張鴻婷 王先濱 季旭明 王 斌 耿自上

1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院心內(nèi)一病房，黑龍江哈爾濱 150001；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江哈爾濱 150001；3.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南 250355；4.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱 150001

慢性心力衰竭（CHF）是多種心臟疾病的終末階段，隨著人口老齡化，慢性心衰發(fā)病率逐年增高[1]。近年來(lái)，中醫(yī)學(xué)在CHF的防治上作了大量的工作，中醫(yī)治療CHF既重視糾正患者血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)、改善心功能，又強(qiáng)調(diào)其對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌的生物學(xué)作用，而中藥制劑的多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的特點(diǎn)又是其優(yōu)勢(shì)所在。燧心膠囊是治療CHF的中藥制劑，臨床觀察顯示其對(duì)患者中醫(yī)證候、心功能分級(jí)有顯著改善，且能提高左室射血分?jǐn)?shù)與心臟指數(shù)[2]。為揭示其作用機(jī)制，本研究以腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)致CHF大鼠為研究對(duì)象，觀察燧心膠囊對(duì)CHF大鼠血流動(dòng)力學(xué)的作用，并從神經(jīng)內(nèi)分泌的角度分析其可能的作用機(jī)制。

1 試藥與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康、SPF級(jí)SD大鼠，共42只，體質(zhì)量240～260 g，雄性。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（黑）2008004。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF環(huán)境條件飼養(yǎng)。

1.2 主要試劑與儀器

1.2.1 燧心膠囊 由制附子、紅參、丹參、茯苓、澤瀉組成，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬二院制劑室制備。

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒由美國(guó)ADL公司提供。

1.2.3 MedLab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng) 型號(hào)：4CS，由南京美易科技公司提供。

1.2.4 酶標(biāo)儀 型號(hào)Stat-Fax-2100，由廣州倍肯公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作及分組

1.3.1 CHF大鼠模型復(fù)制 參照文獻(xiàn)[3]方法實(shí)施腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)。

1.3.2 分組及給藥方法 將上述大鼠隨機(jī)分為6組，造模成功后每日1次灌胃治療，連續(xù)12周。①假手術(shù)組實(shí)施開(kāi)腹手術(shù)但是腹主動(dòng)脈處不結(jié)扎縮窄，造模成功后以等量蒸餾水灌胃，n=8；②模型對(duì)照組以等量蒸餾水灌胃，n=7；③地高辛組給予地高辛（上海醫(yī)藥集團(tuán)有限公司信誼制藥總廠生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字 H31020678，規(guī)格：0.25 mg）1.0 mL/100 g（0.04 mg/kg）體重灌胃，n=6；④卡托普利組給予卡托普利（中美上海施貴寶制藥有限分司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H31022986，規(guī)格：12.5 毫克×20 片）1.0 mL/100 g（6.25 mg/kg）體重灌胃，n=7；⑤中藥低劑量組給予燧心膠囊1.0 mL/100 g（20 g/kg）體重灌胃，n=7；⑥中藥高劑量組給予燧心膠囊1.0 mL/100 g（40 g/kg）體重灌胃，n=7。

1.4 標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)

1.4.1 血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè) 將大鼠以10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉，固定在自制手術(shù)臺(tái)上，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，由頸總動(dòng)脈插管，連接Medlab 6系統(tǒng)，記錄心率（HR）、左室收縮壓（LVSP）、左室舒張末壓（LVEDP）、左室壓力最大變化速率（±dp/dtmax）。

1.4.2 BNP檢測(cè) 以脊椎脫臼法處死動(dòng)物，稱重并記錄，碘伏消毒胸部，迅速打開(kāi)胸腔，直視下大鼠心臟采血1.5～2.0 mL，室溫下靜置2 h后，3 000 r/min離心10 min，留取血清，嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說(shuō)明操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用秩和檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況統(tǒng)計(jì)

大鼠行腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)后，常規(guī)喂養(yǎng)5周，開(kāi)始出現(xiàn)明顯心力衰竭癥狀，如呼吸頻率增加、幅度增加、活動(dòng)明顯減少、食減少、毛發(fā)干枯無(wú)光澤、爪背發(fā)紺、尿少水腫等，與假手術(shù)組經(jīng)秩和檢驗(yàn)比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U=4.5，P＜0.01）。 見(jiàn)表1。

表1 術(shù)后第5周大鼠心力衰竭癥狀比較（只）

2.2 燧心膠囊對(duì)CHF大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響

2.2.1 各組大鼠左室收縮功能的比較 圖1表明，與假手術(shù)組比較，模型對(duì)照組大鼠LVSP顯著降低、+dp/dtmax明顯減慢，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與模型對(duì)照組比較，地高辛組、卡托普利組、中藥低劑量組、中藥高劑量組大鼠LVSP和+dp/dtmax均有不同程度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。中藥高劑量、卡托普利與地高辛三組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。中藥低、高劑量?jī)山M比較，高劑量組升高+dp/dtmax明顯，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)圖1。

圖1 各組大鼠左室收縮功能比較

2.2.2 各組大鼠左室舒張功能的比較 圖2表明，與假手術(shù)組比較，模型對(duì)照組大鼠LVEDP顯著升高，而-dp/dtmax則明顯減慢，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型對(duì)照組比較，地高辛組和中藥低劑量組LVEDP均有下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而-dp/dtmax變化不明顯；卡托普利組和中藥高劑量組LVEDP下降極顯著（P＜0.01），-dp/dtmax升高顯著（P ＜ 0.05）。 見(jiàn)圖2。

圖2 各組大鼠左室舒張功能比較

2.3 燧心膠囊對(duì)CHF大鼠腦鈉肽的影響

圖3 顯示，與假手術(shù)組比較，模型對(duì)照組大鼠血清內(nèi)BNP濃度明顯增高，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與模型對(duì)照組比較，地高辛組、卡托普利組、中藥低劑量組、中藥高劑量組大鼠血清BNP濃度均降低，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與中藥低劑量組比較，卡托普利組與中藥高劑量組BNP下降更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)圖3。

圖3 各組大鼠血清腦鈉肽濃度的比較

3 討論

根據(jù)臨床特點(diǎn)，CHF當(dāng)屬中醫(yī) “心悸”、“喘證”、“水腫”、“胸痹”等病證范疇，由于心力衰竭患者多為年老體弱之人，病情復(fù)雜，虛實(shí)夾雜，纏綿難愈，其病機(jī)可歸納為：心腎陽(yáng)虛為本，瘀血、痰濁、水停為標(biāo)。燧心膠囊組方即針對(duì)此病機(jī)而設(shè)，方中以制附子為君，補(bǔ)火助陽(yáng)；臣以紅參，益氣復(fù)脈，兩者配伍，補(bǔ)益心衰之心腎陽(yáng)虛；丹參活血養(yǎng)血，化瘀通絡(luò)，祛除血瘀之病理產(chǎn)物，且調(diào)暢氣機(jī)，助痰濁、水飲進(jìn)一步消退；茯苓、澤瀉為佐使，利水消腫，使小便得利，腫消水散。諸藥配伍，以扶正為主，消補(bǔ)兼施，共達(dá)溫陽(yáng)益氣、活血利水之功效。

本實(shí)驗(yàn)表明燧心膠囊對(duì)心室收縮和舒張功能均有良性調(diào)節(jié)作用，呈劑量依賴關(guān)系。它通過(guò)降低LVEDP、升高-dp/dtmax，使得肺毛細(xì)血管楔壓下降，肺動(dòng)脈壓力下降，肺循環(huán)阻力降低，肺水腫緩解，從而減輕心臟后負(fù)荷；同時(shí)加強(qiáng)LVSP、提高+dp/dtmax，而使心室排血量增加以減輕心臟前負(fù)荷。心臟負(fù)荷減輕則心功能得以糾正，呼吸困難、活動(dòng)耐量下降、尿少水腫等癥狀則逐漸消除。

BNP是心肌組織中具有擴(kuò)血管功能的血管活性物質(zhì)之一，具有擴(kuò)張血管、利尿排鈉、拮抗神經(jīng)內(nèi)分泌、抗心室重塑等作用。心室壁壓力增大、心室容量增加是BNP釋放的主要刺激因素。本實(shí)驗(yàn)心力衰竭模型對(duì)照組大鼠血中BNP濃度顯著增高，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[4-8]。燧心膠囊治療后，各組心力衰竭大鼠BNP濃度顯著下降。說(shuō)明由于心力衰竭大鼠的血流動(dòng)力學(xué)得到糾正，左心室收縮壓、左心室舒張末期壓均有不同程度的改善，心室容積及室壁壓力降低，刺激BNP分泌減少。

由此可推斷，燧心膠囊通過(guò)改善CHF大鼠血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)，而使BNP分泌減少，BNP濃度的下降代表了心功能得到糾正，心臟由失代償狀態(tài)向代償狀態(tài)轉(zhuǎn)化，其療效呈劑量依賴關(guān)系，這為進(jìn)一步研究燧心膠囊干預(yù)心室重塑的機(jī)制奠定了理論基礎(chǔ)。

[1]顧東風(fēng)，黃廣勇，江河，等.中國(guó)心力衰竭流行病學(xué)調(diào)查及患病率——中國(guó)心血管健康多中心合作研究[R].第七次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議，北京，2002：7.

[2]王興，郭丹丹，耿自上，等.燧心膠囊對(duì)慢性心力衰竭患者血清腦鈉肽與心功能的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2010，（2）：75-77.

[3]胡詠梅，李法琦，羅羽慧，等.腹主動(dòng)脈縮窄大鼠模型制作及臨床意義[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，29（3）：322-324.

[4]Young JB.Vasodilation in the Management of Acute Congestive Heart Failure（VMAC） [J].JAMA，2002，287：1531-1540.

[5]Lindsay M.Heart Failure Society of America（HFSA）[R].Annual Scientific Meeting，2004.

[6]Yancy CW.Safety and feasibility of using serial infusions of nesiritide for heart failure in an outpatient setting（from the FUSION Ⅰ trial）[J].American Journal of Cardiology，2004，94（5）：595-601.

[7]王惜誦，王龍彪.不同劑量氟伐他汀對(duì)慢性心力衰竭大鼠心肌組織血管緊張素Ⅱ和腦利鈉肽水平影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2011，23（1）：1-3，109.

[8]夏裕，王評(píng)，鄭壁偉.慢性阻塞性肺病急性加重期合并慢性心力衰竭血漿尾加壓素Ⅱ和腎上腺髓質(zhì)素水平變化及臨床意義[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2011，23（6）：10-12.