陳仁洪 張經(jīng)良

肝炎患者一氧化氮異常及其臨床意義

陳仁洪 張經(jīng)良

目的探討急慢性肝炎患者一氧化氮異常及抗氧化能力改變的臨床價值。方法收集31例急性肝炎(AH)、28例慢性肝炎(CH)患者的血清，分別檢測其一氧化氮(NO)水平及抗氧化能力(TAO)。結(jié)果患者血清NO在AH、CH中的異常表達(dá)與對照組有顯著差異。AH組和CH組的TAO平均水平明顯高于對照組。結(jié)論急慢性肝炎患者血清NO的濃度明顯高于對照組，可能系NO對肝細(xì)胞其保護(hù)作用所致;慢性肝炎的TAO明顯低于急性肝炎，可能是因為慢性肝炎患者肝細(xì)胞能量匱乏和大量自由基產(chǎn)生而死亡的緣故。

肝炎;一氧化氮;異常

NO促進(jìn)或加重內(nèi)毒素及細(xì)胞因子介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，肝組織中NO含量增加可改變微循環(huán)，可能對肝細(xì)胞具有保護(hù)作用。因此，NO的改變與肝損傷的關(guān)系密切，而且備受臨床關(guān)注。本文分析急慢性肝炎患者總抗氧化能力(TAO)和NO水平，以探討其在肝病中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2002年1月至2003年6月本院傳染科住院患者血清59例。其中慢性肝炎28例(其中男23例、女5例)，平均年齡(50±10)歲;急性肝炎31例(其中男25例、女6例)，平均年齡(46±12)歲。肝炎患者的診斷按2000年(西安)全國第十屆全國傳染病及寄生蟲病學(xué)分會、肝病分會聯(lián)合修訂的標(biāo)準(zhǔn)［1］，排除其他疾病，均為單純性急慢性肝病。所有患者于入院第二天清晨采集空腹靜脈血，于1 h內(nèi)分離血清于-80℃保存?zhèn)溆谩Ａ砗曷暭瘓F(tuán)健康體檢人群50份血清(ALT＜30U/L，排除脂肪肝及各型肝炎病毒肝炎)NO和TAO檢測做對照組。各組間性別和年齡分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 血清NO和TAO定量分析方法血清NO采用硝酸還原酶法檢測。血清TAO測定采用化學(xué)比色法，用分光光度計在520nm波長處比色測其吸光度，根據(jù)在37℃時每ml血清每分鐘使反應(yīng)體系的吸光度增加的能力，求出肝病患者的抗氧化能力單位(U/ml)。所有實驗室檢查均由我院檢驗科檢測。

2 結(jié)果

急慢性肝炎組織患者血清NO的平均濃度均非常顯著地高于正常對照組(P＜0.01);急慢性肝炎患者之間無顯著差異。急性肝炎患者TAO顯著地高于正常對照組(P＜0.01);慢性肝炎患者的TAO明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);急性肝炎患者的TAO高于慢性肝炎患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 肝炎患者NO、TAO濃度(±s)變化

表1 肝炎患者NO、TAO濃度(±s)變化

組別例數(shù)NO(μmol/ml)TAO(U/ml)急性肝炎5057.0±0.919.7±2.4 3189.0±36.931.2±2.2慢性肝炎2888.0±48.825.2±11.6正常對照

3 討論

肝細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、貯脂細(xì)胞等在細(xì)胞脂多糖、白細(xì)胞介導(dǎo)素-1、腫瘤壞死因子和干擾素等誘導(dǎo)下產(chǎn)生一氧化氮合酶(NOS)，NOS催化底物L(fēng)-精氨酸生成NO［2，3］。NO在調(diào)節(jié)肝細(xì)胞白蛋白合成中起重要作用，NO示一種內(nèi)源性凋亡抑制劑，NO可通過抑制caspase-3樣蛋白酶活化，從而防止GalN +TNF-α介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄依賴的肝細(xì)胞凋亡［4］。在急性肝臟病變時，局部升高NO能擴(kuò)張小血管調(diào)節(jié)灌流，降低肝臟酶活性，抑制肝細(xì)胞的有氧代謝及低血流下的血小板聚集，與超氧化物結(jié)合形成無毒代謝產(chǎn)物NO3ˉ，從而避免氧自由基損害細(xì)胞，有助肝臟度過應(yīng)急期，對肝細(xì)胞起保護(hù)作用。AH組CH和組的血清NO平均水平顯著高于對照組，TAO在AH組和CH組也明顯高于對照組，可能是由于NO對肝臟的不同作用主要取決于NO的濃度和細(xì)胞來源，濃度在一定范圍內(nèi)以及來源于內(nèi)皮細(xì)胞者對組織器官和細(xì)胞具有保護(hù)作用的表現(xiàn)。

將枯否氏細(xì)胞或巨噬細(xì)胞與細(xì)胞共同培養(yǎng)，肝細(xì)胞合成白蛋白明顯增加;加入內(nèi)毒素(Lipopolysaccharide LPS)后白蛋白合成減少，培養(yǎng)基上清液中NO明顯增加，而NO釋放的過程與肝細(xì)胞合成減少相一致，用NO拮抗劑能使白蛋白合成增加［5］。慢性肝病患者多伴有腸源性內(nèi)毒素血癥(Intestinal endotoxemia IETM)［6］，內(nèi)毒素(LPS)可誘導(dǎo)細(xì)胞因子的分泌、釋放，刺激肝內(nèi)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的過渡表達(dá)，從而產(chǎn)生大量的NO。NO可影響肝細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成和能量代謝，與慢性肝病低蛋白血癥、低凝血因子和其他肝功能障礙有密切關(guān)系，進(jìn)而加重肝細(xì)胞的損傷，使白蛋白合成減少。高濃度的NO通過與酶的活性中心-非血紅素硫鐵復(fù)合物結(jié)合，抑制多種與線粒體電荷傳遞系統(tǒng)及檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶，如檸檬酸合成酶、烏頭酸酶等，使肝細(xì)胞能量匱乏或大量自由基產(chǎn)生而死亡，可能是慢性肝病比急性肝炎的TAO低的原因。

［1］中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)會、肝病分會聯(lián)合修訂.病毒性肝炎防治方案.中華傳染病雜志，2001，19(1):56-62．

［2］Abrams GA，Trauner M，Nathanson MH.Nitric oxide and liver disease.Gastroenterologist，1995，3:220-233．

［3］邢卉春，王守義．一氧化氮在肝臟損害中的作用．中華傳染病雜志，1998，16:61-63．

［4］向曉星，王國俊，蔡雄．爆發(fā)性肝細(xì)胞凋亡的阻斷治療研究．肝臟，2001:64-65．

［5］Hibbs JB，Taintor RR，Vavrin Z，et al.Nitric oxide:a cytotoxicactivated macrophage effector molecule，Biochem Biophy Res Commun，1998，157:37．

［6］Veglio F，Pinna G，et al.Plasma endothelin levels in cirrhosis subject.J Hepatol，1992，15:85-87．

252300山東省聊城市陽谷縣疾病預(yù)防控制中心(陳仁洪);山東省淄博市第四人民醫(yī)院(張經(jīng)良)