夏 偉 陳 芳

1.重慶市大渡口區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，重慶 400084；2.四川省自貢市第三人民醫(yī)院檢驗科，四川自貢 643020

丙型肝炎是一種主要經(jīng)血液傳播的疾病，也可經(jīng)性傳播和母嬰垂直傳播，在醫(yī)院感染中經(jīng)輸血傳播是常見原因之一[1]，其病原體為丙型肝炎病毒（HCV），屬于RNA病毒。丙型肝炎慢性化率高達(dá)80%[2]，HCV慢性持續(xù)感染可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌。HCV相關(guān)疾病傳統(tǒng)的實驗室檢測指標(biāo)為抗HCV的檢測。隨著分子生物學(xué)技術(shù)在臨床中的推廣應(yīng)用，HCV RNA檢測已成為實驗室的常用指標(biāo)，在判斷丙型肝炎病毒復(fù)制與否及病情嚴(yán)重程度方面具有重要價值。本研究探討了HCV相關(guān)疾病和不同感染類型中HCV RNA檢測的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

血清標(biāo)本共179份，來自于2008年6月～2011年11月本院門診及住院患者，均確診為HCV感染。所有標(biāo)本均為空腹靜脈采血。其中男96例，年齡24～79歲；女83例，年齡18～77歲，包括慢性丙型肝炎101例（其中20例合并HBV感染），肝硬化45例（其中7例合并HBV感染），肝癌33例（其中4例合并HBV感染），共有31例HBV和HCV重疊感染者。同時，以60例單純HBV感染的血清作為對照，檢測HBV DNA病毒載量。

1.2 儀器、試劑及方法

1.2.1 儀器 ELX-800型酶標(biāo)儀（美國BIO-TEK）、實時熒光定量基因擴(kuò)增儀FTC-2000型（上海楓嶺生物技術(shù)有限公司）。

1.2.2 試劑 抗HCV檢測試劑盒[英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司]、HCV RNA和HBV-DNA熒光定量檢測試劑盒（深圳市匹基生物工程股份有限公司）。

1.2.3 方法 抗HCV檢測采用ELISA法，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，S/CO≥1.0判為陽性。HCV RNA和HBV DNA檢測采用實時熒光定量PCR檢測法，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。病毒載量≥1.0×103copies/mL判為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同HCV感染疾病患者抗HCV和HCV RNA的陽性率

179例HCV感染者抗HCV的總陽性率為97.8%，顯著高于HCV RNA的陽性率（69.8%）（P＜0.01）。肝硬化組和肝癌組HCV RNA的陽性率分別為82.2%和84.8%，高于慢性丙型肝炎組的陽性率（64.4%）（P＜0.05）。肝硬化組和肝癌組HCV RNA的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.95，P＞0.05）。見表1。

表1 不同HCV感染疾病患者抗-HCV和HCV RNA的陽性率[n（%）]

2.2 不同HCV感染類型患者相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果

以60例單純HBV感染者作為對照組。HCV與HBV重疊感染組HCV RNA的陽性率為48.4%，顯著低于單純HCV感染組的 HCV RNA陽性率（71.6%）（P＜0.05）。HCV與HBV重疊感染組的HBV DNA陽性率為35.3%，也顯著低于單純HBV感染組的陽性率（76.7%）（P＜0.01）。見表2。

表2 不同HCV感染類型相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果[n（%）]

2.3 HCV RNA與ALT的關(guān)系

125例HCV RNA陽性病例中，ALT升高者76例，異常率為60.8%；而54例HCV RNA陰性病例中，ALT升高者19例，異常率為35.2%。HCV RNA陽性組ALT異常率高于HCV RNA 陰性組（χ2=9.934，P ＜ 0.05）。

3 討論

HCV RNA是HCV感染的確診標(biāo)志，也是反映丙型肝炎病毒復(fù)制情況的直接可靠指標(biāo)，即使在“窗口期”也可以檢測出HCV RNA[3]。此外，HCV RNA定量還可用于指導(dǎo)臨床用藥，為療效觀察及預(yù)后判斷提供客觀指標(biāo)。

本研究結(jié)果表明，179例HCV感染者抗HCV和HCV RNA的總陽性率分別為97.8%和69.8%。值得注意的是，在4例抗HCV陰性的患者中，有2例HCV RNA陽性，結(jié)合臨床病史和肝功能指標(biāo)分析其原因很可能是由于患者處于感染“窗口期”，抗HCV尚未出現(xiàn)或其血清含量低于試劑盒檢測下限。另有2例患者血清抗HCV和HCV RNA均為陰性，這提示臨床上存在極少數(shù)隱匿性HCV感染者，與文獻(xiàn)[4-6]報道一致。此外，血清肝硬化組和肝癌組HCV RNA的陽性率分別為82.2%和84.8%，顯著高于慢性丙型肝炎組的陽性率（64.4%）（P＜0.05），提示HCV RNA陽性率隨著病情的嚴(yán)重程度的增加而有增高趨勢。

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒二者合并感染較為常見，感染率達(dá)0.57%[7]，但臨床治療較單一病毒感染更困難，應(yīng)該引起臨床重視[8]。在本研究中179例HCV感染患者中有31例合并感染HBV，而兩者合并感染患者肝臟病例損傷往往比較嚴(yán)重，預(yù)后較差，可導(dǎo)致重型肝炎。本實驗結(jié)果表明，HCV和HBV合并感染者血清HCV RNA和HBV DNA的陽性率均顯著低于單純HCV或HBV感染患者，可能的解釋為HBV和HCV在同一宿主體內(nèi)存在相互干擾和抑制作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，HCV RNA陽性率和ALT異常率呈正相關(guān)，主要是由于HCV可造成肝細(xì)胞損傷而引起血清中ALT升高。

因此，對HCV感染相關(guān)的不同疾病患者聯(lián)合檢測抗HCV、HCV RNA和ALT，對于HCV和HBV重疊感染者同時檢測HBV DNA，結(jié)合其他肝功能指標(biāo)和臨床癥狀綜合分析，有助于疾病的明確診斷、病情觀察及預(yù)后判斷。

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