黃春燕，萬(wàn)魯長(zhǎng)，張柏松，張海蘭，郭惠東，宮志遠(yuǎn)

（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，山東 濟(jì)南 250100）

大球蓋菇Stropharia rugoso-annulata又名皺環(huán)球蓋菇，是一種色澤艷麗、清香脆甜、肉質(zhì)嫩滑的優(yōu)質(zhì)珍稀食用菌，含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)和多糖。上世紀(jì)60年代，德國(guó)最早進(jìn)行人工馴化栽培，現(xiàn)在波蘭、美國(guó)及荷蘭也進(jìn)行了人工栽培。上世紀(jì)90年代，我國(guó)開(kāi)始引種栽培[1]，它是目前國(guó)內(nèi)具有良好發(fā)展前景的珍稀食用菌之一。近幾年國(guó)內(nèi)也有許多學(xué)者對(duì)大球蓋菇的特性、制種及栽培技術(shù)等進(jìn)行了研究，但各研究者報(bào)道的適宜大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的氮源種類(lèi)差別較大，甚至互相矛盾[2，3，5]。為了掌握大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)特性，更好地開(kāi)發(fā)這一資源，筆者對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)適宜的氮源進(jìn)行了研究，以期為大球蓋菇的高產(chǎn)栽培提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

大球蓋菇DQ-12（本所篩選）。

1.2 供試培養(yǎng)基

活化培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨1 g、磷酸二氫鉀1.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、復(fù)合維生素B1片10 mg、瓊脂粉20 g，水1 000 mL。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：葡萄糖20g、磷酸二氫鉀1.5g、MgSO4·7H2O 0.5 g、復(fù)合維生素B1片10 mg、瓊脂粉20 g，水1 000 mL。

1.3 試驗(yàn)處理

將上述基礎(chǔ)培養(yǎng)基分別添加酵母浸粉、蛋白胨、硫酸銨、硝酸銨、尿素和硝酸鉀為氮源，根據(jù)各氮源的不同含氮量，分別設(shè)5個(gè)濃度梯度；以不加氮源為空白對(duì)照，共31個(gè)處理，每一處理重復(fù)3次，每一重復(fù)做5個(gè)培養(yǎng)皿。常規(guī)方法制作培養(yǎng)基，用試管定量分裝25 mL，滅菌后傾倒于直徑90 mm的培養(yǎng)皿中，制成培養(yǎng)基平板，供實(shí)驗(yàn)用。

1.4 接種培養(yǎng)

取供試保藏菌種，挑取一小塊于活化培養(yǎng)基斜面上，適溫下培養(yǎng)，待長(zhǎng)滿(mǎn)管時(shí)，轉(zhuǎn)接至相同的平板培養(yǎng)基上，置于適宜的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落直徑長(zhǎng)至6 cm～7 cm時(shí)，在菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌圓片，接種于各處理培養(yǎng)基平板上，置25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

1.5 數(shù)據(jù)測(cè)定與統(tǒng)計(jì)

各處理于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)12 d后，測(cè)量菌落半徑，計(jì)算菌絲日均生長(zhǎng)速度并觀察菌絲長(zhǎng)勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度酵母浸粉對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度酵母浸粉對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同濃度酵母浸粉對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

由表1可以看出，添加不同濃度的酵母浸粉對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)影響較大，添加酵母浸粉后，菌絲擴(kuò)張速度變慢，但菌絲分支增多，當(dāng)酵母浸粉濃度為0.13%時(shí)，菌絲致密，長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)，但菌絲擴(kuò)張速度與對(duì)照相比差異不顯著。當(dāng)酵母浸粉濃度為0.26%時(shí)，菌絲致密，長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)，菌絲擴(kuò)張速度與對(duì)照相比差異極顯著。當(dāng)酵母浸粉濃度大于0.39%時(shí)，不但菌絲擴(kuò)張速度與對(duì)照相比差異極顯著，菌絲長(zhǎng)勢(shì)也變?nèi)酢?/p>

2.2 不同濃度蛋白胨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度蛋白胨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表2。

表2 不同濃度蛋白胨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

由表2可以看出，隨蛋白胨濃度的增加，菌絲生長(zhǎng)速度逐漸變慢，但與無(wú)氮對(duì)照相比菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)顯著性差異，而加入蛋白胨可促進(jìn)菌絲分支，長(zhǎng)勢(shì)增強(qiáng)。

2.3 不同濃度硫酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度硫酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表3。

表3 不同濃度硫酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

由表3可以看出，加入硫酸銨可極顯著的影響大球蓋菇菌絲的生長(zhǎng)，使生長(zhǎng)速度變慢，長(zhǎng)勢(shì)亦比較微弱。

2.4 不同濃度硝酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度硝酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表4。

表4 不同濃度硝酸銨對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

由表4可以看出，微量硝酸銨可以促進(jìn)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)，當(dāng)濃度大于0.06%時(shí)即可抑制菌絲生長(zhǎng)。

2.5 不同濃度尿素對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度尿素對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表5。

表5 不同濃度尿素對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

由表5可以看出，微量尿素可以促進(jìn)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)，但隨濃度增大，菌絲生長(zhǎng)速度變慢，當(dāng)濃度大于0.13%時(shí)，長(zhǎng)勢(shì)也變?nèi)酢?/p>

2.6 不同濃度硝酸鉀對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

不同濃度硝酸鉀對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表6。

由表6可以看出，添加不同濃度的硝酸鉀可顯著影響大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)，使菌絲生長(zhǎng)速度變慢，長(zhǎng)勢(shì)也比較弱。

3 結(jié)論與討論

氮源是大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的主要營(yíng)養(yǎng)源之一。據(jù)劉勝貴等[2]報(bào)道，大球蓋菇營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)所需最適氮源以硫酸銨為最好，其余依次為蛋白胨、硝酸銨、尿素，在酵母膏為氮源的培養(yǎng)基中不生長(zhǎng)；顏淑婉[4]研究認(rèn)為最適氮源為酵母浸膏；而張世敏等[5]報(bào)道認(rèn)為最佳氮源為尿素，其次為蛋白胨和酵母膏。閆培生等[3]研究認(rèn)為，最適有機(jī)氮源是豆粉，其次是酵母膏，牛肉膏和蛋白胨不宜做氮源，無(wú)機(jī)氮中以NH4NO3最佳。

表6 不同濃度硝酸鉀對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響

而本研究表明大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)最適宜氮源是尿素，其適宜濃度是0.026%；蛋白胨次之，其適宜濃度是0.1%；硫酸銨最差。大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)對(duì)氮源濃度極敏感，在無(wú)氮源的情況下，大球蓋菇菌絲能快速生長(zhǎng)，但長(zhǎng)勢(shì)極微弱。低濃度氮源可促進(jìn)菌絲分支，長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，高濃度氮?jiǎng)t顯著抑制菌絲生長(zhǎng)；有機(jī)氮源優(yōu)于無(wú)機(jī)氮源。

文獻(xiàn)報(bào)道中對(duì)最佳氮源的研究結(jié)果之所以差異巨大，可能與研究者所采用的研究方法有關(guān)，劉勝貴、張世敏、顏淑婉、閆培生等的研究均只測(cè)定了供試氮源的一個(gè)濃度，未做梯度試驗(yàn)，通常情況下，如果研究對(duì)象對(duì)氮源濃度不敏感，采用常用濃度篩選最佳氮源對(duì)結(jié)果影響不大，但如果研究對(duì)象對(duì)氮源濃度非常敏感，不做梯度試驗(yàn)可能會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果差異較大。

[1]黃年來(lái).大球蓋菇的分類(lèi)地位和特征特性[J].食用菌，1995，17(6)：11.

[2]劉勝貴，呂金海.大球蓋菇生物學(xué)特性的研究[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，1999，19(2)：19-22.

[3]閆培生，李桂舫，蔣家慧，等.大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需求及環(huán)境條件[J].食用菌學(xué)報(bào)，2001，8(1)：5-9.

[4]顏淑婉.大球蓋菇的生物學(xué)特性[J].福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2002，31(3)：401-403.

[5]張世敏，和晶亮，邱立友，等.不同碳氮營(yíng)養(yǎng)源和培養(yǎng)溫度對(duì)大球蓋菇菌絲生長(zhǎng)的影響[J].微生物學(xué)雜志，2005，25(6)：32-34.