溫如玉，鄭巧靈

（1.南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，南昌 330006；2.江西省衛(wèi)生學(xué)校婦產(chǎn)科教研室，南昌 330000）

卵巢癌是婦科腫瘤中病死率最高的疾病。其發(fā)病率及病死率呈上升趨勢，雖然臨床上應(yīng)用了各種治療方法，但效果卻不盡理想，究其原因在于卵巢癌早期診斷困難，多數(shù)病人發(fā)現(xiàn)時已經(jīng)晚期，發(fā)生了轉(zhuǎn)移，預(yù)后差。因此對卵巢癌發(fā)生發(fā)展機制的研究成為目前研究的熱點。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞間的黏附作用是建立和維持細(xì)胞正常形態(tài)和功能的基礎(chǔ)，其作用在包括胚胎形成、細(xì)胞極性的維持、細(xì)胞的生長分化以及癌變過程中擔(dān)當(dāng)重要的角色［1］。腫瘤的生長過程涉及黏附分子的表達(dá)變化，導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)破壞和腫瘤轉(zhuǎn)移［2］。E鈣黏蛋白－環(huán)連蛋白復(fù)合體（E－cad－cat）是黏附分子的重要成員，它由 E－鈣黏蛋白（E－cadherin，E－cad）和環(huán)連蛋白（α－catenin，α－cat；β－catenin，β－cat；γ－catenin，γ－cat）所組成，其組成成員的質(zhì)和量的改變都可能引起復(fù)合體的功能異常，導(dǎo)致細(xì)胞的脫離、堆積、去分化、侵襲和轉(zhuǎn)移，即形成惡性腫瘤［3］。很多學(xué)者綜合研究了該復(fù)合體中各分子變化的相互關(guān)系及它們與多種診斷參數(shù)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)E－cad－cat中各分子與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［3－4］。本研究就近年來 E－cad－cat與卵巢癌關(guān)系的研究進(jìn)展作一綜述。

1 E－cad－cat的構(gòu)成

E－cad是跨膜糖蛋白分子，其細(xì)胞外域通過Ca2＋依賴的嗜同種受體反應(yīng)介導(dǎo)細(xì)胞間黏附，使細(xì)胞內(nèi)域與β－cat或γ－cat結(jié)合，β－cat一端與 E－cad蛋白細(xì)胞質(zhì)域相連，一端與α－cat的氨基端結(jié)合，α－cat再與肌動蛋白細(xì)胞骨架相連，從而將E－cad、β－cat、γcat、α－cat與細(xì)胞骨架連接起來。E－cad－cat的形成過程是在E－cad穿膜時開始的，首先β－cat（γ－cat）和E－cad的胞內(nèi)肽段結(jié)合，然后在胞膜上α－cat與β－cat與β－cat（γ－cat）的氨基端結(jié)合而將 E－cad－cat復(fù)合體錨定在肌動蛋白細(xì)胞骨架上。細(xì)胞膜上與E－cad結(jié)合的β－cat可以和細(xì)胞漿內(nèi)的β－cat相互交換，這種交換形成一種平衡狀態(tài)，并由此調(diào)節(jié)同質(zhì)細(xì)胞之間的黏附作用［4］。E－cad－cat的黏附功能有賴于其完整性［3］。

2 細(xì)胞黏附的橋梁E－鈣黏蛋白

E－cad是Ⅰ型跨膜糖蛋白，主要分布于上皮細(xì)胞，其分子結(jié)構(gòu)主要包括胞內(nèi)段、跨膜段和胞外段。其基因CDH1位于16q 22.1，基因序列長達(dá)100 kb，含16個外顯子、15個內(nèi)含子，編碼蛋白含884個氨基酸，編碼蛋白相對分子量為124000。其胞外區(qū)由5個呈前后串聯(lián)重復(fù)的模體組成，最外側(cè)的模體所包含的組氨酸－丙氨酸－纈氨酸序列是E－cad發(fā)揮黏附功能所必需的，相鄰細(xì)胞E－cad的胞外域可相互結(jié)合形成拉鏈樣結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞黏附。Ca2＋結(jié)合區(qū)位于模體之間。其胞內(nèi)段均包含一個高度保守的結(jié)構(gòu)域，該段通過α－cat、β－cat及γ－cat與細(xì)胞架結(jié)合［5］。E－cad它是參于細(xì)胞之間黏附連接的主要分子，發(fā)揮著維持細(xì)胞極性以及組織結(jié)構(gòu)完整性的功能，它的抑癌作用主要是通過形成E－cad－cat復(fù)合體介導(dǎo)同質(zhì)細(xì)胞之間的相互黏附，抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲性，同時它競爭性地和β－cat結(jié)合，降低細(xì)胞內(nèi)游離型β－cat的水平。E－cad的表達(dá)減少可能與CDH1的基因病變、DNA的甲基化和轉(zhuǎn)錄抑制等有關(guān)［6］。

3 雙重功能的β－環(huán)連蛋白

β－cat是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可溶性蛋白，相對分子量為92000，其基因CTNNB1位于3p22，全長23.2kb，共有16個外顯子，第3外顯子含有編碼絲氨酸和蘇氨酸位點的序列，這些位點的磷酸化與去磷酸化對β－cat功能轉(zhuǎn)化起重要作用。β－cat是一種細(xì)胞黏附因子，也是WNT信號傳導(dǎo)途徑正向調(diào)節(jié)的重要效應(yīng)物。在正常細(xì)胞中，β－cat能與E－cad相連，也能與大腸腺瘤樣息肉蛋白（APC）復(fù)合物結(jié)合。當(dāng)WNT信號途徑失活時，游離的β－cat在APC多蛋白復(fù)合體中磷酸化，然后在β－Trcp、Skp1、Cul1等蛋白作用下與泛素結(jié)合，最終被26S蛋白酶體降解。當(dāng)WNT蛋白與其特異性受體結(jié)合激活WNT信號途徑時，就抑制了GSK－3β對β－cat的磷酸化，使游離的非磷酸化的β－cat增加，并進(jìn)入細(xì)胞核。在核內(nèi)蓄積的β－cat與 TCF／LEF（T cell factor／lymphoid enhancer factor）形成復(fù)合體，激活cyclinD1和myc等基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖［7］。而當(dāng)β－cat在細(xì)胞核內(nèi)異常蓄積活化基因時，β－cat就成了癌基因［8］。胞漿內(nèi)β－cat存在結(jié)合型和游離型兩種形式，兩者之間保持動態(tài)平衡，調(diào)節(jié)細(xì)胞對黏附或增殖信號的反應(yīng)。當(dāng)結(jié)合型β－cat比例增多時，β－cat則與 E－cad形成復(fù)合體，細(xì)胞黏附功能增加；當(dāng)游離型β－cat比例增多時，β－cat則在胞漿中聚集、易位至細(xì)胞核同，產(chǎn)生與原癌基因Wnt相同的表型，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生、細(xì)胞增殖、遷移甚至死亡。

4 α－cat和γ－cat

α－cat的相對分子量為102000，其基因CTNNA1位于5q3.1，作用是將α－cat與肌動蛋白微絲連接起來。目前認(rèn)為CTNNA1是一種抑癌基因，也是一種侵襲抑制基因。α－cat是E－cad－cat的錨定成分，對復(fù)合體的穩(wěn)定和功能是必需的，沒有α－cat表達(dá)的腫瘤細(xì)胞不能緊密聚集，并具侵襲表型［9］。γ－cat是一種與β－cat非常相似的多功能蛋白，為一種非糖蛋白，相對分子量為80000，基因位于17q21上，具有介導(dǎo)細(xì)胞間黏附與信號傳導(dǎo)兩大功能，能單獨與E－cad結(jié)合，可以使E－cad集中定位于細(xì)胞與細(xì)胞間的接觸部位，從而介導(dǎo)同種細(xì)胞間的連接和維持細(xì)胞的極性。當(dāng)細(xì)胞移動時，γ－cat必須首先脫離E－cad－cat復(fù)合體，復(fù)合體才能解聚。γ－cat的過度表達(dá)還能激活TCF／LEF介導(dǎo)的癌基因轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)腫瘤形成，但同時也有抑制腫瘤的作用［10］。γ－cat緩沖β－cat的活動，在生理狀態(tài)下達(dá)到一種平衡［11］。

E－cad－cat作為一個整體，在細(xì)胞間黏附、建立細(xì)胞極性、維持組織形態(tài)中起重要作用，而且參與細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。生理狀態(tài)時，E－cad－cat為適應(yīng)機體的生理需要相應(yīng)地上調(diào)或下調(diào)，維持上皮細(xì)胞衰老、凋亡與再生、修復(fù)之間的動態(tài)平衡。上皮細(xì)胞內(nèi)E－cad過度表達(dá)能抑制細(xì)胞的游走與增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；E－cad過度表達(dá)下調(diào)則使細(xì)胞連接松散，刺激細(xì)胞的再生游走，有利于組織修復(fù)，這種調(diào)節(jié)維持了上皮細(xì)胞的正常功能。病理狀態(tài)時，如炎癥或損傷后，多種細(xì)胞因子如EGF、HGF、TGF－a等能使上皮細(xì)胞內(nèi)E－cad－cat或與之間相連的骨架蛋白發(fā)生酪氨酸磷酸化，導(dǎo)致E－cad不能與環(huán)連蛋白連接或E－cad－cat不能與細(xì)胞骨架相互作用，使E－cad不能定位于膜上，被胞漿內(nèi)蛋白酶降解，失去細(xì)胞黏附能力，細(xì)胞間連接松散，黏附力下降，這有利于增殖信號的傳導(dǎo)，細(xì)胞分裂增殖能力增強，上皮細(xì)胞發(fā)生再生，組織得以修復(fù)。腫瘤組織中E－cad－cat常出現(xiàn)破壞或丟失的現(xiàn)象，導(dǎo)致細(xì)胞間黏附的丟失，有利于惡性細(xì)胞的脫離、侵襲和轉(zhuǎn)移。其中一種分子的變化有可能引起其他分子的變化，有學(xué)者綜合研究了該復(fù)合體中各分子變化的相互關(guān)系及它們與多種診斷參數(shù)的關(guān)系。S.C.Lim等［8］用免疫組化方法研究128例乳腺癌，發(fā)現(xiàn)E－cad、β－cat的表達(dá)常與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存率、生存時間相關(guān)。R.M.Bremnes等［5］用組織芯片方法研究 NSCLC，發(fā)現(xiàn) E－cad、βcat、γ－cat和P120CTN在肺鱗癌中表達(dá)減少，且與腫瘤分化程度、局部侵襲、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及患者生存率相關(guān)。薛彥萍等［12］采用免疫組化方法檢測結(jié)直腸腺癌中E－cad、α－cat、β－cat及 γ－cat的異常表達(dá)，發(fā)現(xiàn)E－cad的異常表達(dá)和β－cat的異常表達(dá)呈正相關(guān)，βcat的表達(dá)和α－cat、γ－cat的表達(dá)顯著相關(guān)。左建中等［13］發(fā)現(xiàn)，E－cad和α－cat的表達(dá)與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的病理分化程度和腫瘤浸潤深度密切相關(guān)，并隨著宮頸鱗狀細(xì)胞癌的惡性程度和侵襲性的增加而降低。研究發(fā)現(xiàn):E－cad在正常卵巢上皮中很少有表達(dá)，在卵巢癌中有表達(dá)，而且與卵巢癌的組織學(xué)類型、發(fā)展階段、分化程度和腹膜轉(zhuǎn)移有關(guān)。E－cad的表達(dá)常見于黏液性卵巢腫瘤，在漿液性卵巢腫瘤中表達(dá)較少［14］。與卵巢癌的早期階段相比，E－cad在晚期卵巢癌中的表達(dá)減少，提示E－cad的表達(dá)下調(diào)在卵巢癌的進(jìn)展中可能起重要作用［15］。E－cad在分化良好的卵巢癌中的表達(dá)高于在分化中等或較差的卵巢癌中的表達(dá)。與原發(fā)性卵巢癌相比，E－cad在發(fā)生腹膜轉(zhuǎn)移的卵巢癌中的表達(dá)減少［16］，提示E－cad的表達(dá)下調(diào)可能在卵巢癌發(fā)生腹膜轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮重要的作用。C.M.Lee等［17］采用免疫組化法對105例卵巢漿液性癌研究發(fā)現(xiàn)，β－cat核著色與卵巢癌病理分級正相關(guān)，β－cat功能失調(diào)在卵巢漿液性癌發(fā)病中起重要作用。

由此可見，當(dāng)E－cad－cat復(fù)合體功能喪失，則導(dǎo)致細(xì)胞間的黏附功能喪失，使得細(xì)胞之間的連接松解，腫瘤細(xì)胞將無限制地增生。通過對E－cad－cat、βcat和γ－cat在惡性腫瘤中的研究發(fā)現(xiàn)，E－cad的陽性表達(dá)的下調(diào)分別與α－cat、β－cat、γ－cat三者的異常表達(dá)在癌變過程中有協(xié)同作用。它們的協(xié)同作用導(dǎo)致癌腫細(xì)胞有較強的侵襲能力，易擴散和轉(zhuǎn)移，并與惡性腫瘤的分化有關(guān)。E－cad－cat中各分子與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。

通過對E－cad－cat在卵巢癌中表達(dá)的研究，或許可以對卵巢癌的早期診斷、療效觀察有一定的臨床意義。

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