田建川 嚴世統(tǒng)

重慶市巫山縣人民醫(yī)院，重慶巫山 404700

新生兒缺氧缺血性腦病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是各種圍生期因素引起的缺氧和腦血流減少或暫停而導致胎兒和新生兒的腦損傷[1]，是引起新生兒死亡和慢性神經系統(tǒng)損傷的主要原因之一。HIE可誘導多種細胞因子和炎性介質釋放，如腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factorα，TNF-α）、hs-CRP、MMP-9[2]，但其具體機制仍不十分清楚。因此，筆者于2010年9月～2012年5月動態(tài)觀察了45例HIE患兒血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的變化，探討hs-CRP、TNF-α和MMP-9在HIE中的發(fā)病機制。現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2010年9月～2012年5月入院的45例HIE患兒，均符合HIE診斷依據和診斷標準[3]，男22例，女23例，出生體質量（3 125±79）g，胎齡（39.84±8.70）周；輕度 18 例，中度 12 例，重度15例。另選同期在本院產房出生的30例健康新生兒為正常對照組，男 17 例，女 13 例，出生體質量（3 098±80）g，胎齡（40.03±9.33）周；均無窒息、嚴重感染及神經系統(tǒng)疾病史。兩組患兒在性別﹑胎齡﹑出生體重等方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 標本采集與處理

HIE組入院后第1、3、7天清晨各抽靜脈血3 mL，健康對照組于出生后24 h抽靜脈血，立即分離血清后置-20℃冰箱保存待測。采用Quik Read速率免疫濁度法檢測CRP含量。血清TNF-α采用酶聯免疫（ELISA）法測定（深圳晶美有限公司）；血清MMP-9采用ELISA方法檢測（上海森雄科技實業(yè)有限公司試劑盒）。所有實驗具體操作方法嚴格按照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較

HIE組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平均較健康對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.01），以發(fā)病后3 d升高最為明顯，后逐漸下降。見表1。

表1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較（±s）

表1 兩組血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平比較（±s）

注：與正常對照組比較，*P<0.01；與 HIE組 1 d比較，#P<0.01；與HIE組3 d比較，△P<0.01

組別 例數（n）h s-C R P（m g/L）T N F-α（n g/m L）M M P-9（p g/m L）1 d H I E組 3 d 7 d正常對照組4 5 4 5 4 5 3 0 8.9 2±1.7 4*2 0.1 7±4.6 5#4.0 8±0.8 3#△0.9 3±0.1 8 1.1 5±0.2 3*1.8 7±0.3 5#0.8 4±0.1 6#△0.5 7±0.1 1 3 3.8 2±1.2 3*3 8.5 3±3.7 2#3 2.6 0±1.0 5#△2 8.7 1±1.1 8

2.2 發(fā)病后 3 d不同病情程度血清 hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較

HIE組重度患者血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平均較輕度和中度患者明顯升高（P<0.05）。見表2。

表2 發(fā)病后3 d不同病情程度血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較（±s）

表2 發(fā)病后3 d不同病情程度血清hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平的比較（±s）

注：與輕度比較，*P<0.01；與中度比較，#P<0.01

組別 例數（n） h s-C R P（m g/L） T N F-α（n g/m L） M M P-9 （p g/m L）輕度中度重度1 8 1 2 1 5 1 3.5 0±3.1 2 2 0.1 7±4.6 5*2 7.9 1±4.0 6#1.2 3±0.3 6 1.8 7±0.3 5*2.4 0±0.4 7#3 2.6 5±0.6 4 3 6.7 2±1.5 0*4 3.8 4±2.3 1#

3 討論

HIE是由于各種圍生期窒息引起的腦缺氧、缺血而導致新生兒急性死亡及遺留不同程度的神經系統(tǒng)后遺癥，其發(fā)病機制有：能量代謝障礙、細胞內鈣超載、興奮性氨基酸毒性作用、自由基的損傷和炎癥反應等。

炎癥反應是HIE患者缺氧缺血性腦損傷導致神經元凋亡和壞死的重要環(huán)節(jié)之一，其產生的多種免疫細胞及細胞因子均參與腦損傷的發(fā)生、發(fā)展及修復過程。hs-CRP、TNF-α和MMP-9都參與了HIE的病理生理過程，近年來其在腦缺血再灌注損傷過程中的作用越來越受到人們的關注。TNF-α可以誘導細胞死亡和引發(fā)炎癥反應[4]。大量研究表明，TNF-α在新生兒窒息及HIE等腦損傷性疾病中是上調的。血清TNF-α水平升高可能與腦損傷后膠質細胞破壞，腦水腫、缺氧缺血等刺激TNF-α表達及腦損傷后血腦屏障破壞，單核細胞、中性粒細胞進入腦并釋放TNF-α有關[5-6]。hs-CRP是一種非特異性急性時相蛋白，是炎性反應的敏感標志物。當組織損傷﹑缺血﹑缺氧時，其濃度急劇上升，hs-CRP水平是判斷組織損傷的較敏感指標[7]。MMPs（基質金屬蛋白）是降解ECM的蛋白酶類之一，其編碼基因具有同源性。近年來研究發(fā)現，腦缺血及再灌注損傷可誘導MMPs的表達，尤其是MMP-9和MMP-2增加更為顯著，其活性與腦血管通透性、血腦屏障通透性和腦水腫明顯相關。MMP-9可加重缺血腦組織毛細血管破壞，特別是血腦屏障微血管基底膜的破壞，上調的MMP-9通過降解細胞外基質導致腦微血管結構完整性破壞和血腦屏障損壞，造成繼發(fā)性腦水腫和腦損傷[8]。

本研究結果顯示，HIE患兒血清 hs-CRP、TNF-α和MMP-9水平明顯高于正常對照，且HIE組重度患者明顯高于輕度和中度患者。表明hs-CRP、TNF-α和MMP-9在HIE的發(fā)病中具有重要作用，可能參與了HIE的發(fā)生發(fā)展，但其機制有待于進一步闡明。

[1]劉克宇，張重梅，宋慶云，等.新生兒缺氧缺血性腦病血清IL-10、MCP-1 變化及臨床意義[J].疑難病雜志，2011，10（1）：13-15.

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[3]宮相翠.缺氧缺血性腦病新生兒血清白細胞介素6、腫瘤壞死因子α和可溶性細胞間黏附分子1的變化及意義[J].中國基層醫(yī)藥，2012，19（4）：545-546.

[4]Mountz JD，Edwards Ⅲ CK，Cheng J，et a1.Autoimmunity due to defective Nur77，Fas，and TNF-RI apoptosis[J].Adv Exp Med Biol，1996，406：241-262.

[5]李立仙，戴黎萌.缺血再灌注的免疫細胞與細胞因子[J].國外醫(yī)學·免疫學分冊，2000，23（3）：240.

[6]殷梅，黃如訊.腫瘤壞死因子-α與腦缺血再灌注損傷[J].國外醫(yī)學·腦血管疾病分冊，2000，8（3）：136.

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