張金芝 高曉紅 張敏 陳冬雪 范新田

朱砂蓮為馬兜鈴科馬兜鈴屬植物，性味苦、辛、寒。其主要功能清熱解毒，消腫止痛［1］。但其化學成分馬兜鈴酸可直接損傷腎小管及間質(zhì)，致近端腎小管刷狀緣脫落、壞死［2］。有報道廣西朱砂蓮藥材水提物和醇提物均能明顯的抑制小鼠巴豆油致耳廓腫脹、腹腔毛細血管通透性亢進;且能明顯減少醋酸致小鼠扭體次數(shù)及延長熱板致病的潛伏期有鎮(zhèn)痛作用［3］。本課題旨在利用現(xiàn)代工藝技術(shù)進行提取、萃取、去除朱砂蓮中有害成分馬兜鈴酸，并觀察其對光熱疼痛模型小鼠的影響，以期開發(fā)安全有效的中藥鎮(zhèn)痛劑。

1 資料與方法

1.1 一般資料 實驗動物:昆明種小鼠(♀♂兼用，由長春高新醫(yī)學動物實驗研究中心提供)。藥品與試劑:朱砂蓮(購于長春中藥材批發(fā)市場);哌替啶(沈陽第一制藥廠，011108);阿司匹林(華北制藥廠，990208)。實驗儀器:光熱尾痛儀(SW-200，成都泰盟科技有限公司)。

1.2 實驗方法 本實驗應(yīng)用小鼠光熱尾痛儀。將小鼠固定在特制的塑料筒中，令其尾部暴露在外并自然下垂，待動物安靜20 min后再予測定。輻射熱源照射相當于尾部中、下三分之一交界處的皮膚，當照射開始同時啟動秒表，待動物尾部出現(xiàn)明顯逃避反應(yīng)時，關(guān)閉光源并同時停止計時［4］。預(yù)選痛閾4～6 s昆明種小鼠50只，♀♂各半，體重18～22 g，隨機分5組，分別為對照組(NS，生理鹽水0.1 ml·10 g-1)、阿司匹林組(ASP，0.3 g/kg)、哌替啶組(Pethidine，50 mg/kg)、去馬兜鈴酸朱砂蓮醇提物低劑量組(ZhSL-L，50 mg/kg)、朱砂蓮醇提物中劑量組(ZhSL-M，100 mg/kg)、朱砂蓮醇提物高劑量組(ZhSL-H，200 mg/kg)，各組均ig給藥，分別測定30 min、60 min、90 min、120 min、180 min、240 min 小鼠痛閾值。甩尾反應(yīng)潛伏期(Tail-Flick Latency，TFL)。每5 min測定一次，取三次測定的平均值作為基礎(chǔ)傷害性感受閾。若動物在鎮(zhèn)痛作用下TFL延長至超過15s，則停止照射并以15 s作為甩尾潛伏期的上限，以免照射過久灼傷皮膚。

2 實驗結(jié)果

實驗結(jié)果如表1所示。

表1 去馬兜鈴朱砂蓮提取物對小鼠光熱刺激甩尾實驗的影響(±s)

表1 去馬兜鈴朱砂蓮提取物對小鼠光熱刺激甩尾實驗的影響(±s)

注:與NS組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.01，＊＊＊P＜0.001;與基礎(chǔ)痛閾比較:P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001

3±0.82 3.73±0.80 3.58±0.87 ASP 200 3.51±0.75 4.30±1.05* 5.45±1.20* 5.21±1.14* 4.56±0.84* 4.25±0.58 4.13±1.08 Pethidine 25 3.32±0.66 6.37±1.25＊＊＊ 5.99±1.35＊＊ 4.87±1.15* 4.61±1.15* 3.87±0.70 3.70±1.05 ZhSL-L 50 3.38±0.83 3.99±0.71 5.42±0.89＊＊ 4.29±0.95 4.28±0.53 3.87±0.77 3.75±0.78 ZhSL-M 100 3.20±0.59 4.04±0.67 5.64±1.36＊＊ 5.52±1.01＊＊ 4.48±0.60* 4.10±0.58 4.09±0.72 ZhSL-H 200 3.21±0.85 4.26±0.78 5.83±1.32＊＊＊ 5.79±1.08＊＊ 4.28±0.66*30 min 60 min 90 min 120 min 180 min 240 min NS 0.1 ml·10 g-1 3.29±0.79 3.49±0.75 3.98±0.88 3.74±1.15 3.6劑量(mg/kg) 基礎(chǔ)痛閾(s) 給藥后痛閾(s)4.07±1.06 4.70±1.54

3 討論

目前國家食品藥品管理機構(gòu)已經(jīng)決定加強對一些有含馬兜鈴酸的中藥材及其制劑的監(jiān)督管理，因為服用含馬兜鈴酸的中藥可引起腎臟損害給患者帶來生命危險。含有馬兜鈴酸的中草藥種類很多包括青木香、朱砂蓮等等，由含有馬兜鈴酸藥材的中成藥也有很多。有報道引起馬兜鈴酸腎病的藥物為冠心蘇合丸、龍膽瀉肝丸，其中女性占69.49%，平均年齡為64.4歲，平均服用藥物史為8年，通常認為臨床濫用中藥及對中藥毒性認識不足而是引起的腎損害的主要原因［5］。利用現(xiàn)代工藝技術(shù)進行提取、萃取、去除朱砂蓮中有害成分馬兜鈴酸是使朱砂蓮更大的發(fā)揮鎮(zhèn)痛治療作用而對人體危害減少的重要方法。本研究結(jié)果表明，與給藥前和對照組比較，小鼠一次性灌胃給去馬兜鈴朱砂蓮提取物50、100、200 mg/kg后與基礎(chǔ)痛閾值比較，明顯延長縮尾反應(yīng)潛伏期;與陰性對照組比較也明顯延長縮尾反應(yīng)潛伏期。給藥后60 min開始顯效，60、90、120 min時較明顯，提示去馬兜鈴朱砂蓮提取物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，且其中、高劑量組的作用強度與阿司匹林相似。

［1］ 劉凡，吳家榮，李林，等.貴州朱砂蓮藥材的生藥鑒定.貴州醫(yī)藥，1999，23(3):157-159.

［2］ 趙輝，張健夫.馬兜鈴酸的結(jié)構(gòu)分析和性質(zhì)研究.周口師范學院報，2003，20(2):34-36.

［3］ 白景玲，饒光宇，陳秀芬，等.血苕與廣西朱砂蓮抗炎鎮(zhèn)痛作用的比較研究中藥藥理與臨床，2007，23(2):43-44

［4］ 李興富，淤澤溥，李秀芳，等.香藤膠囊對小鼠的鎮(zhèn)痛作用.中國藥物依賴雜志，2003，12(4):270-271.

［5］ 史文慧，郭蓉，羅朝利，等.59例馬兜鈴酸腎病的報道.藥物流行病學雜志，2008，17(2):101-102.