德州市藥品檢驗(yàn)所（253000）呂光宇 劉風(fēng)琴 李秀珍 李文

紫外分光光度法具有操作簡便、適應(yīng)性廣、快速等優(yōu)點(diǎn)，在藥品檢驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。測量不確定度是判定測量結(jié)果可信度的依據(jù)，對現(xiàn)代的分析測定工作具有實(shí)際的重要意義。根據(jù)《化學(xué)分析中不確定度的評估指南》[1]對紫外分光光度法維生素B2注射液含量的不確定度進(jìn)行評估，并建立紫外分光光度法測定維生素B2注射液含量的不確定度的分析方法。

1 儀器與試藥

TU-1901 型雙光束紫外-可見分光光度計(jì)，XS105型梅特勒電子分析天平， 維生素B2注射液 （生產(chǎn)廠家：林州市亞神制藥有限公司，批號(hào)：1102208），水為純化水，10%醋酸溶液、14%醋酸鈉溶液均為新配溶液。

2 測定方法

精密量取本品（2ml:10mg）2ml至1000ml容量瓶中，加10%醋酸溶液2ml與14%醋酸鈉溶液7ml，用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版附錄ⅣA）[2]，在444nm波長處測定吸光度，按C17H20N4O6的吸收系數(shù)（）為323計(jì)算，即得。

3 不確定度分析

3.1 建立測定結(jié)果的數(shù)學(xué)模型

P:維生素B2（C17H2ON4O6）的標(biāo)示百分含量（%）

A:供試品溶液的吸光度

V1:2ml單標(biāo)線移液管取供試品溶液的體積

V2: 1000ml容量瓶中供試品溶液的體積

L:液層厚度（cm）

3.2 測量不確定度各分量計(jì)算

3.2.1 V1(2ml單標(biāo)線吸量管體積)相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度[Ur (VS1)]。

3.2.1.1 校準(zhǔn) 《常用玻璃量器檢定規(guī)程》JJG196-2006，規(guī)定A等品2ml單標(biāo)線吸量管的允差為±0.010ml，按均勻分布轉(zhuǎn)化，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3.2.1.2 重復(fù) 同一2ml 單標(biāo)線吸量管吸取2.0ml水，稱重，重復(fù)10次，計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)偏差為：U（VS1）2=0.001。

3.2.1.3 溫度 該吸量管在20℃校準(zhǔn)，本實(shí)驗(yàn)室溫度為24℃，在（20±4）℃范圍內(nèi)變化近似為矩形分布，水的膨脹系數(shù)為2.1×10-4/℃，按矩形分布計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

以上三種分量合成得：U（VS1）=

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3.2.2 V2(1000ml單標(biāo)線容量瓶體積)相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度[Ur(VS2)]。

3.2.2.1 校準(zhǔn) 《常用玻璃量器檢定規(guī)程》JJG196-2006，規(guī)定A等品1000ml單標(biāo)線容量瓶 的允差為±0.60ml，按均勻分布轉(zhuǎn)化，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3.2.2.2 重復(fù) 同一1000ml 單標(biāo)線容量瓶用水充至刻度，稱重，重復(fù)10次，計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)偏差為：U（VS2）2=0.0048。

3.2.2.3 溫度 該吸量管在20℃校準(zhǔn)，本實(shí)驗(yàn)室溫度為24℃，在（20±4）℃范圍內(nèi)變化，水的膨脹系數(shù)為2.1×10-4，按矩形分布計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

以上三種分量合成得：

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3.2.3 L（液層厚度）不確定度U(L) 比色皿的厚度的校準(zhǔn)偏差應(yīng)在0.005cm之內(nèi)，按矩形分布計(jì)算，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為U(L1)=0.005=2.9×10-3。本次試驗(yàn)所用比色皿的標(biāo)識(shí)厚度為1cm，則其相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：