麥 妙， 符天曉

(海南省藥品檢驗(yàn)所三亞分所， 海南 三亞 572000)

剖析2010年版中國(guó)藥典中明膠空心膠囊中鉻的測(cè)定

麥 妙， 符天曉

(海南省藥品檢驗(yàn)所三亞分所， 海南 三亞 572000)

目的:選擇適合2010年版藥典中藥用明膠空心膠囊中微量鉻測(cè)定的常規(guī)分析方法。在沒(méi)有任何基體改進(jìn)劑的條件下，采用微波消解和石墨爐原子吸收法，測(cè)量時(shí)扣除背景方式測(cè)定空心膠囊中的微量鉻，經(jīng)過(guò)常規(guī)方法剖析，確定適合、快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的方法。方法:采用島津AA-7000原子吸收分光光度計(jì)，配石墨爐原子化器GFA-7000和自動(dòng)進(jìn)樣器ASC-7000，結(jié)合微波消解儀，采用空心陰極燈:鉻，氮所壓力為0.35Mpa，以鉻標(biāo)準(zhǔn)液制梯度濃度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果:吸收值與濃度線性關(guān)系良好，鉻的平均回收率為100.8%，RSD為2.9%。結(jié)論:該法簡(jiǎn)便快速，靈敏度高，重復(fù)性好。

石墨爐; 原子吸收分光光度法; 微波消解程序; 鉻; 含量檢測(cè)

“藍(lán)礬皮”是經(jīng)過(guò)重金屬鞣制的皮革下腳料，六價(jià)鉻離子含量較高。Cr6+是鉻離子中毒性最大的一種，容易進(jìn)入細(xì)胞，并還原為三價(jià)鉻，產(chǎn)生中間體五價(jià)鉻和活性自由基，造成對(duì)DNA的損傷，對(duì)呼吸道、消化道有刺激;對(duì)肝腎有明顯的損傷，損傷程度與鉻離子含量有關(guān);有顯著的致癌、致畸、生殖毒性。由于常規(guī)方法無(wú)法去除藍(lán)礬皮中的六價(jià)鉻離子，因此，我國(guó)醫(yī)藥包裝協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)空心膠囊鉻含量的限定，是限制空心膠囊使用此類劣質(zhì)明膠的有效途徑。三價(jià)鉻是人體新陳代謝必需的，六價(jià)鉻的毒性比三價(jià)鉻大。但有研究表明，在急、慢性呼吸接觸三價(jià)鉻后，人體出現(xiàn)的咳嗽、哮喘等看起來(lái)與接觸六價(jià)鉻的癥狀很相似性，環(huán)境中低濃度的鉻就會(huì)引起亞急性慢生中毒，為了防止鉻的污染及其用鞣革制過(guò)的皮制取明膠且用于空心膠囊的生產(chǎn)，應(yīng)嚴(yán)格檢測(cè)控制鉻鹽的含量，新版中國(guó)藥典2010年制定了明膠空心膠囊的鉻含量，以降低我國(guó)空心膠囊的安全風(fēng)險(xiǎn)。

1 資料與方法

1.1 藥典方法:取本品0.5g置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸5-10mL，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解。消解完全后，取消解罐內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用2%硝酸轉(zhuǎn)移到50mL量瓶中，并用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法制備試劑空白溶液;另取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用2%硝酸稀釋制成每1mL含鉻1.0ug的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時(shí)，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸稀釋制成每1mL含鉻0-80ng的對(duì)照品溶液。取供試品溶液與對(duì)照品溶液，以石墨爐為原子化器，在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)定［1］。

1.2 所用儀器為:島津AA-7000原子吸收分光光度計(jì)，配石黑爐原子化器GFA-7000和自動(dòng)進(jìn)樣器ASC-7000;微波消解儀為 WX-4000配6個(gè)高溫聚四氟乙烯消解罐，上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司;所用水為超純水，控溫電熱板EH20B型，美國(guó)LabTech公司;空心陰極燈:鉻，北京曙光明電子光源儀器有限公司;載氣:99.999%高純氬氣;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):鉻(唯一標(biāo)識(shí):11201)標(biāo)準(zhǔn)液，濃度為1mg/mL，來(lái)源于國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心。

1.3 儀器條件:鉻空心陰極燈;測(cè)定波長(zhǎng)357.9nm;狹縫為0.7nm;燈電流10mA;氘燈背景校正方式，氘燈燈電流10mA;峰高積分方式;增益電壓280V;石黑爐工作條件;橫向加熱方式，氬氣壓力0.5Mpa;第一升溫階段150℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為20s;第二升溫階段250℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為 10s;第三升溫階段800℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為 10s;第四升溫階段800℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為 10s;第五升溫階段800℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為 3s;第六升溫階段2300℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為2s。第七升溫階段2500℃，升溫設(shè)置時(shí)間時(shí)間為2s;

1.4 方法摸索:樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:按照藥典標(biāo)準(zhǔn)的限度規(guī)定為不得過(guò)百萬(wàn)分之二，樣品按最大限度進(jìn)行50倍的稀釋，含鉻約為20ng/mL，為讓測(cè)定值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍上，鉻標(biāo)準(zhǔn)液分別稀釋濃度為5、10、20、30、40ng/mL，結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)鉻測(cè)定吸收值均為超過(guò)1.0，且吸收值不穩(wěn)定，經(jīng)過(guò)100倍、200倍級(jí)稀釋驗(yàn)證，吸收值在200倍稀釋時(shí)的吸收值較穩(wěn)定，為讓測(cè)定值能在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍上，鉻標(biāo)準(zhǔn)液也需適當(dāng)調(diào)整，明膠空心膠囊消解過(guò)程也有很大的影響，消解過(guò)程按儀器說(shuō)明書(shū)上的蛋白質(zhì)類樣品的消解條件進(jìn)行消解，條件中溫度和時(shí)間對(duì)消解是否完全起決定的作用，消解不完全，測(cè)定鉻含量超標(biāo)，經(jīng)過(guò)多次消解處理，摸索了較適合的消解方法，選擇以下消解方法［3］，見(jiàn)表1。

表1 微波消解程序

消解過(guò)程，應(yīng)在低溫保持時(shí)間設(shè)定多一些，以防溫度聚升，壓力過(guò)高，經(jīng)過(guò)以上消解步驟后，樣品徹底消解完畢，消解完全后置電熱板(或相當(dāng)?shù)募訜嵫b置)上加熱趕去硝酸至近干(約1-2mL)，用2%硝酸溶液清洗并定容至200mL容量瓶中，直接稀釋至刻度，即為樣品溶液，由于有少量沉淀，應(yīng)靜置后，取上消液測(cè)定，以防濾紙的吸附作用影響測(cè)定結(jié)果，最好不用濾紙過(guò)濾，當(dāng)測(cè)定結(jié)果超出標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，適當(dāng)多增加標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)。

2 結(jié)果

2.1 供試品制備方法:取空心膠囊樣品0.5g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸8mL，放入微波消解儀上述消解條件的程序，消解結(jié)束后用約3mL的2%的硝酸清洗消解罐體上部和蓋內(nèi)壁，合并于消解罐體內(nèi)，置電熱板上加熱趕去硝酸至近干(約1-2mL)，再用2%硝酸轉(zhuǎn)移至200mL容量瓶中，并用2%硝酸稀釋到刻度，搖勻，靜置，取上清液作為供試品溶液，同法制備試劑空白溶液2份。

2.2 工作曲線的繪制:取鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000ug/mL)，用2%硝酸溶液稀釋成1 ug/mL作為鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時(shí)，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每 1mL 含鉻為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ng/mL的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，吸取20ul注入石黑爐原子化器，以吸光度(A)為縱坐標(biāo)、濃度(C)為橫向坐標(biāo)繪制工作曲線。通過(guò)三次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，二次回歸方程如下①Abs=0.0095698Conc+0.0032977，r=0.9996②Abs=0.017211Conc+0.0032527，r=0.9998③Abs=0.014911Conc+0.010411，r=0.9997，結(jié)果表明吸收值與濃度線性關(guān)系良好。分別對(duì)上述濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液各測(cè)定3次的RSD值均小于3%［2，4］。

2.3 精密度與回收率測(cè)定 按2.1制備樣品溶液，于該樣品加入相當(dāng)于濃度 2.0、4.0、6.0ng/mL 的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述條件下測(cè)定平均回收率，并計(jì)算RSD，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品加標(biāo)回收率(n=3)

由表2看出，測(cè)定方法回收率在100.0%-101.8%之間，RSD在2.7%-3.2%之間，說(shuō)明方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度。

3 討論

3.1 溶液的吸收一般都符合Lamber-Beer定律，原子吸收石黑爐法測(cè)定要經(jīng)過(guò)樣品干燥、灰化、原子化等過(guò)程，一般情況下符合線性回歸的相關(guān)系數(shù)較低。為了使測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確，現(xiàn)在的儀器軟件都具有曲線擬合的功能，以減少誤差，提高準(zhǔn)確度，故本文采用一元二次方程進(jìn)行曲線擬合。

3.2 采用石墨爐原子吸收法測(cè)定膠囊或明膠中鉻的含量，準(zhǔn)確可靠，為保證公眾用藥的安全有效打下了基礎(chǔ)。

參與文獻(xiàn):

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.(二部)北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.1204-1205.

［2］ 張秀堯.爐內(nèi)消化石墨爐原子吸收法測(cè)定明膠和水解蛋白中鉻［J］.中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2005，39(5):

［3］ 黃輝，李本濤，邵鴻飛.微波消解-石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定膠囊中的痕量鉻［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2011，20(3):30-32.

［4］ 黃為權(quán)，談桂權(quán).石墨爐原子吸收法直接測(cè)定人尿中痕量鉻的研究［J］.中華醫(yī)學(xué)實(shí)踐雜志，2005，4(10):45-46.

Pharmacopoeia 2010 Edition of the Hollow Gelatin Capsules in the Determination of Chromium

MAI Miao，F(xiàn)U Tianxiao
(Sanya Branch of Hainan Institute for Drug Control，Hainan Sanya572000，China)

Objective:To choose the methods of the 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia gelatin capsule with the determination of trace chromium conventional.In the absence of any base modifier under the conditions of microwave digestion and graphite furnace atomic absorption spectrometry，measuring less background mode determination of trace chromium hollow capsules through conventional methods of analysis to determine the proper，fast，easy and accurate method.Method:Uses the island Tianjin AA-7000 atom absorption spectrophotometer，matches graphite oven atomization GFA-7000 and automatic sample injector ASC-7000，and union microwave resolution meter，hollow cathode lamp was used the:The chromium，the nitrogen pressure is 0.35Mpa，by chromium standard fluid system gradient density manufacture standard curve.Result:The absorption value and the density linearity relations is good，the chromium average returns-ratio is 100.8%，RSD is 2.9%.Conclusion:This law is simple and fast，the sensitivity is high，the duplication is good.

Graphite furnace;Atomic absorption spectrophotometry; Microwave digestion procedure;Chromium;Content detection

B

10.3969/j.issn.1006-6233.2012.08.075

1006-6233(2012)08-1184-03