趙俊蘋(píng) 塔 娜 侯 敏

(1.呼和浩特市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020;2.內(nèi)蒙古食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020)

芯芭收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》蒙藥分冊(cè)［1］。根據(jù)“2009～2010年度國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高工作科研立項(xiàng)綜合意見(jiàn)單”增修訂內(nèi)容的要求，通過(guò)查閱有關(guān)文獻(xiàn)［2］，對(duì)芯芭中所含木犀草素進(jìn)行了含量測(cè)定研究，參照《中國(guó)藥典》2010年版一部［3］“北劉寄奴”項(xiàng)下的含量測(cè)定方法，以木犀草素作為指標(biāo)成分，進(jìn)行含量測(cè)定方法研究，經(jīng)分析方法驗(yàn)證，該方法重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，得到了比較滿意的分析結(jié)果。

1 儀器與試藥

1.1 儀器:島津 LC－20泵，CBM－20A型控制器，SPDM20A型檢測(cè)器，LC－Solution色譜工作站。

1.2 試劑與試藥:木犀草素對(duì)照品(批號(hào)110823－200903，供含量測(cè)定用)中國(guó)藥品生物制品檢定所;芯芭由錫盟蒙藥研究所提供。甲醇為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

2.1.1 色譜柱:色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，本實(shí)驗(yàn)研究采用 ALLtima HP C18柱 (4.6×250mm)。流動(dòng)相:乙睛 －0.3%磷酸(30∶70)，流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):347nm;理論板數(shù)按木犀草素峰計(jì)不得低于4000。

2.1.2 供試品溶液的制備:取本品粉末(過(guò)二號(hào)篩)約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率500W，頻率40KHz)50min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 對(duì)照品溶液的制備:取木犀草素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含8μg的溶液，即得。

2.1.4 陰性對(duì)照試驗(yàn):按 2.1.2 與 2.1.3 項(xiàng)下的方法制備供試品溶液和對(duì)照品溶液。分別精密吸取甲醇空白溶液、對(duì)照品溶液、供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，測(cè)得結(jié)果為:空白溶液色譜圖中在與木犀草素對(duì)照品以及供試品色譜圖相對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間處無(wú)色譜峰出現(xiàn)，表明處方中其它組分對(duì)木犀草素的測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖(1、2、3)。

2.1.5 線性關(guān)系考察:精密稱取木犀草素對(duì)照品約4.079mg，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。再精密吸取10mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。(木犀草素 8.158μg·mL－1)分別取 1、2、5、10、15、20μL 進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定，以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果木犀草素在8.158～163.16ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。回歸方程為y=4306.6x－711.79;r=1。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) :取同一份供試品溶液，分別在0、2、6、10、12h進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明木犀草素在12h內(nèi)的面積積分值基本穩(wěn)定不變，RSD為0.47%。

2.1.7 重復(fù)性試驗(yàn) :取同一批樣品6份，各取粉末(過(guò)三號(hào)篩)約1g，測(cè)定每份樣品含量，按外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果平均含量為0.0205%，RSD為0.71%。

2.1.8 加樣回收試驗(yàn):取供試品(含量 0.205mg·g－1)6份，各約0.5g，精密稱定，置6個(gè)具塞錐形瓶中，分別依次精密加入木犀草素對(duì)照品溶液(木犀草素0.0512)2.0mL，再分別精密加甲醇使成25mL，搖勻，按2.1.3項(xiàng)下方法操作，測(cè)定每份含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 木犀草素加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

2.1.9 樣品含量測(cè)定:兩批樣品的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品中木犀草素含量測(cè)定結(jié)果

圖1 陰性對(duì)照色譜圖

圖2 對(duì)照品色譜圖

圖3 樣品色譜圖

3 討論

檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇:精密稱取木犀草素對(duì)照品適量，用甲醇制成每1mL含25μg的溶液，通過(guò)島津SPD－M20A型二極管陣列檢測(cè)器對(duì)木犀草素自200～400nm波長(zhǎng)范圍掃描。結(jié)果木犀草素在347nm處有最大吸收。結(jié)合《中國(guó)藥典》2010年版一部“北劉寄奴”藥材項(xiàng)下含量測(cè)定方法，選擇347nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊(cè)［S］.1998·18

［2］常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析手冊(cè)［下冊(cè)］［M］.學(xué)苑出版社，2002·1528

［3］國(guó)家藥典委員會(huì)·中國(guó)藥典［S］.中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010，91