李玉紅，劉 虹，王 茜，李俊青，曾 森，張德芹，胡利民

（天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，天津市中藥藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，方劑學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300193）

糖脂清過(guò)柱前后對(duì)KK-Ay小鼠血糖血脂藥效學(xué)影響對(duì)比實(shí)驗(yàn)*

李玉紅，劉 虹，王 茜，李俊青，曾 森，張德芹，胡利民

（天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，天津市中藥藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，方劑學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300193）

[目的]對(duì)比治療2型糖尿病新藥糖脂清經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂處理與未經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂（過(guò)柱前后）在降血糖、調(diào)節(jié)血脂藥效學(xué)方面有無(wú)差異。[方法]應(yīng)用糖尿病KK-Ay小鼠，大孔樹(shù)脂處理前、后糖脂清8、4、2g/kg灌胃給藥5周，以拜唐蘋為對(duì)照藥，評(píng)價(jià)并比較過(guò)柱前、后糖脂清對(duì)小鼠血糖、血脂等的影響。[結(jié)果]糖脂清過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方均有降低小鼠飲水量、尿量趨勢(shì)；能顯著降低小鼠非禁食及灌胃蔗糖后30、60、120min血糖濃度，降低血清甘油三酯（TG）、胰島素含量，改善胰島素抵抗。[結(jié)論]糖脂清中山楂葉、丹參、赤芍經(jīng)大孔樹(shù)脂處理后沒(méi)有降低整體藥效。

山楂葉；丹參；赤芍；大孔樹(shù)脂；藥效學(xué)

糖脂清（TZQ）來(lái)源于臨床經(jīng)驗(yàn)方，由桑葉、荷葉、山楂葉、丹參、赤芍5味中藥組成，是治療2型糖尿病糖脂代謝紊亂的有效方劑，已獲得新藥臨床研究批件（2010L00278）和發(fā)明專利（200610015629.9）。在糖脂清的制備過(guò)程中，山楂葉、丹參、赤芍三味藥均采用大孔樹(shù)脂精制純化工藝，再與桑葉、荷葉干膏混合。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用自發(fā)性胰島素抵抗糖尿病KKAy小鼠進(jìn)行糖脂清大孔樹(shù)脂過(guò)柱前后的藥效學(xué)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，以期獲得糖脂清過(guò)柱前后的藥效對(duì)比研究資料。

1 材料

1.1 藥物 桑葉、荷葉干膏加經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂處理的山楂葉、丹參、赤芍提取物，簡(jiǎn)稱“過(guò)柱復(fù)方”，即糖脂清。桑葉、荷葉干膏加未經(jīng)大孔樹(shù)脂處理的三味藥干膏，簡(jiǎn)稱“未過(guò)柱復(fù)方”。過(guò)柱復(fù)方（原料藥），棕色干膏粉，出膏率為11.11g干膏粉/100g生藥，批號(hào)：20090724，實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配成0.4、0.2、0.1g/mL的藥液。未過(guò)柱復(fù)方（原料藥），棕色干膏粉，出膏率為23.36g干膏粉/100g生藥，批號(hào)：20090723，實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配成0.4、0.2、0.1g/mL的藥液，以上藥物由天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院藥學(xué)部提供。陽(yáng)性對(duì)照藥物拜唐蘋片，北京拜耳醫(yī)藥保健有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：116084。實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配成4mg/mL的藥液。

1.2 試劑 穩(wěn)豪型血糖試紙，批號(hào)：2903415，強(qiáng)生（上海）醫(yī)療器材有限公司。蔗糖，批號(hào)：20090327，天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠。葡萄糖（GLU）試劑盒，批號(hào)：091891.200907。總膽固醇（TC）試劑盒，批號(hào): 090821.200905。甘油三酯（TG）試劑盒，批號(hào)：093231.200907，中生北控生物科技股份有限公司。小鼠胰島素試劑盒，批號(hào)：17825，瑞典Mercodia公司。游離脂肪酸（NEFA）試劑盒，批號(hào)：294-63601，日本W(wǎng)ako公司。

1.3 動(dòng)物 KK-Ay小鼠96只，4～6周齡，雌雄各半，SPF級(jí)；C57BL/6J小鼠12只，4～6周齡，雌雄各半，SPF級(jí)，均由北京中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供，合格證編號(hào)：SCXK（京）2009-0004。飼養(yǎng)于天士力集團(tuán)有限公司藥理所，屏障環(huán)境，單籠飼養(yǎng)，溫度（22±2）℃，濕度50%～60%，12h交替照明，光照時(shí)間8∶30—20∶30。

1.4 儀器 半自動(dòng)生化分析儀（95版200型，荷蘭威圖）；血糖儀（OneTouch Ultra，TKB8235RT，強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司）；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（TGLL-18G，太倉(cāng)市醫(yī)療器械廠）；多功能微孔板分析儀（Flexstation3）；旋渦混合器（GL-88B，江蘇海門麒麟醫(yī)用儀器廠）；電熱恒溫水浴箱（GB11241-89，北京醫(yī)療設(shè)備廠）；精密電子天平（JA1003，上海天平儀器廠）；電子天平（DT1000，常熟市衡器廠）；小鼠代謝籠（蘇州市馮氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)備有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組給藥 小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2周，剪尾取血檢測(cè)小鼠非禁食血糖，采用完全隨機(jī)法將96只KK-Ay小鼠隨機(jī)分為8組，分別為：模型組、拜唐蘋組（80mg/kg）、過(guò)柱復(fù)方3個(gè)劑量組（8g/kg組、4g/kg組、2g/kg組）、未過(guò)柱復(fù)方3個(gè)劑量組（8g/kg組、4g/kg組、2g/kg組），每組12只，雌雄各半，C57BL/6J小鼠為空白對(duì)照組，給藥組灌胃相應(yīng)劑量藥物，空白組、模型組灌胃等容積蒸餾水，灌胃體積為0.02mL/g，各組每日灌胃1次，連續(xù)5周。

2.2 標(biāo)本制作 灌胃給藥5周，禁食（不禁水）12h，摘眼球取血，3500r/min，離心15min，分離血清，檢測(cè)空腹血糖（FBG）、TC、TG、空腹胰島素（INS）、NEFA。

2.3 檢測(cè)方法 動(dòng)物生長(zhǎng)及攝食情況的觀察：實(shí)驗(yàn)前及每周記錄動(dòng)物24h進(jìn)食量、24h飲水量、24h尿量1次。尿量的量?。簩⑿∈蠓湃氪x籠，禁食不禁水，量取24h小鼠尿量。分組及每周血糖檢測(cè)：小鼠剪尾取血，應(yīng)用穩(wěn)豪型血糖儀檢測(cè)小鼠非禁食狀態(tài)血糖。

口服蔗糖耐量實(shí)驗(yàn)：灌胃給藥4周，小鼠禁食12h，剪尾取血檢測(cè)小鼠空腹血糖，各組灌胃相應(yīng)藥物及蒸餾水，30min后灌胃20%蔗糖4g/kg，剪尾取血檢測(cè)灌胃蔗糖后30、60、120、180min小鼠血糖，并計(jì)算血糖曲線下面積。血糖曲線下面積（AUC）：AUC＝（Bg0＋Bg30）×0.5÷2＋（Bg30＋Bg60）×0.5÷2＋（Bg60＋Bg120）×1÷2＋（Bg120＋Bg180）×1÷2。

空腹血糖、血脂檢測(cè)：應(yīng)用半自動(dòng)生化分析儀，采用終點(diǎn)法檢測(cè)血清GLU、TC、TG。胰島素含量檢測(cè)：應(yīng)用多功能微孔板分析儀采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)胰島素含量。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，正態(tài)分布計(jì)量資料組間比較采用單因素方差分析，偏態(tài)分布計(jì)量資料組間比較采用秩和檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 進(jìn)食量、飲水量、尿量 用藥治療前及治療期間，模型組與空白組比較，進(jìn)食量、飲水量、尿量顯著升高。

過(guò)柱復(fù)方組、未過(guò)柱復(fù)方組與模型組比較，進(jìn)食量無(wú)顯著變化。自給藥第2周起，與模型組飲水量相比較，過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方4、8g/kg組均有降低小鼠飲水量趨勢(shì)。自給藥第2周起，與模型組尿量相比較，過(guò)柱復(fù)方2、4、8g/kg組均有降低小鼠尿量趨勢(shì)。給藥第4周，未過(guò)柱復(fù)方2、4、8g/kg組均顯示降低小鼠尿量趨勢(shì)。過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，進(jìn)食量、飲水量、尿量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表1—3。

3.2 血糖、胰島素 用藥治療前，模型組與空白組比較，非禁食血糖濃度顯著升高（P＜0.01），模型組與各給藥組血糖濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

給藥治療第3周，模型組小鼠血糖濃度顯著高于空白組（P＜0.01）；過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方2、4、8g/kg均能顯著降低KK-Ay小鼠血糖濃度，與模型組比較（P＜0.01）。過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，非禁食血糖濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表4。

模型組小鼠血清胰島素含量顯著高于空白組（P＜0.01）。過(guò)柱復(fù)方8g/kg組、未過(guò)柱復(fù)方4g/kg組與模型組比較血清胰島素含量顯著降低（P＜0.05），過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，血清胰島素含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表6。

表1 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠進(jìn)食量的影響（±s）Tab.1 Effect of TZQ on food-intake of KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）g/只

表1 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠進(jìn)食量的影響（±s）Tab.1 Effect of TZQ on food-intake of KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）g/只

注：與空白組比較，**P<0.01。

給藥前 第1周 第2周 第3周 第4周空白組 - 12 3.29±0.46 3.07±0.59 4.28±0.47 3.10±0.40 4.23±0.73模型組 - 12 4.47±0.60** 4.97±0.85** 5.83±1.04** 5.01±1.03** 5.43±0.97**拜唐蘋組 0.08 12 4.45±0.84** 5.03±1.17 5.78±1.01 4.40±1.08 5.14±0.64過(guò)柱復(fù)方組 8 12 4.46±0.97** 4.88±1.19 5.81±1.24 4.97±1.06 5.22±0.94412 4.64±0.72** 5.23±0.85 5.74±0.67 4.88±1.07 5.09±0.86212 4.68±1.01** 5.27±0.94 5.90±0.83 4.93±1.07 5.83±0.77未過(guò)柱復(fù)方組 8 12 4.54±0.86** 4.86±0.60 5.81±0.67 4.83±0.49 5.40±0.65412 4.38±0.69** 4.84±0.79 5.75±0.86 5.18±0.82 5.17±0.63212 4.38±1.10** 4.73±0.93 5.76±0.94 5.32±0.83 5.66±1.21組別 劑量（g/kg） n

表2 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠飲水量的影響（±s）Tab.2 Effect of TZQ on water-intake in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mL/只

表2 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠飲水量的影響（±s）Tab.2 Effect of TZQ on water-intake in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mL/只

注：與空白組比較，**P<0.01。

給藥前 第1周 第2周 第3周 第4周空白組 - 12 7.00±1.60 5.50±1.17 7.00±1.13 5.92±1.62 8.58±2.19模型組 - 12 13.83±5.20** 12.75±4.86** 16.58±6.46** 12.67±4.77** 16.58±4.87**拜唐蘋組 0.08 12 14.50±6.45** 14.17±6.66 16.00±7.51 10.00±4.22 13.17±4.90過(guò)柱復(fù)方組 8 12 13.33±5.55** 12.42±4.74 14.50±6.37 12.17±5.81 14.00±4.33412 13.92±6.17** 14.67±4.91 15.83±4.00 11.92±3.32 13.08±4.34212 14.58±7.67** 13.58±5.14 15.67±5.10 11.58±3.78 16.42±4.29未過(guò)柱復(fù)方組 8 12 13.42±5.02** 12.17±2.44 15.25±5.34 11.83±3.61 13.67±3.31412 13.58±7.19** 11.58±3.60 15.50±5.78 12.08±3.03 14.17±2.48212 13.33±6.40** 12.58±5.57 14.67±5.87 12.25±4.19 16.42±6.67組別 劑量（g/kg） n

表3 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠尿量的影響（±s）Tab.3 Effect of TZQ on urine volume in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mL/只

表3 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠尿量的影響（±s）Tab.3 Effect of TZQ on urine volume in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mL/只

注：與空白組比較，*P<0.05，**P<0.01。

給藥前 第1周 第2周 第3周 第4周空白組 - 12 1.53±0.81 2.07±0.89 1.97±1.12 1.40±0.88 1.57±0.81模型組 - 12 3.00±2.12* 2.98±1.30 3.28±1.29 3.88±1.70* 3.54±1.53**拜唐蘋組 0.08 12 2.92±1.43* 2.96±1.52 2.70±1.18 3.33±1.71 3.23±1.42過(guò)柱復(fù)方組 8 12 3.03±2.29* 2.91±1.68 3.00±2.18 3.38±3.10 3.19±2.32412 2.98±1.55* 3.30±2.11 2.86±2.18 2.82±2.10 3.05±1.92212 2.95±1.40* 2.63±0.65 2.17±0.99 2.00±1.34 3.05±1.22未過(guò)柱復(fù)方組 8 12 3.17±1.78* 3.07±1.82 3.59±2.42 3.52±1.56 3.31±1.56412 3.00±1.72* 2.96±1.18 3.41±1.61 3.92±2.56 3.28±1.51212 3.02±1.43* 2.73±1.06 3.40±2.52 3.73±4.70 3.34±2.54組別 劑量（g/kg） n

表4 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠血糖的影響（±s）Tab.4 Effect of TZQ on blood glucose in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mmol/L

表4 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠血糖的影響（±s）Tab.4 Effect of TZQ on blood glucose in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）mmol/L

注：與空白組比較，**P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

組別 劑量（g/kg）n 給藥前 第1周 第2周 第3周空白組 - 12 9.22±1.17 8.56±1.26 9.11±1.29 10.27±2.26模型組 - 1223.04±5.85**23.92±7.55**23.83±6.13**27.29±5.16**拜唐蘋組 0.08 1223.01±5.84**24.42±6.87 18.14±4.84▲ 16.02±4.06▲▲過(guò)柱復(fù)方組 8 1222.93±5.66**24.88±7.05 25.52±5.81 19.98±7.00▲▲4 1222.93±5.62**25.55±6.40 24.15±6.59 19.99±6.47▲▲2 1223.07±5.78**24.57±5.49 22.47±3.25 20.74±6.50▲▲未過(guò)柱 8 1223.21±5.76** 24.84±5.03 23.38±5.09 19.21±4.97▲▲復(fù)方組 4 1223.00±5.66** 23.75±4.06 22.38±6.54 19.13±3.89▲▲2 1222.83±5.70** 23.78±5.56 20.93±7.13 19.87±6.91▲▲

3.3 蔗糖耐量 灌胃4g/kg蔗糖后，在30、60、120、180min時(shí)間點(diǎn)模型組血糖顯著高于空白組（P＜0.01或P＜0.05）。

在30、60、120min時(shí)間點(diǎn)，過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方4、8g/kg能顯著降低小鼠血糖濃度，與模型組比較（P＜0.01或P＜0.05）。過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，血糖值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表5。

過(guò)柱復(fù)方8g/kg組，未過(guò)柱復(fù)方4、8g/kg組，拜唐蘋組小鼠血糖曲線下面積與模型組比較顯著減少（P＜0.01），過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，血糖曲線下面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表6。

3.4 血清TC、TG、NEFA 模型組小鼠血清TC、TG明顯高于空白組（P＜0.01）。過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方2、4、8g/kg均可以降低血清TG，有降低血清TC趨勢(shì)。過(guò)柱復(fù)方2、4、8g生藥/kg組，未過(guò)柱復(fù)方4、8g/kg組小鼠血清TG與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），過(guò)柱復(fù)方組與等生藥量未過(guò)柱復(fù)方組之間，血清TC、TG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表7。

表5 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠蔗糖耐量的影響（±s）Tab.5 Effect of TZQ on sucrose tolerance in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

表5 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠蔗糖耐量的影響（±s）Tab.5 Effect of TZQ on sucrose tolerance in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

注：與空白組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

血糖（mmol/L）0min 30min 60min 120min 180min空白組 - 12 6.67±1.28 9.72±1.39 7.18±1.25 5.98±0.99 6.31±0.80模型組 - 12 7.22±1.42 18.25±4.61** 12.26±3.34** 10.03±2.40** 7.42±1.70*拜唐蘋組 0.08 12 7.08±0.71 9.87±1.12▲▲ 7.96±1.12▲▲ 7.65±1.03▲▲ 6.82±0.83過(guò)柱復(fù)方組 8 12 6.93±1.19 13.30±3.56▲▲ 10.06±2.06▲ 8.73±1.38▲ 7.28±1.00412 6.55±0.76 15.08±3.08▲ 10.98±2.35 9.29±1.25 6.85±0.96212 6.35±1.15 16.13±3.66 11.82±2.22 9.01±1.65 6.72±1.16未過(guò)柱復(fù)方組 8 12 6.52±0.55 13.18±3.51▲▲ 9.92±1.66▲ 8.85±1.67 6.62±1.28412 6.36±1.57 13.41±4.48▲▲ 10.62±3.00 8.61±1.01▲ 6.76±1.63212 6.57±1.16 16.28±4.72 12.23±2.61 9.05±1.31 6.71±1.26組別 劑量（g/kg） n

表6 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠蔗糖耐量血糖曲線下面積的影響（±s）Tab.6 Effect of TZQ on under curve area of sucrose tolerance in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

表6 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠蔗糖耐量血糖曲線下面積的影響（±s）Tab.6 Effect of TZQ on under curve area of sucrose tolerance in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

注：與空白組比較，**P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

胰島素（μg/L）空白組 - 12 21.04±2.30 0.40±0.20模型組 - 12 33.94±7.48** 4.06±2.19**拜唐蘋組 0.08 12 23.73±2.35▲▲ 3.90±1.54過(guò)柱復(fù)方組 8 12 28.29±4.62▲▲ 3.00±1.46▲4 12 30.13±4.39 3.39±0.642 12 30.88±4.58 3.26±0.76未過(guò)柱復(fù)方組 8 12 27.82±4.76▲▲ 3.24±0.904 12 28.24±5.69▲▲ 3.01±1.31▲2 12 31.35±4.61 3.92±1.41組別 劑量（g/kg） n 曲線下面積[mmol/（L·h）]

表7 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠血清TC、TG、NEFA的影響（±s）Tab.7 Effect of TZQ on serum TC,TG,NEFA in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

表7 過(guò)柱復(fù)方與未過(guò)柱復(fù)方對(duì)KK-Ay小鼠血清TC、TG、NEFA的影響（±s）Tab.7 Effect of TZQ on serum TC,TG,NEFA in KK-Aymice before and after passing macroporous resin（±s）

注：與空白組比較，**P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

NEFA（mmol/L）空白組 - 122.36±0.71 1.02±0.29 1.75±0.36模型組 - 125.08±1.13** 3.74±1.49** 2.54±0.30**拜唐蘋組 0.08 124.56±0.83 2.82±0.48▲ 2.24±0.14▲▲過(guò)柱復(fù)方組 8 124.46±1.38 2.76±0.99▲▲ 2.01±0.16▲▲4 124.56±0.86 2.76±0.74▲▲ 1.93±0.11▲▲2 124.39±0.95 2.76±0.65▲▲ 2.44±0.20未過(guò)柱 8 124.59±0.94 2.25±0.56▲▲ 2.26±0.11▲▲復(fù)方組 4 124.66±0.58 2.55±0.87▲▲ 2.26±0.33▲▲2 124.72±0.78 3.05±1.02 2.61±0.21組別 劑量（g/kg） n TC（mmol/L）TG（mmol/L）

4 討論

糖脂清（三葉片）為天津中醫(yī)藥大學(xué)研制申報(bào)的中藥第6.1類復(fù)方新藥，以桑葉、荷葉、山楂葉、丹參和赤芍精制而成,具有升清降濁、化瘀消痞之效，適用于痰瘀內(nèi)阻所致的消渴?。?型糖尿病）。方中桑葉為君藥，荷葉為臣藥，其一，可輔助君藥增強(qiáng)助脾利濕，化濁降脂，升清降濁之功，其二，氣香辛散，有祛瘀行滯降濁之功。山楂葉為方中臣藥，一則輔助君藥增強(qiáng)化瘀行滯之功，二則輔助君藥增強(qiáng)化濁降脂。丹參佐助君藥活血祛瘀而使血脈通暢，具有活血化瘀，化濁降脂功效，為方中佐藥。赤芍苦寒性降，走血分，善行血滯，有活血化瘀之功，佐助君藥增強(qiáng)化瘀降濁之力；性降氣，通利氣機(jī)，佐助君藥升清降濁，為方中佐藥。

桑葉苦寒泄熱，甘寒益陰，具有良好的止渴之效，《食療本草》載其：“桑葉炙煎飲之，止渴，一如茶法?！薄侗静菥V目》謂其：“桑葉乃手、足陽(yáng)明之藥，治勞熱咳嗽，明目長(zhǎng)發(fā)，止消渴?！焙扇~具有升清降濁，化瘀止渴功效，《滇南本草》載其：“可升可降，止眩暈，消痰，泄氣?！薄侗静菟幮源笕吩唬骸捌蒲箍?，健脾益胃。”《中國(guó)藥典》2010年版載荷葉具有“活血化瘀，理氣通脈”之功。丹參具有活血化瘀，化濁降脂功效，《神農(nóng)本草經(jīng)》載其：“破癥除瘕，止煩滿?！薄度杖A子本草》謂其：“養(yǎng)神定志，通利血脈。破宿血，補(bǔ)新生血?！背嗌稚菩醒獪?，有活血化瘀之功，《別錄》曰：“通順血脈，緩中，散惡血，逐賊血，去水氣?！?/p>

現(xiàn)代藥理研究表明，桑葉具有降血糖、降血脂、清除氧自由基等作用[1]。荷葉內(nèi)的生物堿和黃酮具有調(diào)血脂活性，其降脂減肥作用受到人們的重視[2-3]。山楂葉具有降血脂、降血糖的作用，山楂葉中總黃酮是其降血脂主要活性成分[4-5]。丹參在心腦血管系統(tǒng)具有廣泛的藥理作用，尤其是抗氧化、降血脂作用突出。芍藥苷具有很好的降血糖、調(diào)節(jié)血脂作用。

在糖脂清提取工藝路線設(shè)計(jì)時(shí)，為了盡量保留桑葉中的桑葉總堿、桑葉總黃酮和桑葉多糖，荷葉中的荷葉總堿和荷葉總黃酮，山楂葉中的山楂葉總黃酮，赤芍中的赤芍總苷，選擇了桑葉、荷葉采用合并后醇提加水提的方法，山楂葉采用醇提后大孔樹(shù)脂處理的方法[6]，赤芍采用水提后大孔樹(shù)脂處理的方法，并進(jìn)行了工藝考察[7]，以水溶性的酚酸類成分為主選擇了丹參的工藝，最大程度富集糖脂清復(fù)方中降糖、調(diào)脂的有效成分。采用HPLC-DAD-MS方法，并輔以TLC方法，對(duì)山楂葉、丹參及赤芍提取物經(jīng)大孔樹(shù)脂處理前后的化學(xué)成分定性對(duì)比分析表明，三味藥過(guò)柱前后化學(xué)成分基本相似[8]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，相等生藥量糖脂清與未過(guò)柱復(fù)方在降血糖、調(diào)節(jié)血脂藥效學(xué)方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明糖脂清制備工藝最大程度保留了降糖、調(diào)脂活性成分，山楂葉、丹參、赤芍經(jīng)大孔樹(shù)脂處理后沒(méi)有降低整體藥效。

[1]楊 雨.桑葉不同組分降血糖作用研究[J].食品科學(xué)，2007，28（8）：454－456．

[2]涂長(zhǎng)春，李曉宇，楊軍平，等.荷葉生物堿對(duì)肥胖高脂血癥大鼠減肥作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，13（3）：120－121．

[3]趙 駿，高 嵐，齊召朋.荷葉總生物堿及其鹽的提取和降脂作用的比較[J].天津中醫(yī)藥，2005，22（2）：161－162．

[4]劉 江，童 智，張?jiān)俪?，等．山楂葉總黃酮防治大鼠胰島素抵抗及脂肪肝的實(shí)驗(yàn)研究[J].華東師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，54（6）：127－132．

[5]葉希韻，張 隆，江 菊．山楂葉總黃酮對(duì)糖尿病小鼠糖脂代謝的影響[J].中草藥，2005，36（11）：1683－1686．

[6]郝 彧，劉 虹，吳 帥，等.大孔樹(shù)脂純化山楂葉提取物的工藝考察[J].天津中醫(yī)藥，2009，26（4）：335－337．

[7]劉 虹，王 萌，郝 彧，等.大孔樹(shù)脂純化赤芍提取物的工藝考察[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（3）：142－145．

[8]Wang T,Zhang P,Zhao C,et al.Prevention effect in selenite-induced cataract in vivo and antioxidative effects in vitro of Crataegus pinnatifida leaves[J].Biol Trace Elem Res,2011,142(1):106-116.

Comparative experiment of TZQ on abnormal glucose and lipid metabolism in KK-Aymice before and after passing macroporous resin

LI Yu-hong,LIU Hong,WANG Qian,LI Jun-qing,ZENG Sen,ZHANG De-qin,HU Li-min
（Tianjin Key Laboratory of Chinese Medical Pharmacology,Key Laboratory of Pharmacology of Traditional Chinese Medical Formulae, Institute of traditional Chinese medicine,Tianjin University of TCM，Tianjin 300193,China）

[Objective]To compare the effects of Tangzhiqing(TZQ),a new traditional Chinese anti-diabetic prescription containing five ingredients,on abnormal glucose and lipid metabolism before and after passing macroporous resin in KK-Aymice.[Methods]KK-Aydiabetic mice were administrated with TZQ before and after passing macroporous resin at the dose of 8,4,2g/kg for 5 weeks.Glucobay was taken as control.The effect of TZQ on blood glucose and Lipid in mice before and after passing macroporous resin was observed.[Results]Both kinds of TZQ tended to reduce fresh water intaking,urine volume of KK-Aymice.They could also significantly reduce the non-fasting glucose and glucose at 30,60,120min after sucrose was given orally.They could decrease TG,serum insulin and improve the insulin resistance.[Conclusion]TZQ,made up by Hawthorn Leaf,Danshen root,Red Paeony Root and so on,does not decrease the pharmacologyic effect after processing by macroporous resin.

Hawthorn Leaf;Danshen root;Red Paeony Root;macroporous resin;pharmacodynamics

R285.5

A

1672-1519（2012）04-0384-05

2012-03-10）

科技部國(guó)際科技合作項(xiàng)目（2009DFA31070）。

李玉紅（1976-），女，碩士，副研究員，主要從事中醫(yī)藥防治心血管、代謝性疾病的藥理研究。