和Mb在評價CHF患者的心肌損傷嚴(yán)重程度方面尚不夠理想。

以上研究結(jié)果表明，H－FABP、NT－proBNP與CHF患者病情及心功能分級相一致，且Spearman直線相關(guān)分析提示HFABp與NT－proBNP呈顯著性正相關(guān)。目前，NT－proBNP是用于心衰的危險分層中備受關(guān)注的標(biāo)記物之一[12]，中國2007年《慢性心力衰竭診斷治療指南》已明確推薦將BNP與NTproBNP用于心力衰竭的診斷、病情評估與預(yù)后判斷，由此推測H－FABP對判定CHF患者病情嚴(yán)重程度及指導(dǎo)心功能分級的臨床價值可能與NT－proBNP相似。

綜上所述，H－FABP可用于CHF患者心肌損傷的檢測且其敏感性高于c Tn T，并與Mb相近，H－FABP對判定CHF患者病情嚴(yán)重程度具有重要的臨床價值。

[1]Liao J，Chan CP，Cheung YC，et al.Human heart－type fatty acid－binding protein for on－site diagnosis of early acute myocardial infarction[J].Int J Cardiol，2009，133（3）：420－423.

[2]McCann CJ，Glover BM，Menown IB，et al.Novel biomarkers in early diagnosis of acute myocardial infarction compared with cardiac troponin T[J].Eur Heart J，2008，29（23）：2843－2850.

[3]中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會，中華心血管病雜志編輯委員會.慢性心力衰竭診斷治療指南[J].中華心血管病雜志，2007，35（12）：1076－1095.

[4]涂植光，劉新光，章堯，等.臨床檢驗生物化學(xué)[M].北京：高等教育出版社，2006：227.

[5]Olivetti G，Abbi R，Quaini F，et al.Apoptosis in the failing human heart[J].N Engl J Med，1997，336（16）：1131－1141.

[6]Guerra S，Leri A，Wang X，et al.Myocyto death in the failing human heart is gender dependent[J].Circ Res，1999，85（9）：856－866.

[7]Setsuta K，Seino Y，Ogawa T，et al.Ongoing myocardial damage in chronic heart failure is related to activated tumor necrosis factor and Fas／Fas ligand system[J].Circ J，2004，68（8）：747－750.

[8]de Winter RJ，Lijmer JG，Koster RW，et al.Diagnostic accuracy of myoglobin concentration for the early diagnosis of acute myocardial infarction[J].Ann Emerg Med，2000，35（2）：113－120.

[9]Kim Y，Kim H，Kim SY，et al.Automated heart－type fatty acid－binding protein assay for the early diagnosis of acute myocardial infarction[J].Am J Clin Pathol，2010，134（1）：157－162.

[10]Niizeki T，Takeishi Y，Arimoto T，et al.Heart－type fatty acid－binding protein is more sensitive than troponin T to detect the ongoing myocardial damagein chronic heart failure patients[J].J Card Fail，2007，13（2）：120－127.

[11]Arimoto T，Takeishi Y，Shiqa R，et al.Prognostic value of elevated circulating heart－type fatty acid binding protein in patients with congestive heart failure[J].J Card Fail，2005，11（1）：56－60.

[12]Lainscak M，von Haehling S，Anker SD.Natriuretic peptides and other biomarkers in chronic heart failure：from BNP，NT－proBNP，and MR－pro ANP to routine biochemical markers[J].Int J Cardiol，2009，132（3）：303－311.