馮 華，聶明華，羅秀瓊，王祥培，鄒孔強，令狐昌敏

(1.貴州省遵義市藥品檢驗所，貴州 遵義 563002; 2.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 550002)

半夏厚樸湯出自張仲景《金匱要略》，由半夏、厚樸、茯苓、生姜、蘇葉組方，具有行氣散結(jié)、降逆化痰等之功效。用分煎法與合煎法制備的中藥復(fù)方湯劑，有效成分含量有何變化，藥理作用有何變化，一直是中醫(yī)藥理論和臨床實踐中值得探討的課題。特別是近年來單味中藥精制顆粒逐漸在臨床上推廣應(yīng)用，更引起了國家對單味中藥精制顆粒的重視。筆者以中藥經(jīng)方半夏厚樸湯中的有效成分和厚樸酚為指標，比較用合煎法與分煎法制得的該方湯劑中和厚樸酚含量差異，探索中藥復(fù)方湯劑不同制法對有效成分溶出量的影響，為單味中藥精制顆粒應(yīng)用于臨床提供一些理論依據(jù)。

1 儀器與試藥

Waters1525型高效液相色譜儀，KQ-300DE型超聲儀。半夏、厚樸、茯苓、生姜、蘇葉5味藥材飲片由遵義醫(yī)藥有限公司提供，經(jīng)遵義市藥品檢驗所鄧順超副主任中藥師鑒定均符合2010年版《中國藥典(一部)》收載品種標準;和厚樸酚對照品(批號為110730-2003609，中國藥品生物制品檢定所);甲醇為色譜純，水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱:Diamonisl C18柱 (200 mm×4.6 mm，5μm);流動相:甲醇 -水(78∶22);流速:1 mL/min;檢測波長:294 nm; 柱溫:25℃[1];進樣量:10μL。在此條件下的色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

對照品溶液:稱取和厚樸酚對照品11.6 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

合煎液供試品溶液(傳統(tǒng)煎煮法):稱取藥材飲片半夏12.0 g，厚樸9.0 g，茯苓12.0 g，生姜9.0 g，蘇葉6.0 g，加8倍量的水煎煮，保持微沸30 min，倒出煎液;藥渣再加8倍量的水煎煮20 min，合并兩次煎液，減壓干燥成干粉。稱取相當(dāng)原藥材處方量的干粉，置100 mL量瓶中，用開水溶解定容至刻度，精密吸取5 mL，置25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，稱重，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)25 min，取出，放冷，加甲醇補足質(zhì)量，搖勻，取續(xù)濾液，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得合煎液供試品溶液。

分煎液供試品溶液:稱取上述處方量的藥材半夏、厚樸、茯苓、生姜、蘇葉，分別加8倍量的水，以合煎液相同時間煎煮2次，制備各藥材的煎液，減壓干燥成干粉。稱取相當(dāng)原藥材處方量各藥材的干粉混合均勻，同合煎液法制得分煎液供試品溶液。

陰性對照品溶液:再分別按供試品溶液制備法制備不含厚樸藥材的合煎液、分煎液的陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

標準曲線繪制:分別精密稱取和厚樸酚對照品，用甲醇稀釋配制成質(zhì)量濃度分別為 1.393，1.856，2.320，2.786，3.248，3.712 g/L的系列和厚樸酚對照品溶液，各精密吸取10μL，按上述色譜條件依次測定，以峰面積積分值(A)對進樣量(C)進行線性回歸，得回歸方程 A=2.0×106X-14 917，r=0.999 3(n=6)。結(jié)果表明，和厚樸酚進樣量在13.93～37.12μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗:精密吸取同一對照品溶液10μL，重復(fù)進樣6次。結(jié)果峰面積的 RSD=0.5%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液，分別于 0，4，8，16，24 h 時測定。結(jié)果含量的 RSD合煎液為1.2%，分煎液為1.5%，表明兩種供試品溶液在24 h內(nèi)均穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗:取同一樣品各5份，依法制備供試品溶液并測定含量。結(jié)果合煎液的 RSD=0.8%(n=5)，分煎液的 RSD=1.0%(n=5)，表明方法重復(fù)性好。

加樣回收試驗:按分煎液、合煎液制備項下制備半夏厚樸湯傳統(tǒng)湯劑及其配方顆粒湯劑各6份，按進樣量10μL折算，精密加入和厚樸酚對照品 3 個質(zhì)量濃度(10.40，13.00，15.20 μg/mL)，進行加樣回收試驗，濾液過0.45μm濾膜，并按色譜條件進樣，依法測定。結(jié)果見表1。

表1 和厚樸酚加樣回收試驗結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測定

分別按分煎液、合煎液供試品溶液制備方法制備溶液并測定含量，求樣品平均含量。結(jié)果和厚樸酚在一個復(fù)方中的含量分別為合煎液1.580 mg、分煎液1.596 mg。可見，相同藥材不同方法制備的半夏厚樸湯中，分煎液、合煎液中和厚樸酚的含量沒有差異。

3 討論

采用高效液相色譜法測定中藥復(fù)方制劑中的和厚樸酚，可用多種不同組成的流動相系統(tǒng)[2-5]。本試驗選擇藥典方法，和厚樸酚與雜質(zhì)峰能達到基線分離。

厚樸有燥濕消痰、下氣除滿等功效，故對半夏厚樸湯合煎湯劑與分煎湯劑進行了和厚樸酚含量的對比研究。從研究結(jié)果可以看出，分煎液、合煎液中有效成分和厚樸酚的含量無變化。

本試驗表明，在相同條件下，半夏厚樸湯中和厚樸酚的含量在分煎、合煎煎煮過程中無其他影響因素。本試驗研究可為中藥精制配方顆粒應(yīng)用于臨床提供一些理論依據(jù)。

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