虞喜豪 姜曉華 周炳榮 丁 姍

解放軍八五醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，上海 200052

副腫瘤神經(jīng)綜合征（paraneoplastic syndrome of the nerves system，PNSNS）主要是指在某些惡性腫瘤患者中出現(xiàn)的非腫瘤轉(zhuǎn)移所致的機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)及相關(guān)神經(jīng)肌肉系統(tǒng)出現(xiàn)的病變及相應(yīng)綜合征，其發(fā)生率在不同腫瘤及腫瘤類(lèi)型中均有不同。該癥多見(jiàn)于小細(xì)胞肺癌、乳腺瘤、淋巴瘤、婦科腫瘤、胰腺癌等，其中，以肺癌及卵巢癌略高。此癥雖總體發(fā)病率不高，但造成的神經(jīng)損害及出現(xiàn)的臨床表現(xiàn)往往較腫瘤本身更早。該癥發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，多數(shù)文獻(xiàn)表明可能與腫瘤相關(guān)抗原，與神經(jīng)系統(tǒng)的組織細(xì)胞抗原的交叉免疫原存在所致，與自身免疫反應(yīng)有關(guān)，其中，抗Hu、抗R1及抗CV2抗體等被認(rèn)為與PNSNS發(fā)病有較確切關(guān)聯(lián)。國(guó)內(nèi)相關(guān)檢測(cè)已有較多報(bào)道[1]，但方法及所用制劑多為自制，且不統(tǒng)一，不適宜臨床簡(jiǎn)捷常規(guī)使用。為此，筆者利用德國(guó)弗賴(lài)堡公司最新研發(fā)PNS抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)常見(jiàn)腫瘤患者且未明確出現(xiàn)相關(guān)神經(jīng)癥的患者血清予以測(cè)定，初步驗(yàn)證對(duì)臨床常見(jiàn)腫瘤患者可能潛在發(fā)生PNSNS的陽(yáng)性率及該項(xiàng)檢測(cè)在預(yù)測(cè)及篩查PNSNS中的價(jià)值意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年12月～2011年4月常規(guī)送檢的常見(jiàn)腫瘤患者5例，分別為肺癌、乳腺癌、直腸癌、胰腺癌、肝癌，其中，男性2例、女性3例，平均年齡61.2歲。所有診斷均經(jīng)影像學(xué)、血液學(xué)相關(guān)檢測(cè)及病理檢查予以確認(rèn)。

1.2 抗體采集

抽取患者靜脈血 3～5 mL，4 000 r/min離心15 min，取上清液、分裝置-80℃冰箱保存待檢。

1.3 檢測(cè)材料及方法

采用德國(guó)弗賴(lài)堡RAVD DIAGNOSTIKA公司提供PNSNS相關(guān)抗體檢測(cè)試劑盒，該試劑盒組成：（1）包被有重組抗原蛋白（HuD.Y0.R2 CV2，囊泡素及 Ma1.Ma2）醋酸纖維素條；（2）對(duì)照掃描樣本濃縮洗滌液、稀釋液；（3）即用型堿性磷酸酶交聯(lián)抗人 IgG及相關(guān)陽(yáng)性對(duì)照液；（4）底物溶液以及若干孵育管。

1.4 方法

按常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)醋酸纖維素膜免疫印跡法 （western blot）測(cè)定：每名患者血清稀釋度為1∶2 000，其中2例患者（為乳腺癌及肺癌）血清設(shè)復(fù)孔（雙條）（標(biāo)本血清稀釋度分別為1∶200及1∶2 000）。以標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照帶為參照，其分別為抗Y0、抗Hu、抗 R2 及 CV2、囊泡素，Ma1、Ma2。

2 結(jié)果

5例患者及對(duì)照共8份血清抗體分為1～8號(hào)測(cè)試條帶，其中，1號(hào)為陽(yáng)性對(duì)照（由起始線依次分別為抗Y0、抗Hu、抗R2 及 CV2、囊泡素，Ma1、Ma2 抗體顯示帶）。 2、3 號(hào)及 4、5 號(hào)條分別為兩不同患者不同稀釋度結(jié)果，6、7、8號(hào)條帶為另3名患者1∶2 000檢測(cè)結(jié)果。一患者標(biāo)本（4、5號(hào)條）抗CV2抗體雙帶均顯示陽(yáng)性。該患者為病理確認(rèn)的小細(xì)胞肺癌患者。另各陽(yáng)性對(duì)照顯示條清晰、準(zhǔn)確。具體測(cè)試結(jié)果見(jiàn)圖1。

3 討論

PNSNS是一類(lèi)既非腫瘤病灶直接侵襲壓迫產(chǎn)生，也非腫瘤灶造成的異位內(nèi)分泌、代謝紊亂、繼發(fā)感染，組織灌流障礙以及化放療所致、副反應(yīng)而產(chǎn)生的以中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)損害的疾病[1]。目前對(duì)于機(jī)體產(chǎn)生此癥的確切機(jī)制尚不完全清楚，但較一致的觀點(diǎn)為多類(lèi)特異抗神經(jīng)元的自身免疫性抗體（specific neuronal antibody，SNA）產(chǎn)生的自身免疫反應(yīng)在其中發(fā)揮重大作用[2]。PNSNS在惡性腫瘤的發(fā)病率約1%[3]，而在小細(xì)胞肺癌、卵巢癌等更多伴發(fā)PNSNS的腫瘤中比例可能更高[4]。相關(guān)免疫性抗體在腫瘤患者中的測(cè)定，不僅對(duì)于合理、準(zhǔn)確診斷患者PNSNS有重要意義，而且可以為盡早預(yù)防和必要干預(yù)PNSNS提供依據(jù)。國(guó)內(nèi)有學(xué)者研究報(bào)道[5]，相關(guān)特異神經(jīng)元抗體診斷PNSNS特異性可達(dá)72.5%，敏感度為95%。而采用PET-CT聯(lián)合檢測(cè),尤其在有其他腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性者中，可進(jìn)一步提高腫瘤檢出率[6]。在抗體測(cè)定陽(yáng)性患者中有近1/3存在多種抗體[7]，因此，不論是在已有PNS癥狀中去預(yù)測(cè)或發(fā)現(xiàn)潛在腫瘤的可能，或抑在已知腫瘤患者中通過(guò)測(cè)定特異抗體來(lái)反映出現(xiàn)PNSNS的概率，并指導(dǎo)診療等方面，都應(yīng)同時(shí)檢測(cè)多類(lèi)PNSNS相關(guān)抗體。本快檢試劑盒中纖維素條包被有多類(lèi)免疫原蛋白，高效、完備。神經(jīng)組織細(xì)胞是高度分化、保守的細(xì)胞，由于各種原因一旦受損嚴(yán)重或持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，出現(xiàn)不可逆損害則功能將難以修復(fù)。有報(bào)道表明，在確認(rèn)PNSNS患者中，雖經(jīng)必要抗腫瘤治療及免疫抑制治療，僅有約10%患者的神經(jīng)癥狀有較明好轉(zhuǎn)[8]。故PNS總體療效欠佳，其原因除機(jī)制可能尚存不清外，神經(jīng)細(xì)胞受自身免疫等因素?fù)p害已致不可逆損傷有關(guān)。所以，在腫瘤患者的診治中，除常規(guī)腫瘤的治療外，不應(yīng)忽視PNSNS及相關(guān)抗體測(cè)定，及時(shí)進(jìn)行干預(yù)性治療，不僅可緩解腫瘤患者的神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀，也是提高腫瘤患者的生存質(zhì)量、延長(zhǎng)生存期的重要舉措。

本文利用德國(guó)新近研發(fā)的PNSNS抗體檢測(cè)試劑盒，對(duì)幾種常見(jiàn)腫瘤患者血清進(jìn)行相關(guān)抗體初步測(cè)定，是基于上述原因的有益嘗試。結(jié)果顯示，5類(lèi)腫瘤中，有一小細(xì)胞肺癌患者（SCLC）檢測(cè)陽(yáng)性，該患者為男性，診斷為肺癌近5年，伴有肢體乏力、麻木、陣發(fā)癲癇及腔隙性腦梗死等神經(jīng)系統(tǒng)損害病變及癥狀，測(cè)出抗體陽(yáng)性（為抗CV2）?？笴V2抗體是除抗Hu等抗體外最為常見(jiàn)PNSNS相關(guān)抗體，其對(duì)應(yīng)抗原（66KDa的CV2蛋白）位于神經(jīng)元胞漿，多見(jiàn)于少竇腦質(zhì)細(xì)胞、視網(wǎng)膜及視神經(jīng)細(xì)胞周?chē)窠?jīng)中。比較而言，SCLC存在PNSNS及自身神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)抗體可能概率較大，與已往報(bào)道一致[3-4]。由于測(cè)試制劑有限，選取患者數(shù)量較少，尚難得出準(zhǔn)確結(jié)論，待進(jìn)一步檢測(cè)統(tǒng)計(jì)。相信今后，在腫瘤患者中開(kāi)展PNSNS的診斷及相關(guān)抗體測(cè)定篩查，對(duì)腫瘤防治將是一項(xiàng)有價(jià)值工作。而且，使用此類(lèi)專(zhuān)用檢測(cè)試劑盒快速、便捷、實(shí)用性好。

[1]王彬，查建平.副腫瘤性小腦病變與抗神經(jīng)元抗體關(guān)系[J].神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生，2010，10（1）：44-46.

[2]劉馨.副腫瘤綜合癥的最新進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·老年醫(yī)學(xué)分冊(cè)，2008，29（2）：86-90.

[3]王剛，陳齊鳴，祝延，等.特異神經(jīng)元抗體對(duì)小細(xì)胞肺癌早期診斷價(jià)值的初步研究[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，37（5）：338.

[4]徐杰玉.神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合癥10例[J].腫瘤研究與臨床，2011，23（9）：636-638.

[5]王剛，陳齊鳴，朱莉，等.特異性神經(jīng)元抗體對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合癥篩檢價(jià)值的研究[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志，2004，30（3）：165-168.

[6]關(guān)志偉，徐白萱，王瑞民，等.18F-FDG PET-CT檢測(cè)神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合癥疑似患者惡性腫瘤應(yīng)用價(jià)值[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2011，10（1）：88-89.

[7]Pittock SJ，kryzer TJ，Lennon UA.Paraneoplastic antibodies coexist and predict cancer，not neurological syndrome[J].Ann Neurol，2004，56：715-719.

[8]Vernino S，O′N(xiāo)eill BP，Marks RS，et al.Immunomodulatory treatment trial for paraneoplastic neurological disorders[J].Neuro Oncology 2003，6（1）：55-62.