吳德明 董茂臣 唐文君

(哈爾濱華瑞生化藥業(yè)有限責(zé)任公司·150001）

乙肝扶正膠囊補(bǔ)肝腎，益氣活血。用于乙型肝炎，辨證屬于肝腎兩虛證候。臨床表現(xiàn)為：肝區(qū)隱痛不適，全身乏力，腰膝酸軟，氣短心悸，自汗、頭暈、納少，舌淡，脈弱。其現(xiàn)行中藥部頒標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定含量測定項(xiàng)目，為了更好的控制該品的質(zhì)量，本文采用高效液相色譜法建立了乙肝扶正膠囊中主要成分丹參酮IIA的含量，該方法簡便、快速、靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于該品的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：美國Watets6000E 高效液相色譜儀，Brebz、MillenRidm32 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。電子分析天平AB204：梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。甲醇為色譜純，其它為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

YWG—C18ODS反相柱(4.6mm*200mm)，粒度5um；流動(dòng)相：甲醇水(75：25)；檢測波長為270nm；流速1.Oml/min。理論板數(shù)按丹參酮IIA，峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。出峰時(shí)間17～21min左右。

2.2 供試品溶液的制備

取乙肝扶正疫囊20 粒，傾出內(nèi)容物，混勻，取約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚適量提取3 小時(shí)至溶液無色，將提取液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，溶液轉(zhuǎn)移至25ml 量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取丹參酮IIA，對照品5mg，置100m1量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，精密吸取10ml，置50ml 量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 線性關(guān)系

取丹參酮IIA，對照品約30mg，精密稱定，置50ml 量瓶中，加甲醇適量溶解，并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取lml、2ml、3ml、4ml、5m1 分別置lOml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)樣10u1 測定，以濃度C(ug/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積A（uv.s)為縱坐標(biāo)，求回歸方程，丹參酮IIA，在0.06ug/ml～0.3ug/ml范圍內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為A=3790063.3C+72702 崐(r=0.9997)，見表1。

表1 丹參酮IIA 線性關(guān)系考察表

2.5 精密度試驗(yàn)

取同一供試品溶液，重復(fù)測定6 次。測得丹參酮IIA，積分值RSD=1.3%

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別在0h、1h、2h、3h、4h 測定， RSD=2.2%

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)。

取同一批樣品6 份測定含量，計(jì)算重現(xiàn)性，結(jié)果：RSD=1.2%。

2.8 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品0.5g，按供試品溶液制備方法制備溶液，再分別加入已配制好的丹參酮IIA 對照品溶液(0.259mg/m1)，混勻。再按本文色譜條件下測得丹參酮IIA 的平均回收率為100.1%，測得精密度RSD=1.65%。見表2。

表2 回收率試驗(yàn)(n=2)

2.9 乙肝扶正膠囊含量測定結(jié)果取乙肝扶正膠囊五批樣按2.1 色譜條件測定。丹參酮IIA的平均含量每粒不得低于0.06mg/粒。

3 討論

（1）根據(jù)對乙肝扶正膠囊五批含量測定結(jié)果，每粒中含丹參酮IIA，為0.075 mg/?！?.084mg/粒之間，因此在質(zhì)量控制中，確定本品每粒中丹參酮IIA，含量應(yīng)不低于0.06mg/粒。

（2）通過對高效液相色譜法測定乙肝扶正膠囊中丹參酮IIA，含量的研究，證明本方法可行，可以更好的控制該品的質(zhì)量，填補(bǔ)了部頒標(biāo)準(zhǔn)中無含量測定指標(biāo)的空白。采用本文方法簡便、快速、靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于該品的質(zhì)量控制。

[1］中國藥典2010 版一部.中國醫(yī)藥科技出版社.

[2］王寶琴.中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究.中國醫(yī)藥科技出版社，1994.

[3］陳發(fā)奎,等.常用中草藥有效成分含量測定.人民衛(wèi)生出版，1997.