張春雨，王晶瑩，郭慶勛，周連霞，賈承國

（吉林大學(xué)植物科學(xué)學(xué)院，長春 130062）

越橘（Vacciniumn）是具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的小漿果。由于其果實(shí)含有較高的花青苷[1]，具有較高的抗氧化能力和營養(yǎng)保健價(jià)值，同時(shí)這些物質(zhì)也形成了果實(shí)多種多樣的顏色，是提高果實(shí)外觀品質(zhì)的重要因素。全世界越橘屬植物約有450個(gè)種[2]，我國約有91個(gè)種，28個(gè)變種，全部為野生種[3]。越橘栽培最早始于美國，我國從1983年開始引種越橘栽培，先后從美國、波蘭等國家引入栽培品種100多個(gè)[4]。張春雨等已對引進(jìn)的高叢越橘和半高叢越橘果實(shí)的糖、酸、香氣等風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行了研究[5-7]。

本試驗(yàn)以引進(jìn)的越橘品種為材料，對果實(shí)花青苷的含量進(jìn)行分析，同時(shí)探討了果實(shí)發(fā)育過程中花青苷形成過程，以期為越橘品種的品質(zhì)評價(jià)及品種選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)于2009～2010年在吉林大學(xué)植物科學(xué)學(xué)院園藝實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。25個(gè)高叢越橘和9個(gè)半高叢越橘品種以及10個(gè)雜交后代均采自山東省威海市越橘品種園7年生樹。試驗(yàn)地立地條件一致，常規(guī)管理。2009～2010年6～7月份果實(shí)成熟期，每個(gè)品種選擇10株生長正常的結(jié)果樹，每株隨機(jī)選取20個(gè)果實(shí)，用于花青苷含量的測定。不同發(fā)育期果實(shí)花青苷含量變化選擇當(dāng)?shù)刂髟云贩N藍(lán)豐，根據(jù)果實(shí)發(fā)育階段，分為綠色期、粉色初期、50%粉色期、粉色期、50%藍(lán)色期、成熟期，共6個(gè)時(shí)期，依次在6月5日、6月8日、6月12日、6月15日、6月20日和6月25日（第一批果實(shí)大量成熟期）采集果實(shí)。所有樣品均立即空運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行花青苷測定。

1.2 花青苷含量測定

果實(shí)花青苷含量參照Pirie等及王惠聰?shù)鹊姆椒╗8-9]，并略做改動，將20個(gè)果的果實(shí)或者果肉、果皮切碎充分混合，取1.0 g鮮樣放入20 mL 1%HCl/甲醇溶液室溫浸提2 h。取2 mL浸提液，用1%HCl/甲醇溶液稀釋6倍，以1%HCl/甲醇溶液作為空白，用分光光度計(jì)測定提取液在553和600 nm處的吸光值，兩者之差即為花青苷的相對含量。差值每增加0.01定義為一個(gè)單位U。設(shè)3～5次取樣重復(fù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 越橘果實(shí)花青苷含量分析

對44個(gè)越橘品種的花青苷含量進(jìn)行了測定（見表1）。高叢越橘品種花青苷含量在（52.700±1.311）U·g-1FW到（171.533±0.569）U·g-1FW之間，其中來自波蘭的品種艾文豪花青苷含量最高，而來自美國的品種米斯蒂花青苷含量最低。高叢越橘品種平均為103.771 U·g-1FW，其中主栽品種藍(lán)豐花青苷含量為（82.200±0.265）U·g-1FW，低于平均值。

表1 不同越橘品種果實(shí)花青苷含量Table1 Contents of anthocyanin in different blueberry varieties

續(xù)表

半高叢越橘品種MN5415花青苷含量最高，為（128.433±0.289）U·g-1FW，其次為品種藍(lán)金（123.600±0.170U·g-1FW），圣云花青苷含量最低（83.967±0.115）U·g-1FW，半高叢越橘品種平均為99.956 U·g-1FW，低于高叢越橘。高叢越橘品種間的變異系數(shù)為29.48%，半高叢越橘品種間的變異系數(shù)為19.64%。說明越橘品種間花青苷含量具有較大的遺傳變異，高叢越橘品種間變異高于半高叢越橘。

對雜交后代類型的花青苷含量檢測顯示，其中來自波蘭的品種艾木藍(lán)花青苷含量最高（233.000±2.452）U·g-1FW，之后依次為小果（172.133±1.286）U·g-1FW、HL5（159.800±0.400）U·g-1FW。雜交后代類型的花青苷含量的平均值為135.860 U·g-1FW，變異為33.62%，平均值和變異系數(shù)均高于高叢越橘品種和半高叢越橘品種，說明品種選育過程中，花青苷含量是育種工作者考慮的一個(gè)重要指標(biāo)。

2.2 越橘果實(shí)發(fā)育過程中花青苷含量分析

以主栽品種藍(lán)豐為研究對象，對越橘果實(shí)、果肉、果皮發(fā)育過程中花青苷含量進(jìn)行了分析（見圖1）。越橘果實(shí)花青苷主要存在于果皮中，在粉色初期開始增加，并在50%藍(lán)色期迅速增加，到成熟期花青苷含量達(dá)到最高。越橘果肉中花青苷含量最低，在50%藍(lán)色期開始迅速增加，在成熟期達(dá)到最高。而整個(gè)果實(shí)中花青苷在粉色期開始增加，在50%藍(lán)色期開始迅速增加。越橘在果實(shí)綠色期就開始合成花青苷，但是含量很少。粉色期是花青苷合成的主要時(shí)期，而50%藍(lán)色期是越橘花青苷迅速合成期。

圖1 越橘果實(shí)發(fā)育過程中花青苷含量Fig.1 Contents of anthocyanin during blueberry fruit development

3 討論與結(jié)論

花青苷是越橘果實(shí)中最主要的生物活性物質(zhì)，越橘果實(shí)中花青苷含量與抗氧化力呈顯著的正相關(guān)[10-11]。李亞東等對野生和3個(gè)栽培種的花青苷含量進(jìn)行了研究，其中栽培品種花青苷含量高于野生種[12]。Ronald等對兔眼越橘、矮叢越橘和蔓越橘花青苷類型進(jìn)行了鑒定[13]。但對越橘品種進(jìn)行系統(tǒng)的花青苷含量比較未見報(bào)道。本試驗(yàn)對引進(jìn)的25個(gè)高叢越橘、9個(gè)半高叢越橘品種和10個(gè)雜交后代的果實(shí)花青苷含量進(jìn)行分析，同采用同種方法測定的葡萄、草莓、蘋果、梨等相比較，越橘果實(shí)中花青苷含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他試驗(yàn)材料，其中品種艾木藍(lán)、小果、艾文豪等花青苷含量最高，可以作為提高花青苷含量的主要育種材料。而具有綜合優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性狀的藍(lán)豐作為主栽品種[14]，花青苷含量低于平均值，因此提高花青苷含量是將來育種工作的主要目標(biāo)。對草莓綠熟期、白熟期、半紅期、全紅期、紫紅期5個(gè)時(shí)期花青苷含量變化研究顯示[15]，花青苷在半紅期開始迅速增加，紫紅期達(dá)到最高。對蘋果和梨等果樹的研究也顯示，花青苷在果實(shí)發(fā)育初期含量較少，隨著果實(shí)發(fā)育到中期，其含量開始迅速增加[16-17]。本試驗(yàn)對整個(gè)果實(shí)以及果皮和果肉綠色期、粉色初期、50%粉色期、粉色期、50%藍(lán)色期、成熟期，6個(gè)發(fā)育時(shí)期的花青苷含量進(jìn)行檢測，同其他樹種一樣，花青苷在發(fā)育初期含量較少，隨著果實(shí)的發(fā)育逐漸增加。其中果皮在粉色初期花青苷開始增加，因此通過栽培技術(shù)提高花青苷含量，可以考慮在粉色初期開始對果實(shí)進(jìn)行處理。在整個(gè)發(fā)育過程中，果皮中花青苷高于果肉，說明越橘花青苷含量主要存在于果皮中。

[1]趙爾豐,高暢,高欣,等.酶-超聲波輔助提取藍(lán)莓果渣中花青素的工藝研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,41(4):98-103.

[2]顧姻,賀善安.藍(lán)漿果與蔓越桔[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:16.

[3]郝瑞.長白山區(qū)篤斯越橘資源調(diào)查[J].園藝學(xué)報(bào),1979,6(2):87-93.

[4]李亞東.越橘高效栽培與加工利用[M].長春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社,2001:101-102.

[5]張春雨,李亞東,陳學(xué)森,等.高叢越橘果實(shí)香氣成分的GC/MS分析[J].園藝學(xué)報(bào),2009,36(2):187-194.

[6]張春雨,李亞東,陳學(xué)森,等.半高叢越橘果實(shí)香氣成分的GC-MS分析[J].果樹學(xué)報(bào),2009,26(2):235-239.

[7]張春雨,李亞東,劉海廣,等.越橘糖酸組分及含量分析[J].園藝學(xué)報(bào),2010,37(4):619-624.

[8]Pirie A,Mullins M G.Changes in anthocyanin and phenolics content of grapevine leaf and fruit tissues treated with sucrose,nitrate,and abscisic acid[J].Plant Physiology,1976,58(4):468-472.

[9]王惠聰,黃旭明,胡桂兵,等.荔枝果皮花青苷合成與相關(guān)酶的關(guān)系研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,37(12):2028-2032.

[10]Ronald L P,Cao G H,Antonio M,et al.Antioxidant capacity as influenced by total phenolic and anthocyanin content,maturity and variety of Vaccinium species[J].J Agric Food Chem,1998(46):2686-2693.

[11]Ehlenfeldt M K,Prior R L.Oxygen radical absorbance capacity(ORAC)and phenolic and anthocyanin concentrations in fruit and leaf tissues of highbush blueberry[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2001,49(5):2222-2227.

[12]李亞東,孟凡麗,鄭毅男,等.不同基因型越橘果實(shí)中4種花色苷含量的研究[J].園藝學(xué)報(bào),2004,31(3):367-368.

[13]Prior R L,Lazarus S A,Cao G,et al.Identification of procyanidins and anthocyanins in blueberries and cranberries(Vaccinium spp.)using high-performance liquid chromatography/mass spectroetry[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2001,49(3):1270-1276.

[14]李亞東,唐雪東,袁菲,等.我國小漿果生產(chǎn)現(xiàn)狀、問題和發(fā)展趨勢[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,42(1):1-10.

[15]趙淼,林毅,蔡永萍,等.不同光質(zhì)對草莓果實(shí)成熟過程中色素類物質(zhì)含量的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,20(1):64-66.

[16]劉曉靜,馮寶春,馮守千,等.“國光”蘋果及其紅色芽變花青苷合成與相關(guān)酶活性的研究[J].園藝學(xué)報(bào),2009,36(9):1249-1254.

[17]馮守千,陳學(xué)森,張春雨,等.砂梨品種滿天紅及其芽變品系奧冠花青苷合成與相關(guān)酶活性研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,41(10):3184-3190.