施勇 蘇寶良 顧順樟 徐國(guó)權(quán)

(上海機(jī)場(chǎng)出入境檢驗(yàn)檢疫局 上海 201202)

1 前言

隨著我國(guó)的不斷開放，國(guó)際交流的不斷增多，入境寵物也呈現(xiàn)出逐年增多的趨勢(shì)。由于寵物和人類的親密接觸，加之多來(lái)自不同的國(guó)家和地區(qū)，疫情復(fù)雜，尤其是狂犬病，被我國(guó)列入進(jìn)境動(dòng)物二類傳染病?？袢∈怯煽袢〔《疽鸬娜撕蛣?dòng)物的一種急性接觸性傳染病。人和動(dòng)物受到狂犬病病毒感染后，其潛伏期有長(zhǎng)有短，短者一周左右，長(zhǎng)者可達(dá)3年以上，大多數(shù)為1－2個(gè)月左右，其癥狀是神經(jīng)興奮和意識(shí)障礙，繼之局部或全身麻痹而死亡危害甚大［1］，檢疫監(jiān)管稍有不當(dāng)就可能造成疫病傳入，給我國(guó)人民的健康及農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)安全帶來(lái)隱患。

圖1 狂犬病毒粒子結(jié)構(gòu)圖

狂犬病毒粒子呈子彈形(圖1)，表面糖蛋白以10 nm的突起覆蓋病毒包膜，核蛋白包裹著病毒RNA，形成核糖核衣殼，以螺旋形纏繞在中心。磷蛋白和轉(zhuǎn)錄酶蛋白與核糖核衣殼聯(lián)合，組成RNA依賴的RNA聚合酶［2］。糖蛋白構(gòu)成病毒表面突起，是狂犬病毒與細(xì)胞受體相結(jié)合的部位，也是有效的保護(hù)性抗原，能誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體并刺激細(xì)胞免疫。

上海機(jī)場(chǎng)檢驗(yàn)檢疫局在國(guó)內(nèi)率先對(duì)入境寵物實(shí)施強(qiáng)制性隔離措施，與機(jī)場(chǎng)海關(guān)聯(lián)合設(shè)立了入境寵物集中監(jiān)管區(qū)，對(duì)空港口岸以分運(yùn)行李形式入境的寵物實(shí)施集中監(jiān)管，采取先實(shí)施隔離監(jiān)管、后辦理檢疫及通關(guān)手續(xù)的模式［3］，報(bào)檢時(shí)須提交輸出國(guó)官方出具的檢疫證書和狂犬病疫苗接種證書，這一模式加快了通關(guān)速度，大大降低了在口岸現(xiàn)場(chǎng)的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。在隔離檢疫期間，目前采用膠體金標(biāo)記法定性檢測(cè)狂犬病毒，并沒(méi)有要求檢測(cè)接種狂犬病疫苗后血清中抗狂犬病抗體的水平，但是相關(guān)調(diào)查資料顯示即使注射了狂犬病毒疫苗，仍有4%左右的犬帶毒，而WHO狂犬病專家委員會(huì)認(rèn)定接種狂犬病疫苗后犬血清中抗狂犬病病毒抗體滴度大于或等于0.5IU/mL時(shí)，接種犬才具有保護(hù)性［4］，凡免疫后抗體水平?jīng)]達(dá)到要求的，應(yīng)按免疫方案及時(shí)補(bǔ)種。這一監(jiān)管空白帶來(lái)的安全隱患可想而知，可能會(huì)嚴(yán)重威脅著人類的健康。

為了進(jìn)一步加強(qiáng)上?？诎度刖硨櫸锶臋z疫管理，防止狂犬病等疫情傳入我國(guó)，本文針對(duì)入境犬自身的因素，從年齡、體型大小、品種等影響狂犬病疫苗免疫效果方面進(jìn)行了具體的分析，并提出了相應(yīng)的對(duì)策，希望能夠起到拋磚引玉的作用。

2 影響因素

2.1 年齡

犬按照年齡一般可分為幼年犬(1歲以下)、成年犬(1－7歲)、老年犬(7歲以上)，接種狂犬病疫苗后，幼年犬和老年犬產(chǎn)生的抗狂犬病病毒抗體水平要比成年犬低［5］。幼年犬的免疫系統(tǒng)還未發(fā)育成熟，而老年犬隨著免疫功能趨于低下，這可能是兩組犬免疫反應(yīng)較低的主要原因，成年犬免疫細(xì)胞成熟且可能有相應(yīng)的記憶性B細(xì)胞，產(chǎn)生的免疫應(yīng)答也是最強(qiáng)的。

幼犬體內(nèi)的母源抗體也是一個(gè)重要因素。母源抗體對(duì)保護(hù)幼犬避免早期感染疾病具有極其重要的意義，但也是干擾疫苗免疫最常見(jiàn)的因素。在母源抗體效價(jià)較高時(shí)進(jìn)行疫苗免疫，它可中和疫苗(尤其是弱毒疫苗)而干擾免疫應(yīng)答，導(dǎo)致犬的免疫失敗。

其次一般幼犬注苗前都首先進(jìn)行驅(qū)蟲，驅(qū)蟲劑量如果過(guò)大，往往會(huì)造成免疫抑制。

2.2 體型大小

犬按照體型一般可分為小型犬(體高不足25cm)、中小型犬(體高不足40cm)、中型犬(身高在41－60cm)、中大型犬(身高在60－70cm)、大型犬(身高在71cm以上)五組，接種狂犬病疫苗后小型犬和中小型犬產(chǎn)生的抗狂犬病病毒抗體水平比其他組低［6］，其他組隨著體型的增大而抗體水平也增加。

某些狂犬病疫苗是按照體重計(jì)算劑量的，每瓶的抗原量是根據(jù)犬平均體重計(jì)算的，可能過(guò)多的抗原接種量會(huì)使小型犬產(chǎn)生一定的免疫抑制。另外，體型越大的犬具有更厚的皮下組織，免疫細(xì)胞較豐富，且疫苗接種的部位也更容易確定。

2.3 品種

研究發(fā)現(xiàn)犬的品種和抗狂犬病病毒抗體水平的高低并沒(méi)有特別的相互關(guān)系，但是英國(guó)研究學(xué)者卻發(fā)現(xiàn)牧羊犬、拉布拉多犬、哈巴犬、巴吉度獵犬、比格犬、威瑪獵犬、惠比特犬對(duì)狂犬病疫苗的免疫應(yīng)答卻沒(méi)有預(yù)期的高［6］，尤其是作為免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的比格犬。這可能和不同品種犬的主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility complex，MHC)相關(guān)，MHC是編碼主要組織相容性抗原分子的基因群，控制著機(jī)體細(xì)胞間的相互識(shí)別、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，具有高度多態(tài)性。

每一個(gè)品種犬的MHC的多態(tài)性都不盡相同，其在染色體同一基因座有兩種以上基因型，即可能編碼二種以上的產(chǎn)物，因此針對(duì)疫苗中的狂犬病病毒抗原可能有不同免疫應(yīng)答的啟動(dòng)和誘導(dǎo)［7］。但是哪一品種犬的MHC對(duì)狂犬病疫苗的抗原具有更高的識(shí)別、提呈作用還有待于進(jìn)一步研究。

3 討論與對(duì)策

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一種人畜共患病，病死率幾乎高達(dá)100%，是一種高風(fēng)險(xiǎn)的傳染性疫病。進(jìn)境寵物接種安全有效的狂犬病疫苗是預(yù)防犬傳染病的最好辦法，但是接種后在免疫期內(nèi)能否抵抗強(qiáng)毒攻擊的依據(jù)是疫苗能否刺激犬產(chǎn)生足夠的抗體滴度(≥0.5IU/mL)，因此各國(guó)對(duì)寵物入境的檢疫要求都極高。比如日本特別強(qiáng)調(diào)出口日本的寵物犬貓必須有經(jīng)過(guò)日本官方認(rèn)可，并有通過(guò)資格考核的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室出具的合格抗狂犬病血清抗體檢測(cè)報(bào)告;歐盟也要求由其認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的抗狂犬病血清抗體，且血清抗體測(cè)驗(yàn)的結(jié)果必須達(dá)到要求，由歐盟外第三國(guó)提供的官方衛(wèi)生證明必須附有相關(guān)證據(jù)及測(cè)驗(yàn)結(jié)果［8］。而我國(guó)只是要求貨主或代理提供輸出國(guó)官方出具的檢疫證書和狂犬病疫苗接種證書，隔離場(chǎng)對(duì)狂犬病等病毒出具定性檢測(cè)報(bào)告，而對(duì)抗狂犬病血清抗體的檢測(cè)并沒(méi)有具體的要求，這對(duì)寵物狂犬病的防控帶來(lái)了一定的風(fēng)險(xiǎn)，很有可能經(jīng)隔離檢疫合格的寵物是一只對(duì)狂犬病病毒“不設(shè)防”的犬。因此，我們建議學(xué)習(xí)一些發(fā)達(dá)國(guó)家的做法，入境寵物疫苗接種證書上必須要有出境前官方認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室出具的抗狂犬病血清抗體的定量檢測(cè)結(jié)果，且抗體水平應(yīng)大于或等于0.5IU/mL。

所以不能認(rèn)為只要進(jìn)境寵物接種狂犬病疫苗就萬(wàn)無(wú)一失了［9］。因此，有必要對(duì)進(jìn)境寵物犬進(jìn)行分類管理和分析，篩選出高風(fēng)險(xiǎn)的犬只，建議加強(qiáng)對(duì)幼年犬、老年犬、小型犬且對(duì)狂犬病疫苗反應(yīng)不佳犬種的監(jiān)管，對(duì)這部分犬不僅要進(jìn)行狂犬病毒的定性檢測(cè)，還要抽查抗狂犬病毒血清抗體的水平。

加強(qiáng)犬病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)，目前上?？诎秾?duì)進(jìn)境寵物狂犬病的檢測(cè)方法為利用單克隆抗體特異性的膠體金標(biāo)記法，并沒(méi)有單獨(dú)檢測(cè)抗狂犬病血清抗體，因此無(wú)法清楚寵物體內(nèi)的抗體保護(hù)水平。如果要檢測(cè)抗狂犬病血清抗體，必須要有通過(guò)相關(guān)資質(zhì)考核的犬病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室和科技人員。

另外，寵物犬在接種疫苗后一般10－15d才產(chǎn)生血清抗體和免疫力。此前抗體可能未產(chǎn)生或者滴度比較低(即免疫空白期)，此時(shí)犬仍有感染傳染病的可能，建議應(yīng)該限制處于免疫空白期的寵物入境。

最后，檢驗(yàn)檢疫部門應(yīng)收集國(guó)外狂犬病疫苗生產(chǎn)廠商所用抗原蛋白的序列、結(jié)構(gòu)、疫苗株所保護(hù)的范圍等信息;隨時(shí)關(guān)注全球狂犬病疫情的發(fā)展、毒株是否發(fā)生變異、疫苗保護(hù)能力的變化，真正做到細(xì)微處，完善相關(guān)的應(yīng)急處置方案。

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［9］ Nicholas J，Adam FC，et al.The immune response to rabies virus infection and vaccination［J］.Vaccine，2010，28:3896 –3901.