施勇 蘇寶良 顧順樟 徐國權(quán)

(上海機(jī)場出入境檢驗(yàn)檢疫局 上海 201202)

1 前言

隨著我國的不斷開放，國際交流的不斷增多，入境寵物也呈現(xiàn)出逐年增多的趨勢。由于寵物和人類的親密接觸，加之多來自不同的國家和地區(qū)，疫情復(fù)雜，尤其是狂犬病，被我國列入進(jìn)境動物二類傳染病?？袢∈怯煽袢〔《疽鸬娜撕蛣游锏囊环N急性接觸性傳染病。人和動物受到狂犬病病毒感染后，其潛伏期有長有短，短者一周左右，長者可達(dá)3年以上，大多數(shù)為1－2個月左右，其癥狀是神經(jīng)興奮和意識障礙，繼之局部或全身麻痹而死亡危害甚大［1］，檢疫監(jiān)管稍有不當(dāng)就可能造成疫病傳入，給我國人民的健康及農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)安全帶來隱患。

圖1 狂犬病毒粒子結(jié)構(gòu)圖

狂犬病毒粒子呈子彈形(圖1)，表面糖蛋白以10 nm的突起覆蓋病毒包膜，核蛋白包裹著病毒RNA，形成核糖核衣殼，以螺旋形纏繞在中心。磷蛋白和轉(zhuǎn)錄酶蛋白與核糖核衣殼聯(lián)合，組成RNA依賴的RNA聚合酶［2］。糖蛋白構(gòu)成病毒表面突起，是狂犬病毒與細(xì)胞受體相結(jié)合的部位，也是有效的保護(hù)性抗原，能誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體并刺激細(xì)胞免疫。

上海機(jī)場檢驗(yàn)檢疫局在國內(nèi)率先對入境寵物實(shí)施強(qiáng)制性隔離措施，與機(jī)場海關(guān)聯(lián)合設(shè)立了入境寵物集中監(jiān)管區(qū)，對空港口岸以分運(yùn)行李形式入境的寵物實(shí)施集中監(jiān)管，采取先實(shí)施隔離監(jiān)管、后辦理檢疫及通關(guān)手續(xù)的模式［3］，報(bào)檢時(shí)須提交輸出國官方出具的檢疫證書和狂犬病疫苗接種證書，這一模式加快了通關(guān)速度，大大降低了在口岸現(xiàn)場的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。在隔離檢疫期間，目前采用膠體金標(biāo)記法定性檢測狂犬病毒，并沒有要求檢測接種狂犬病疫苗后血清中抗狂犬病抗體的水平，但是相關(guān)調(diào)查資料顯示即使注射了狂犬病毒疫苗，仍有4%左右的犬帶毒，而WHO狂犬病專家委員會認(rèn)定接種狂犬病疫苗后犬血清中抗狂犬病病毒抗體滴度大于或等于0.5IU/mL時(shí)，接種犬才具有保護(hù)性［4］，凡免疫后抗體水平?jīng)]達(dá)到要求的，應(yīng)按免疫方案及時(shí)補(bǔ)種。這一監(jiān)管空白帶來的安全隱患可想而知，可能會嚴(yán)重威脅著人類的健康。

為了進(jìn)一步加強(qiáng)上?？诎度刖硨櫸锶臋z疫管理，防止狂犬病等疫情傳入我國，本文針對入境犬自身的因素，從年齡、體型大小、品種等影響狂犬病疫苗免疫效果方面進(jìn)行了具體的分析，并提出了相應(yīng)的對策，希望能夠起到拋磚引玉的作用。

2 影響因素

2.1 年齡

犬按照年齡一般可分為幼年犬(1歲以下)、成年犬(1－7歲)、老年犬(7歲以上)，接種狂犬病疫苗后，幼年犬和老年犬產(chǎn)生的抗狂犬病病毒抗體水平要比成年犬低［5］。幼年犬的免疫系統(tǒng)還未發(fā)育成熟，而老年犬隨著免疫功能趨于低下，這可能是兩組犬免疫反應(yīng)較低的主要原因，成年犬免疫細(xì)胞成熟且可能有相應(yīng)的記憶性B細(xì)胞，產(chǎn)生的免疫應(yīng)答也是最強(qiáng)的。

幼犬體內(nèi)的母源抗體也是一個重要因素。母源抗體對保護(hù)幼犬避免早期感染疾病具有極其重要的意義，但也是干擾疫苗免疫最常見的因素。在母源抗體效價(jià)較高時(shí)進(jìn)行疫苗免疫，它可中和疫苗(尤其是弱毒疫苗)而干擾免疫應(yīng)答，導(dǎo)致犬的免疫失敗。

其次一般幼犬注苗前都首先進(jìn)行驅(qū)蟲，驅(qū)蟲劑量如果過大，往往會造成免疫抑制。

2.2 體型大小

犬按照體型一般可分為小型犬(體高不足25cm)、中小型犬(體高不足40cm)、中型犬(身高在41－60cm)、中大型犬(身高在60－70cm)、大型犬(身高在71cm以上)五組，接種狂犬病疫苗后小型犬和中小型犬產(chǎn)生的抗狂犬病病毒抗體水平比其他組低［6］，其他組隨著體型的增大而抗體水平也增加。

某些狂犬病疫苗是按照體重計(jì)算劑量的，每瓶的抗原量是根據(jù)犬平均體重計(jì)算的，可能過多的抗原接種量會使小型犬產(chǎn)生一定的免疫抑制。另外，體型越大的犬具有更厚的皮下組織，免疫細(xì)胞較豐富，且疫苗接種的部位也更容易確定。

2.3 品種

研究發(fā)現(xiàn)犬的品種和抗狂犬病病毒抗體水平的高低并沒有特別的相互關(guān)系，但是英國研究學(xué)者卻發(fā)現(xiàn)牧羊犬、拉布拉多犬、哈巴犬、巴吉度獵犬、比格犬、威瑪獵犬、惠比特犬對狂犬病疫苗的免疫應(yīng)答卻沒有預(yù)期的高［6］，尤其是作為免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)動物的比格犬。這可能和不同品種犬的主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility complex，MHC)相關(guān)，MHC是編碼主要組織相容性抗原分子的基因群，控制著機(jī)體細(xì)胞間的相互識別、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，具有高度多態(tài)性。

每一個品種犬的MHC的多態(tài)性都不盡相同，其在染色體同一基因座有兩種以上基因型，即可能編碼二種以上的產(chǎn)物，因此針對疫苗中的狂犬病病毒抗原可能有不同免疫應(yīng)答的啟動和誘導(dǎo)［7］。但是哪一品種犬的MHC對狂犬病疫苗的抗原具有更高的識別、提呈作用還有待于進(jìn)一步研究。

3 討論與對策

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一種人畜共患病，病死率幾乎高達(dá)100%，是一種高風(fēng)險(xiǎn)的傳染性疫病。進(jìn)境寵物接種安全有效的狂犬病疫苗是預(yù)防犬傳染病的最好辦法，但是接種后在免疫期內(nèi)能否抵抗強(qiáng)毒攻擊的依據(jù)是疫苗能否刺激犬產(chǎn)生足夠的抗體滴度(≥0.5IU/mL)，因此各國對寵物入境的檢疫要求都極高。比如日本特別強(qiáng)調(diào)出口日本的寵物犬貓必須有經(jīng)過日本官方認(rèn)可，并有通過資格考核的檢測實(shí)驗(yàn)室出具的合格抗狂犬病血清抗體檢測報(bào)告;歐盟也要求由其認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室測定的抗狂犬病血清抗體，且血清抗體測驗(yàn)的結(jié)果必須達(dá)到要求，由歐盟外第三國提供的官方衛(wèi)生證明必須附有相關(guān)證據(jù)及測驗(yàn)結(jié)果［8］。而我國只是要求貨主或代理提供輸出國官方出具的檢疫證書和狂犬病疫苗接種證書，隔離場對狂犬病等病毒出具定性檢測報(bào)告，而對抗狂犬病血清抗體的檢測并沒有具體的要求，這對寵物狂犬病的防控帶來了一定的風(fēng)險(xiǎn)，很有可能經(jīng)隔離檢疫合格的寵物是一只對狂犬病病毒“不設(shè)防”的犬。因此，我們建議學(xué)習(xí)一些發(fā)達(dá)國家的做法，入境寵物疫苗接種證書上必須要有出境前官方認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室出具的抗狂犬病血清抗體的定量檢測結(jié)果，且抗體水平應(yīng)大于或等于0.5IU/mL。

所以不能認(rèn)為只要進(jìn)境寵物接種狂犬病疫苗就萬無一失了［9］。因此，有必要對進(jìn)境寵物犬進(jìn)行分類管理和分析，篩選出高風(fēng)險(xiǎn)的犬只，建議加強(qiáng)對幼年犬、老年犬、小型犬且對狂犬病疫苗反應(yīng)不佳犬種的監(jiān)管，對這部分犬不僅要進(jìn)行狂犬病毒的定性檢測，還要抽查抗狂犬病毒血清抗體的水平。

加強(qiáng)犬病檢測實(shí)驗(yàn)室的檢測，目前上海口岸對進(jìn)境寵物狂犬病的檢測方法為利用單克隆抗體特異性的膠體金標(biāo)記法，并沒有單獨(dú)檢測抗狂犬病血清抗體，因此無法清楚寵物體內(nèi)的抗體保護(hù)水平。如果要檢測抗狂犬病血清抗體，必須要有通過相關(guān)資質(zhì)考核的犬病檢測實(shí)驗(yàn)室和科技人員。

另外，寵物犬在接種疫苗后一般10－15d才產(chǎn)生血清抗體和免疫力。此前抗體可能未產(chǎn)生或者滴度比較低(即免疫空白期)，此時(shí)犬仍有感染傳染病的可能，建議應(yīng)該限制處于免疫空白期的寵物入境。

最后，檢驗(yàn)檢疫部門應(yīng)收集國外狂犬病疫苗生產(chǎn)廠商所用抗原蛋白的序列、結(jié)構(gòu)、疫苗株所保護(hù)的范圍等信息;隨時(shí)關(guān)注全球狂犬病疫情的發(fā)展、毒株是否發(fā)生變異、疫苗保護(hù)能力的變化，真正做到細(xì)微處，完善相關(guān)的應(yīng)急處置方案。

［1］ 金宏麗，王化磊，齊瑛琳，等.狂犬病病毒感染免疫反應(yīng)研究進(jìn)展［J］.中國病原生物學(xué)雜志，2011，6(8):614 －617.

［2］ 周向梅，趙德明.狂犬病及其研究進(jìn)展［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2005，32(1):48 －50.

［3］ 徐國權(quán).上海局探索入境寵物檢疫新模式［N］.中國國門時(shí)報(bào)，2008－4－30.

［4］ Burr PD，Snodgrass D R.Serological response to rabies vaccination for the pet travel scheme［J］.Res Vet Sci，2002，72(1):25.

［5］ Mansfield K L，Burr P D，et al.Factors affecting the serological response of dogs and cats to rabies vaccination［J］.Vet Record 2004，154:423 –426.

［6］ Lorna J K，Mark L，et al.Factors influencing the antibody response of dogs vaccinated against rabies［J］.Vaccine，2007，25:8500–8507.

［7］ Ovsyannikova I G，Jacobson R M，Ryan JE，et al.HLA class II alleles and measles virus－specific cytokine immune responsefollowing two doses of measles vaccine［J］.Immunogenetics，2005，56:798－807.

［8］ 史衛(wèi)軍，嚴(yán)燕.入境伴侶動物檢疫監(jiān)管存在問題及對策［J］.中國動物檢疫，2009，26(9):64 －65.

［9］ Nicholas J，Adam FC，et al.The immune response to rabies virus infection and vaccination［J］.Vaccine，2010，28:3896 –3901.