麥 妙， 符天曉

(海南省藥品檢驗所三亞分所， 海南 三亞 572000)

剖析2010年版中國藥典中明膠空心膠囊中鉻的測定

麥 妙， 符天曉

(海南省藥品檢驗所三亞分所， 海南 三亞 572000)

目的:選擇適合2010年版藥典中藥用明膠空心膠囊中微量鉻測定的常規(guī)分析方法。在沒有任何基體改進(jìn)劑的條件下，采用微波消解和石墨爐原子吸收法，測量時扣除背景方式測定空心膠囊中的微量鉻，經(jīng)過常規(guī)方法剖析，確定適合、快速、簡便、準(zhǔn)確的方法。方法:采用島津AA-7000原子吸收分光光度計，配石墨爐原子化器GFA-7000和自動進(jìn)樣器ASC-7000，結(jié)合微波消解儀，采用空心陰極燈:鉻，氮所壓力為0.35Mpa，以鉻標(biāo)準(zhǔn)液制梯度濃度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果:吸收值與濃度線性關(guān)系良好，鉻的平均回收率為100.8%，RSD為2.9%。結(jié)論:該法簡便快速，靈敏度高，重復(fù)性好。

石墨爐; 原子吸收分光光度法; 微波消解程序; 鉻; 含量檢測

“藍(lán)礬皮”是經(jīng)過重金屬鞣制的皮革下腳料，六價鉻離子含量較高。Cr6+是鉻離子中毒性最大的一種，容易進(jìn)入細(xì)胞，并還原為三價鉻，產(chǎn)生中間體五價鉻和活性自由基，造成對DNA的損傷，對呼吸道、消化道有刺激;對肝腎有明顯的損傷，損傷程度與鉻離子含量有關(guān);有顯著的致癌、致畸、生殖毒性。由于常規(guī)方法無法去除藍(lán)礬皮中的六價鉻離子，因此，我國醫(yī)藥包裝協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)對空心膠囊鉻含量的限定，是限制空心膠囊使用此類劣質(zhì)明膠的有效途徑。三價鉻是人體新陳代謝必需的，六價鉻的毒性比三價鉻大。但有研究表明，在急、慢性呼吸接觸三價鉻后，人體出現(xiàn)的咳嗽、哮喘等看起來與接觸六價鉻的癥狀很相似性，環(huán)境中低濃度的鉻就會引起亞急性慢生中毒，為了防止鉻的污染及其用鞣革制過的皮制取明膠且用于空心膠囊的生產(chǎn)，應(yīng)嚴(yán)格檢測控制鉻鹽的含量，新版中國藥典2010年制定了明膠空心膠囊的鉻含量，以降低我國空心膠囊的安全風(fēng)險。

1 資料與方法

1.1 藥典方法:取本品0.5g置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸5-10mL，混勻，浸泡過夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解。消解完全后，取消解罐內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用2%硝酸轉(zhuǎn)移到50mL量瓶中，并用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法制備試劑空白溶液;另取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用2%硝酸稀釋制成每1mL含鉻1.0ug的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸稀釋制成每1mL含鉻0-80ng的對照品溶液。取供試品溶液與對照品溶液，以石墨爐為原子化器，在357.9nm的波長處測定［1］。

1.2 所用儀器為:島津AA-7000原子吸收分光光度計，配石黑爐原子化器GFA-7000和自動進(jìn)樣器ASC-7000;微波消解儀為 WX-4000配6個高溫聚四氟乙烯消解罐，上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司;所用水為超純水，控溫電熱板EH20B型，美國LabTech公司;空心陰極燈:鉻，北京曙光明電子光源儀器有限公司;載氣:99.999%高純氬氣;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):鉻(唯一標(biāo)識:11201)標(biāo)準(zhǔn)液，濃度為1mg/mL，來源于國家有色金屬及電子材料分析測試中心。

1.3 儀器條件:鉻空心陰極燈;測定波長357.9nm;狹縫為0.7nm;燈電流10mA;氘燈背景校正方式，氘燈燈電流10mA;峰高積分方式;增益電壓280V;石黑爐工作條件;橫向加熱方式，氬氣壓力0.5Mpa;第一升溫階段150℃，升溫設(shè)置時間時間為20s;第二升溫階段250℃，升溫設(shè)置時間時間為 10s;第三升溫階段800℃，升溫設(shè)置時間時間為 10s;第四升溫階段800℃，升溫設(shè)置時間時間為 10s;第五升溫階段800℃，升溫設(shè)置時間時間為 3s;第六升溫階段2300℃，升溫設(shè)置時間時間為2s。第七升溫階段2500℃，升溫設(shè)置時間時間為2s;

1.4 方法摸索:樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:按照藥典標(biāo)準(zhǔn)的限度規(guī)定為不得過百萬分之二，樣品按最大限度進(jìn)行50倍的稀釋，含鉻約為20ng/mL，為讓測定值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍上，鉻標(biāo)準(zhǔn)液分別稀釋濃度為5、10、20、30、40ng/mL，結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)鉻測定吸收值均為超過1.0，且吸收值不穩(wěn)定，經(jīng)過100倍、200倍級稀釋驗證，吸收值在200倍稀釋時的吸收值較穩(wěn)定，為讓測定值能在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍上，鉻標(biāo)準(zhǔn)液也需適當(dāng)調(diào)整，明膠空心膠囊消解過程也有很大的影響，消解過程按儀器說明書上的蛋白質(zhì)類樣品的消解條件進(jìn)行消解，條件中溫度和時間對消解是否完全起決定的作用，消解不完全，測定鉻含量超標(biāo)，經(jīng)過多次消解處理，摸索了較適合的消解方法，選擇以下消解方法［3］，見表1。

表1 微波消解程序

消解過程，應(yīng)在低溫保持時間設(shè)定多一些，以防溫度聚升，壓力過高，經(jīng)過以上消解步驟后，樣品徹底消解完畢，消解完全后置電熱板(或相當(dāng)?shù)募訜嵫b置)上加熱趕去硝酸至近干(約1-2mL)，用2%硝酸溶液清洗并定容至200mL容量瓶中，直接稀釋至刻度，即為樣品溶液，由于有少量沉淀，應(yīng)靜置后，取上消液測定，以防濾紙的吸附作用影響測定結(jié)果，最好不用濾紙過濾，當(dāng)測定結(jié)果超出標(biāo)準(zhǔn)曲線時，適當(dāng)多增加標(biāo)準(zhǔn)曲線點。

2 結(jié)果

2.1 供試品制備方法:取空心膠囊樣品0.5g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸8mL，放入微波消解儀上述消解條件的程序，消解結(jié)束后用約3mL的2%的硝酸清洗消解罐體上部和蓋內(nèi)壁，合并于消解罐體內(nèi)，置電熱板上加熱趕去硝酸至近干(約1-2mL)，再用2%硝酸轉(zhuǎn)移至200mL容量瓶中，并用2%硝酸稀釋到刻度，搖勻，靜置，取上清液作為供試品溶液，同法制備試劑空白溶液2份。

2.2 工作曲線的繪制:取鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000ug/mL)，用2%硝酸溶液稀釋成1 ug/mL作為鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每 1mL 含鉻為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ng/mL的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，吸取20ul注入石黑爐原子化器，以吸光度(A)為縱坐標(biāo)、濃度(C)為橫向坐標(biāo)繪制工作曲線。通過三次實驗結(jié)果，二次回歸方程如下①Abs=0.0095698Conc+0.0032977，r=0.9996②Abs=0.017211Conc+0.0032527，r=0.9998③Abs=0.014911Conc+0.010411，r=0.9997，結(jié)果表明吸收值與濃度線性關(guān)系良好。分別對上述濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液各測定3次的RSD值均小于3%［2，4］。

2.3 精密度與回收率測定 按2.1制備樣品溶液，于該樣品加入相當(dāng)于濃度 2.0、4.0、6.0ng/mL 的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述條件下測定平均回收率，并計算RSD，結(jié)果見表2。

表2 樣品加標(biāo)回收率(n=3)

由表2看出，測定方法回收率在100.0%-101.8%之間，RSD在2.7%-3.2%之間，說明方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度。

3 討論

3.1 溶液的吸收一般都符合Lamber-Beer定律，原子吸收石黑爐法測定要經(jīng)過樣品干燥、灰化、原子化等過程，一般情況下符合線性回歸的相關(guān)系數(shù)較低。為了使測定結(jié)果更準(zhǔn)確，現(xiàn)在的儀器軟件都具有曲線擬合的功能，以減少誤差，提高準(zhǔn)確度，故本文采用一元二次方程進(jìn)行曲線擬合。

3.2 采用石墨爐原子吸收法測定膠囊或明膠中鉻的含量，準(zhǔn)確可靠，為保證公眾用藥的安全有效打下了基礎(chǔ)。

參與文獻(xiàn):

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.(二部)北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.1204-1205.

［2］ 張秀堯.爐內(nèi)消化石墨爐原子吸收法測定明膠和水解蛋白中鉻［J］.中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2005，39(5):

［3］ 黃輝，李本濤，邵鴻飛.微波消解-石墨爐原子吸收光譜法測定膠囊中的痕量鉻［J］.化學(xué)分析計量，2011，20(3):30-32.

［4］ 黃為權(quán)，談桂權(quán).石墨爐原子吸收法直接測定人尿中痕量鉻的研究［J］.中華醫(yī)學(xué)實踐雜志，2005，4(10):45-46.

Pharmacopoeia 2010 Edition of the Hollow Gelatin Capsules in the Determination of Chromium

MAI Miao，F(xiàn)U Tianxiao
(Sanya Branch of Hainan Institute for Drug Control，Hainan Sanya572000，China)

Objective:To choose the methods of the 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia gelatin capsule with the determination of trace chromium conventional.In the absence of any base modifier under the conditions of microwave digestion and graphite furnace atomic absorption spectrometry，measuring less background mode determination of trace chromium hollow capsules through conventional methods of analysis to determine the proper，fast，easy and accurate method.Method:Uses the island Tianjin AA-7000 atom absorption spectrophotometer，matches graphite oven atomization GFA-7000 and automatic sample injector ASC-7000，and union microwave resolution meter，hollow cathode lamp was used the:The chromium，the nitrogen pressure is 0.35Mpa，by chromium standard fluid system gradient density manufacture standard curve.Result:The absorption value and the density linearity relations is good，the chromium average returns-ratio is 100.8%，RSD is 2.9%.Conclusion:This law is simple and fast，the sensitivity is high，the duplication is good.

Graphite furnace;Atomic absorption spectrophotometry; Microwave digestion procedure;Chromium;Content detection

B

10.3969/j.issn.1006-6233.2012.08.075

1006-6233(2012)08-1184-03