高亞妮，田呈瑞*，康宇新，郝 果，周 瑞

(陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062)

超聲波提取花椒皮總黃酮工藝及其抗氧化性研究

高亞妮，田呈瑞*，康宇新，郝 果，周 瑞

(陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062)

以花椒為原料，采用超聲波輔助法提取花椒果皮中的總黃酮，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)研究提取最佳工藝條件。結(jié)果表明：花椒果皮總黃酮超聲提取的最佳工藝條件為料液比1:30(g/mL)、提取時(shí)間50min、乙醇體積分?jǐn)?shù)45%。采用紫外分光光度法測(cè)定其總黃酮含量，得率可達(dá)到3.56%?；ń菲た傸S酮清除DPPH自由基和·OH的IC50分別為0.855μg/mL和132.18μg/mL；同時(shí)可以看出花椒皮總黃酮也具有很強(qiáng)的還原能力，且高于BHT。

超聲波提取；花椒果皮；黃酮；正交試驗(yàn)；抗氧化

花椒(Zanthoxylum bungeanumMaxim，ZBM)為蕓香科花椒屬植物，其果皮是我國(guó)特有的藥食兩用香料，具有驅(qū)蟲麻醉、防腐、保健、增加食欲等作用[1]。我國(guó)花椒主產(chǎn)于四川漢源、陜西韓城、鳳縣、河南輝縣、河北陟縣等地?；ń饭ぶ械闹饕煞钟谢ń窊]發(fā)油、生物堿、酰胺類、香豆素、黃酮類等，此外還有少量的氨基酸和礦物質(zhì)[2-3]?；ń返纳罴庸ぎa(chǎn)品主要有花椒精油、花椒油樹脂、微膠囊等[4]。目前，對(duì)花椒的研究中主要集中在花椒油的提取，酰胺類等研究，然而，對(duì)花椒中的多酚、香豆素、黃酮等活性物質(zhì)的相關(guān)研究，目前尚未見報(bào)道。黃酮類物質(zhì)具有抗氧化抗衰老、抗炎鎮(zhèn)痛、抗癌防癌等方面有顯著性的作用[5-6]。超聲波輔助法可以通過(guò)空化作用快速地提取植物細(xì)胞內(nèi)的有效成分，具有省時(shí)、高效、操作簡(jiǎn)單等作用[7]。因此，本實(shí)驗(yàn)研究超聲波技術(shù)提取花椒皮總黃酮的影響因素，并通過(guò)二次回歸試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝條件；并研究花椒皮總黃酮的抗氧化性，為花椒的進(jìn)一步綜合開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

花椒：陜西省韓城市西莊鎮(zhèn)花椒交易市場(chǎng)；選取顆粒飽滿而有光澤的干花椒果皮，用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎成細(xì)分，5 0℃烘干過(guò)6 0目篩，入袋保存，備用。

乙醚(沸點(diǎn)30～60℃；分析純)、無(wú)水乙醇(分析純)天津市天力化學(xué)試劑有限公司；亞硝酸鈉(分析純)、硝酸鋁(分析純) 西安化學(xué)試劑有限公司；氫氧化鈉(分析純) 上海山海工學(xué)團(tuán)實(shí)驗(yàn)二廠；蘆丁(色譜級(jí)) 西安東瑞科教實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；DPPH(分析純) 美國(guó)Sigma公司；BHT(食品級(jí)) 天津市福晨化學(xué)試劑有限公司；其他試劑為分析純。

722型分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；KQ-200KDE型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 超聲波提取花椒皮總黃酮工藝流程

花椒干果皮粉→索氏抽提(脫脂及除脂溶性色素)→烘干→超聲波提取→冷卻→定容→測(cè)定

1.2.2 提取溶劑的選擇

采用超聲波輔助提取法對(duì)花椒中的總黃酮進(jìn)行提取時(shí)，可以選擇不同的有機(jī)溶劑作為溶劑，但是考慮到成本的高低，毒性的大小和回收的難易性，本實(shí)驗(yàn)中選用無(wú)水乙醇作為花椒黃酮的提取溶劑。

1.2.3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取蘆丁標(biāo)品40mg，用30%乙醇溶液溶解并定容至100mL，即為蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.4mg/mL)。分別取上述蘆丁標(biāo)品0、0.5、1、1.5、2mL于10mL容量瓶中，用80%乙醇溶液補(bǔ)至5mL，加入0.3mL 5%亞硝酸鈉溶液，搖勻靜置6min，接著加入0.3mL 10%硝酸鋁溶液，靜置6min后再加入4mL 4%氫氧化鈉溶液，搖勻，用蒸餾水稀釋至刻度線，15min后在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度[8-9]。以蘆丁標(biāo)品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性方程為y＝11.74x－0.0058，R2＝0.9991。

1.2.4 樣品中總黃酮的測(cè)定

移取0.5mL提取液于10mL容量瓶中，用80%乙醇溶液補(bǔ)至5mL，加入0.3mL 5%亞硝酸鈉溶液，搖勻靜置6min，接著加入0.3mL 10%硝酸鋁溶液，靜置6min后再加入4mL 4%氫氧化鈉溶液，搖勻，用蒸餾水稀釋至刻度線，15min后在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算總黃酮得率：

式中：y為樣品中總黃酮得率/%；c為依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的待測(cè)液中黃酮的質(zhì)量濃度/(mg/mL)；m為樣品的質(zhì)量/g；V1為樣品提取液測(cè)定時(shí)用的體積/ 0.5mL；V2為樣品提取液的總體積/50mL；V3為測(cè)定樣品時(shí)定容的體積/10mL。

1.2.5 花椒總黃提取參數(shù)的確定

單因素試驗(yàn)條件：料液比(1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)；提取時(shí)間(20、30、40、50、60、70min)；提取溫度(30、40、50、60、70、80℃)；超聲功率(80、100、120、140、160、180W)；乙醇體積分?jǐn)?shù)(40%、50%、60%、70%、80%)。

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗(yàn)，得出最佳提取工藝條件。

1.2.6 DPPH自由基清除率的測(cè)定

稱取10mg DPPH，用無(wú)水乙醇溶解并定容于250mL容量瓶中，配制成濃度1×10-4mol/L的溶液備用。將花椒皮總黃酮提取液稀釋成不同濃度梯度，各取2mL不同濃度的稀釋液于試管中，再加入2mL配制好的DPPH溶液，混合均勻，反應(yīng)30min后，于波長(zhǎng)517nm處測(cè)定其吸光度(Ai)；以2mL無(wú)水乙醇代替2mL DPPH的吸光度(Aj)；以2mL無(wú)水乙醇代替2mL待測(cè)溶液的吸光度(A0)[10-11]。計(jì)算DPPH自由基清除率(Y)：

1.2.7 對(duì)·OH清除率的測(cè)定

將花椒皮總黃酮提取液用蒸餾水配制成不同濃度，各取1mL不同濃度的稀釋液于試管中，依次地加入1mL 6mmol/L FeSO4和1mL 6mmol/L H2O2，混合均勻后靜置10min；再加入1mL 6mmol/L水楊酸，混勻靜置30min，在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定其吸光度(Ai)；以蒸餾水代替水楊酸的吸光度(Aj)；以蒸餾水代替總黃酮溶液的吸光度(A0)[12-13]。計(jì)算·OH清除率(Y)：

1.2.8 花椒皮總黃酮還原力的測(cè)定[14-15]

取2.5mL不同濃度總黃酮溶液，加入2.5mL 0.2mol/L磷酸緩沖液(pH6.6)和2.5mL 1%鐵氰化鉀溶液，50℃水浴20min后急速冷卻，加入含2.5mL 10%三氯乙酸溶液，再取5mL混合液，加入4mL蒸餾水及1mL 0.1%三氯化鐵水溶液，混合10min于波長(zhǎng)700nm處測(cè)定吸光度。吸光度越大則還原力越強(qiáng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 提取時(shí)間對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響

稱取6份脫脂花椒粉(每份1g)于錐形瓶中，按照料液比1:25在每份中加入50%乙醇溶液25mL，設(shè)置提取溫度45℃，提取功率100W，采用超聲波震蕩分別提取20、30、40、50、60、70min，過(guò)濾并定容至50mL，在510nm處測(cè)定提取液的吸光度?？疾焯崛r(shí)間對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響。

圖1 提取時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響Fig.1 Effect of extraction time on extraction rate of total flavonoids

由圖1可知，總黃酮得率隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)呈上升的趨勢(shì)，50min達(dá)到最大，之后得率有所下降。原因可能是由Fick定理可知，提取時(shí)間與得率呈正比，在一定條件下，得率隨超聲提取時(shí)間的延長(zhǎng)而增大[16]。但是長(zhǎng)時(shí)間地進(jìn)行超聲波提取，改變了超聲作用的環(huán)境，造成黃酮類物質(zhì)的氧化，致使總黃酮得率反而有所下降[17-18]。綜合考慮選擇50min為最佳提取時(shí)間。

2.1.2 提取溫度對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響

設(shè)置提取溫度20、30、40、50、60、70℃，其他操作條件同2.1.1節(jié)，考察提取溫度對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響。

圖2 提取溫度對(duì)總黃酮得率的影響Fig.2 Effect of extraction temperature on extraction rate of total flavonoids

由圖2可知，在40℃時(shí)，花椒皮總黃酮得率達(dá)到了最大值，其之前和之后的得率都有所下降，并且得率都基本一致，差異不明顯?？赡苁窃诔暡ㄟ^(guò)程中，溫度受到外部因素的影響，不易控制，導(dǎo)致40℃前后得率差異不大。

2.1.3 提取功率對(duì)超聲波提取效果的影響

設(shè)置超聲波功率80、100、120、140、160、180W，其他操作條件同2.1.1節(jié)，考察提取功率對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響。

由圖3可知，花椒皮總黃酮得率隨著提取功率的增大，140W時(shí)得率達(dá)到最大值，但之后得率明顯下降，并且在高功率提取時(shí)對(duì)儀器的損耗較大，因此選擇140W為最佳提取功率。

圖3 超聲功率對(duì)總黃酮得率的影響Fig.3 Effect of ultrasonic treatment power on extraction rate of total flavonoids

2.1.4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)超聲波提取效果的影響

設(shè)置乙醇體積分?jǐn)?shù)40%、50%、60%、70%、80%、90%，其他操作條件同2.1.1節(jié)，考察乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響。

圖4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮得率的影響Fig.4 Effect of ethanol concentration on extraction rate of total flavonoids

由圖4可知，在50%和60%乙醇體積分?jǐn)?shù)下，花椒皮總黃酮得率比較高，之后得率明顯下降，在90%時(shí)又有所上升，但低于50%時(shí)的得率。其原因可能是花椒中含有的脂溶性黃酮較少，而醇溶性雜質(zhì)的含量隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加而增加，減少了黃酮與溶劑結(jié)合的機(jī)會(huì)，從而導(dǎo)致得率的下降[19]。綜合考慮黃酮的得率和乙醇的成本，選擇50%的乙醇最佳。

2.1.5 料液比對(duì)超聲波提取效果的影響

設(shè)置料液比1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35 (g/mL)，其他操作條件同2.1.1節(jié)，考察料液比對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響。

由圖5可知，隨著提取劑用量的增大，花椒皮總黃酮得率逐漸增加，在1:25時(shí)得率達(dá)到最大值，其后再增加溶劑的量，得率反而有所下降。其原因可能是開始時(shí)隨著溶劑的增加，加大了有效成分從細(xì)胞壁內(nèi)擴(kuò)散出來(lái)，但溶劑用量增大到一定程度，減少了細(xì)胞壁對(duì)于超聲波能量的吸收。綜合考慮對(duì)乙醇的節(jié)省，選1:25為最佳提取料液比。

圖5 料液比對(duì)總黃酮得率的影響Fig.5 Effect of solid-to-solvent on extraction rate of total flavonoids

2.2 超聲波提取花椒皮總黃酮工藝二次旋轉(zhuǎn)回歸正交試驗(yàn)優(yōu)化

2.2.1 試驗(yàn)因素與水平選取

由單因素試驗(yàn)結(jié)果可知，提取功率各水平對(duì)總黃酮得率的影響不大，利用超聲波提取時(shí)溫度不是很穩(wěn)定，所以固定提取溫度和提取功率，選用料液比、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)3個(gè)因素，進(jìn)行三因素二次回歸旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)，因素及編碼水平見表1。

表1 超聲波提取花椒皮總黃酮工藝優(yōu)化二次旋轉(zhuǎn)回歸正交試驗(yàn)因素和編碼水平表Table 1 Factors and their coded levels for quadratic regression orthogonal rotary combination design

2.2.2 二次旋轉(zhuǎn)回歸組合設(shè)計(jì)及結(jié)果

2.2.2.1 回歸方程的建立與檢驗(yàn)

根據(jù)表2結(jié)果，建立花椒皮總黃酮得率與料液比、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)3因素的數(shù)學(xué)回歸模型：Y＝3.28949＋0.30883X1－0.01990X2＋0.05705X3－－－－0.03750X1X2－0.17000X1X3－0.06500X2X3。由表3方差分析可知，回歸方程的失擬性檢驗(yàn)F1＞F0.05(5,8)，差異顯著；回歸性檢驗(yàn)F2＞F0.01(9,13)，差異極顯著，說(shuō)明建立的二次旋轉(zhuǎn)回歸模型適當(dāng)。在α＝0.10顯著水平剔除不顯著項(xiàng)后，簡(jiǎn)化后的回歸方程為：Y＝3.28949＋0.30883X1－－－0.17000X1X3。

各因素對(duì)花椒皮總黃酮得率影響程度的大小為料液比＞乙醇體積分?jǐn)?shù)＞提取時(shí)間。

表2 超聲波提取花椒皮總黃酮工藝優(yōu)化二次旋轉(zhuǎn)回歸正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Quadratic regression orthogonal rotary combination design protocol and corresponding results

表3 試驗(yàn)結(jié)果方差分析表Table 3 Analysis of variance for the experimental results of quadratic regression orthogonal rotary combination design

2.2.2.2 單因素效應(yīng)分析

由圖6可知，在所選因素水平內(nèi)，提取時(shí)間和乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)花椒皮總黃酮得率的影響趨勢(shì)為先增大后減少；總黃酮得率隨著料液比的增大一直處于上升的趨勢(shì)，到達(dá)一定程度時(shí)，得率趨于穩(wěn)定。但是隨著料液比的增大，對(duì)于乙醇的用量很大，因此提取時(shí)應(yīng)控制其料液比在一定的范圍內(nèi)。

圖6 單因素效應(yīng)分析圖Fig.6 Single-factor analysis of the effects of three extraction conditions on extraction rate of total flavonoids

2.2.2.3 雙因素交互作用分析

由方差分析可知，本實(shí)驗(yàn)所建立的回歸模型中，在α＝0.10水平下，X1X2、X2X3交互作用均不顯著，X1X3因素交互作用較顯著，即料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)交互作用對(duì)花椒皮總黃酮得率有顯著影響，因此，確定提取時(shí)間為零水平，得到料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)交互作用的響應(yīng)曲面圖。

圖7 料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)花椒皮總黃酮得率的交互作用Fig.7 Response surface plot showing the interaction effect of solid-tosolvent ratio and ethanol concentration on extraction rate of total flavonoids

由圖7可知，花椒黃酮得率隨料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)的變化而變化。隨著二因素編碼水平的升高，花椒皮總黃酮得率呈明顯的增加趨勢(shì)，當(dāng)二因素編碼值達(dá)到一定交互組合后，總黃酮得率緩慢下降?？赡艿脑蚴请m然較大的料液比有利于溶質(zhì)的分散，但高濃度的乙醇不一定就利于花椒粉中黃酮類物質(zhì)的溶出。因此，只有當(dāng)料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)合理搭配時(shí)才能獲得很好的提取效果。

2.2.3 提取工藝參數(shù)的優(yōu)化和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

通過(guò)DPS軟件分析，采用頻率分析方法尋找最優(yōu)提取條件，總黃酮得率高于3.03%的方案有30個(gè)，頻率分析結(jié)果見表4。由表4可知，在95%置信區(qū)間內(nèi)花椒皮總黃酮得率高于3.03%的優(yōu)化提取方案為料液比1:29.795～1:32.175(g/mL)，提取時(shí)間46.71～53.29min，乙醇體積分?jǐn)?shù)41.02%～48.11%，取優(yōu)化后提取條件的平均值方案X1＝1:1.198，X2＝0，X3＝－0.548，即料液比1:30.985(g/mL)、提取時(shí)間50min、乙醇體積分?jǐn)?shù)45.48%。為了方便用于指導(dǎo)實(shí)際生產(chǎn)，將最佳提取條件定為料液比1:30、提取時(shí)間50min、乙醇體積分?jǐn)?shù)45%。按照最佳提取條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，重復(fù)3次，取平均值，得到花椒皮總黃酮得率為3.56%，與理論值(3.98%)比較接近，進(jìn)一步說(shuō)明所用的數(shù)學(xué)回歸模型是較合適的。

表4 大于3.03%的30個(gè)方案中各變量取值的頻率分布Table 4 Frequency distribution of three variables from 30 programs resulting in > 3.03% extraction rate of total flavonoids

2.3 花椒皮總黃酮抗氧化能力的分析

2.3.1 花椒皮總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除效果

圖8 不同質(zhì)量濃度總黃酮對(duì)DPPH自由基清除效果Fig.8 Comparison of scavenging effects of total flavonoids and BHT at various concentrations on DPPH free radicals

由圖8可以看出，在0.5～2μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，花椒皮總黃酮質(zhì)量濃度與DDPH自由基清除率表現(xiàn)了良好的量效關(guān)系，清除率隨總黃酮質(zhì)量濃度的增大表現(xiàn)了逐步上升的趨勢(shì)。花椒皮總黃酮清除DPPH自由基的IC50為0.855μg/mL，BHT清除DPPH自由基的IC50為1.32μg/mL，BHT的IC50大約是花椒皮總黃酮IC50的1.5倍，花椒皮總黃酮表現(xiàn)出優(yōu)于BHT的清除自由基的能力。2.3.2 花椒皮總黃酮對(duì)·OH清除效果

圖9 不同質(zhì)量濃度總黃酮對(duì)·OH清除效果Fig.9 Comparison of scavenging effects of total flavonoids and BHT at various concentrations on hydroxyl free radicals

由圖9可知，在40～200μg/mL范圍內(nèi)，花椒皮總黃酮對(duì)·OH的清除作用隨質(zhì)量濃度的增大而增強(qiáng)，但低于BHT對(duì)·OH的清除作用。在40～160μg/mL的質(zhì)量濃度內(nèi)，BHT的清除作用明顯高于花椒皮總黃酮，在隨后的質(zhì)量濃度中，花椒皮總黃酮對(duì)·OH的清除能力迅速加強(qiáng)，基本與BHT的清除作用趨于一致。通過(guò)數(shù)學(xué)模擬曲線方程可知：花椒皮總黃酮清除·OH的IC50為132.18μg/mL，BHT清除·OH的IC50為127.95μg/mL，在高質(zhì)量濃度時(shí)，兩者的清除能力差異不大。

2.3.3 花椒皮總黃酮還原力分析

圖10 花椒皮總黃酮的還原力Fig.10 Comparison of reducing power of total flavonoids and BHT at various concentrations

由圖10可看出，花椒皮總黃酮和BHT吸光度都隨質(zhì)量濃度的增大而逐漸增加，其中花椒皮總黃酮吸光度明顯地比BHT的大，增加趨勢(shì)也比較快，說(shuō)明花椒皮總黃酮還原力顯著高于BHT的還原力。一般抗氧化劑是通過(guò)自身的還原作用給出電子而清除自由基，還原力越強(qiáng)，花椒皮總黃酮在某些方面表現(xiàn)出越強(qiáng)的抗氧化性。

3 結(jié) 論

3.1 通過(guò)單因素和二次旋轉(zhuǎn)回歸正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，得到超聲波法提取花椒皮總黃酮的最佳條件為料液比1:30、提取時(shí)間50min、乙醇體積分?jǐn)?shù)45%。確定了影響因素的主次順序?yàn)榱弦罕龋疽掖俭w積分?jǐn)?shù)＞提取時(shí)間。

3.2 通過(guò)清除自由基多體系的研究，花椒皮總黃酮具有極強(qiáng)的清除自由基的能力。其抑制DPPH自由基和·OH的IC50分別為0.855μg/mL和132.18μg/mL，花椒皮總黃酮對(duì)自由基的抑制能力大小為DPPH自由基＞·OH；同時(shí)可以看出花椒皮總黃酮也具有很強(qiáng)的還原能力，且高于BHT。說(shuō)明花椒皮總黃酮具有很好的抗氧化作用。

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Optimization of Ultrasonic-Assisted Extraction and Antioxidant Activity of Total Flavonoids fromZanthoxylum bungeanumMaxim Fruit Peel

GAO Ya-ni，TIAN Cheng-rui*，KANG Yu-xin，HAO Guo，ZHOU Rui
(College of Food Engineering and Nutritional Science, Shaanxi Normal University, Xi’an 710062, China)

With the aim of developing an ultrasonic-assisted procedure for the extraction of total flavonoids fromZanthoxylum bungeanumMaxim fruit peel, we performed an orthogonal array design based on one-factor-at-a-time experiments to determine optimal extraction conditions. A 45% ethanol/water solution was found to be the best solvent for total flavonoids and the optimal solid-to-solvent ratio was 1:30 (g/mL). An extraction duration of 50 min was found to be optimum. Under these conditions, the yield of total flavonoids was spectrometrically determined to be 3.56%. The IC50 values of the obtained extract for scavenging DPPH and hydroxyl free radicals were 0.855μg/mL and 132.18μg/mL, respectively. Moreover, the total flavonoids extracted fromZanthoxylum bungeanumMaxim fruit peel possessed stronger reducing power than BHT.

ultrasonic-assisted extraction；Zanthoxylum bungeanumMaxim fruit peel；total flavonoids；orthogonal array design；antioxidant activity

TS264

A

1002-6630(2012)18-0077-06

2011-07-25

高亞妮(1985—)，女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称焚Y源開發(fā)利用。E-mail：kaixingaoyani@163.com

*通信作者：田呈瑞(1955—)，男，教授，研究方向?yàn)槭称沸沦Y源開發(fā)與利用。E-mail：chrtian@snnu.edu.cn