張志強(qiáng) 李濟(jì)福

（河南平頂山中平能化醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院急診科，河南 平頂山 467000）

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）是目前臨床常用且有效的降壓藥物，一般認(rèn)為二者具有良好的降壓效果和明顯的心臟血管保護(hù)作用[1]。但聯(lián)合應(yīng)用的療效是否優(yōu)于單用，是近年來(lái)爭(zhēng)議的焦點(diǎn)。為此我們聯(lián)合應(yīng)用纈沙坦和依那普利對(duì)原發(fā)性高血壓大鼠進(jìn)行了動(dòng)物對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以探討這兩種藥物聯(lián)用后對(duì)心肌重塑以及一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素（ET）的影響。

1 材料與方法

1.1 一般資料

12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）40只（上海高血壓研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），隨機(jī)分成4組，每組10只。SHR對(duì)照組、纈沙坦組[30mg/（kg?d）]、依那普利組[10mg/（kg?d）]、二者聯(lián)用組[纈沙坦15mg/（kg?d） +雷米普利5mg/（kg?d）]，灌胃1次/d。纈沙坦（諾華公司產(chǎn)品），依那普利（揚(yáng)子江制藥股份有限公司產(chǎn)品），3個(gè)月后分別測(cè)定左心室重量指數(shù)（LVMI）、心肌膠原含量（MCC）及心肌膠原容積分?jǐn)?shù)（CVF），血清NO和ET值。

1.2 血清NO和ET測(cè)定

表1 三組LVMI、MCC、CVF及血清ET和NO水平比較 (±s)

表1 三組LVMI、MCC、CVF及血清ET和NO水平比較 (±s)

注：與SHR組比較，*P＜0.05，△P＜0.01

分組 只數(shù) LVMI(mg/g) MCC(mg) CVF(%) ET(pg/mL) 血清NO(μmol/L)SHR組 10 4.6±0.7 43.6±10.8 6.8±1.9 91.5±10.8 21.2±3.4纈沙坦組 10 3.7±0.4* 30.5±7.1* 4.4 ±0.9* 73.5±7.5* 32.2±5.6*依那普利組 10 3.5±0.4* 31.4±7.5* 4.6 ±1.1* 75.6±7.6* 31.5±5.2*聯(lián)用組 10 3.0±0.3△ 25.7±5.6△ 3.5±0.7△ 62.4±5.8△ 40.3±6.4△

3個(gè)月后抽取下腔靜脈血2mL，注入含10%乙二胺四乙酸二鈉30μl+抑肽酶40μL的試管中，搖勻后3000r/min離心10min，分離血漿后置于-80℃冰箱保存待側(cè)。集中測(cè)定前將標(biāo)本置于冷水中復(fù)融，3000r/min離心5min后取上清液，按ET放免盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。NO測(cè)定采用硝酸還原酶法。NO試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3 心臟標(biāo)本的分析

處死大鼠后開(kāi)胸取出心臟，剪開(kāi)心腔后用預(yù)冷的生理鹽水洗掉血液，濾紙吸干水分，再用電子天平稱取左心室實(shí)際質(zhì)量，與體質(zhì)量相除后得出左心室的相對(duì)質(zhì)量，即左心室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）。參照Bergerman方法測(cè)定大鼠左室心肌的羥脯氨酸濃度。膠原質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）=羥脯氨酸濃度×8.5；膠原質(zhì)量（mg）=膠原質(zhì)量分?jǐn)?shù)×左室質(zhì)量[2]。

2 結(jié) 果

纈沙坦組、依那普利組和聯(lián)用組的LVMI、MCC和CVF均下降，與對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯(lián)用組效果優(yōu)于纈沙坦組和依那普利組；三組的ET均下降，NO均升高，與對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯(lián)用組效果優(yōu)于纈沙坦組和依那普利組。見(jiàn)表1。

3 討 論

近年來(lái)的研究表明，心肌肥厚不僅包括心肌細(xì)胞的肥大，還包括內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等非肌性細(xì)胞的增殖和細(xì)胞外間質(zhì)的異常沉積。有研究[3]顯示高血壓大鼠形成心肌肥厚后，隨著時(shí)間的推移，心肌重量指數(shù)增長(zhǎng)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，而心肌膠原含量和心肌膠原容積分?jǐn)?shù)呈明顯上升趨勢(shì)，因此高血壓大鼠心肌重塑表現(xiàn)為早期的心肌肥厚為主，和后期的膠原沉積為主，而心肌逐漸萎縮。這也可能是長(zhǎng)期高血壓作用導(dǎo)致左心功能不全的主要原因[4]。ACEI類降壓藥物是通過(guò)抑制AngⅡ轉(zhuǎn)換酶達(dá)到降壓的目的，而ARB類降壓藥物則是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合于AngⅡ型受體起到降壓作用，已經(jīng)有研究[5]表明它們可明顯改善心肌和動(dòng)脈重塑，從而降低心腦血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但對(duì)于它們改善心肌和動(dòng)脈重塑的機(jī)制研究較少。本研究結(jié)果顯示纈沙坦、依那普利組和二者聯(lián)用三組的LVMI、MCC和CVF均明顯下降，與對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05），同時(shí)發(fā)現(xiàn)纈沙坦、依那普利聯(lián)用組效果優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用。說(shuō)明纈沙坦和依那普利均具有改善心肌重塑的作用，并且二者聯(lián)用效果會(huì)更好。

ET是一組由21個(gè)氨基酸組成的具有強(qiáng)烈縮血管作用的三肽家族，具有促進(jìn)有絲分裂或輔助絲分裂的強(qiáng)有力縮血管作用。研究[6]顯示ET通過(guò)激活血管壁的氧化應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，進(jìn)而誘導(dǎo)高血壓模型大鼠的血管重塑和內(nèi)皮功能障礙。同時(shí)很多人體試驗(yàn)也證明了ET在許許多多心血管疾病中促進(jìn)了血管重塑和終末器官損害。本研究發(fā)現(xiàn)對(duì)照組血清ET水平顯著高于正常范圍，就提示高血壓大鼠存在明顯的內(nèi)皮功能障礙。并且纈沙坦組、依那普利組和二者聯(lián)用三組的ET均明顯下降，與對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯(lián)用組效果優(yōu)于纈沙坦組和依那普利組。說(shuō)明纈沙坦和依那普利均具有改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，并且二者聯(lián)用對(duì)改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能更加顯著。

NO是一種具有強(qiáng)活性的自由基氣體，是非常重要的血管舒張因子，具有擴(kuò)血管、改善血流灌注和減少缺血性損傷，抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和抑制血小板的黏附聚集作用[7]。高血壓大鼠模型可能就因擴(kuò)血管因子NO合成減少，導(dǎo)致血管張力調(diào)節(jié)失衡所致。一般認(rèn)為內(nèi)皮細(xì)胞的功能完整與否，需要依賴ET與NO等血管活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡[8]。本組高血壓大鼠模型中的血清ET水平增高，而NO水平降低，提示高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能損害，血管張力調(diào)節(jié)失衡。本研究發(fā)現(xiàn)纈沙坦組、依那普利組和二者聯(lián)用三組的NO均明顯上升，與對(duì)照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯(lián)用組效果明顯優(yōu)于纈沙坦組和依那普利組。提示纈沙坦和依那普利均具有提高NO水平，改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，尤其二者聯(lián)用對(duì)改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能更加顯著。

綜上所述，小劑量聯(lián)合應(yīng)用纈沙坦和依那普利可以提升血清NO水平，降低ET水平，改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，并能夠抑制心肌肥厚，改善心肌重塑，并起到協(xié)同作用，其協(xié)同作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)為小劑量的ACEI和ARB聯(lián)合應(yīng)用治療高血壓提供了臨床應(yīng)用的依據(jù)。

[1] 黨愛(ài)民,陳改玲,劉國(guó)慶.高血壓的藥物治療進(jìn)展[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2004,7(6)：691.

[2] 孫敬芳.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2001：564.

[3] 王雙,萬(wàn)載陽(yáng),唐朝克,等.兩腎一夾型腎高血壓大鼠重塑血管對(duì)血緊張素Ⅱ反應(yīng)變化及其機(jī)制[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志,2003,11(6)：501-504.

[4] 袁萍,商黔惠,吳芹,等.厄貝沙坦對(duì)腎性高血壓大鼠左心室肥厚心肌腺苷三磷酸酶和鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的影響[J].中華高血壓雜志,2009,17(3)：238-242.

[5] 周珂,李庚山,余紹祖.氯沙坦對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠腎素血管緊張素Ⅱ水平的影響[J].卒中與神經(jīng)疾病,2000,7(3)：150-152.

[6] 張均華.血管內(nèi)皮功能障礙與冠狀動(dòng)脈疾病[J].中華老年心腦血管病雜志,2002,4(1)：3-5.

[7] 鄭永紅,白玉茹,胡錫衷.小劑量聯(lián)合應(yīng)用纈沙坦和雷米普利對(duì)原發(fā)性高血壓大鼠體內(nèi)NO水平及心肌重塑的影響[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2007,10(3)：211-212.

[8] 胡威,商黔惠,姜黔峰.依那普利、厄貝沙坦單用和聯(lián)用對(duì)高血壓大鼠主動(dòng)脈重塑與中膜鈉泵及鈣泵的影響[J].中華高血壓雜志,2010,18(6)：528-529.