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        G6PD不同檢驗方法比較

        2012-08-15 00:44:10陳飛
        當代醫(yī)學 2012年4期
        關鍵詞:脫氫酶比值生化

        陳飛

        葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)是參與紅細胞代謝的一種重要酶,其缺陷可導致紅細胞代謝障礙而引起溶血性貧血,大多是遺傳性疾病,主要靠臨床篩查發(fā)現(xiàn),本文采用全自動生化分析儀速率法,分光光度法,高鐵血紅蛋白還原試驗等方法比較對葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) 缺乏篩查效率的比較。

        1 基本資料和方法

        1.1 基本資料

        我院近2年1036例孕檢樣本,年齡在21~38歲之間,采用在檸檬酸葡萄糖抗凝劑(ACD)抗凝血中加入適量乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝劑,4℃冷藏保存。

        1.2 使用儀器

        全自動生化儀(日立7020),分光光度計(上海江儀)。

        1.3 方法

        1.3.1 G6PD活性檢測 采用廣州科方公司提供的G6PD試劑盒,抗凝血離心取紅細胞層20ul到含有1ml溶血劑(試劑盒配備)試管里,待紅細胞溶解后立即在生化儀上檢測(注意:紅細胞溶解后到上機檢測時間約8分鐘,最長必須在25分鐘之內(nèi))。G6PD活性表達單位為U/L,小于1300為缺乏,大于3600為增高,介于其二者中間的為正常值,所有操作步驟及參數(shù)必須按照說明書嚴格執(zhí)行。

        1.3.2 G6PD/6PGD比值法 采用廣州米基公司提供的試劑盒,取兩管,各加50ul溶血液,加熱20分后加中止液2ml,在650NM分光光度計上檢測兩管吸光度,S1/S2正常值為比值大于 1.05,缺乏者比值小于0.95,但若比值介于其二者之間即為高度懷疑,所有操作步驟及參數(shù)必須按照說明書嚴格執(zhí)行。參考值1.0~2.3。

        1.3.3 高鐵血紅蛋白還原實驗 使用分光光度計按照《 全國臨床檢驗操作規(guī)程》中步驟嚴格執(zhí)行操作[1]。高鐵血紅蛋白還原率小于75% 為陽性。

        1.4 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)輸入計算機后,采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。

        2 結果

        2.1 共1036例患者標本,生化分析儀進行G6PD活性檢測時,檢測結果為正常的有924例,結果大于3600U/L的有42份,結果<1300U/L的標本有70份。

        2.2 共1036例患者標本,高鐵血紅蛋白還原實驗檢測結果陰性的有924例(高鐵血紅蛋白還原率大于75%),陽性結果有112例(高鐵血紅蛋白還原率小于75%)。

        2.3 共1036例患者標本,G6PD/6PGD比值法測定時檢測結果正常的為910例(比值大于1.05),缺乏者為98例(比值小于0.95),28例高度懷疑(比值介于0.95與1.05之間)。

        3 討論

        葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏癥是遺傳性紅細胞酶病中最常見的一種,G-6-PD基因定位于Xq28,G-6-PD缺乏為性連鎖的不完全顯性遺傳。因此,帶有變異基因的男性會發(fā)病,該異常基因不會從父親遺傳給兒子,只會從母親遺傳給兒子。女性G-6-PD缺乏雜合子有兩個紅細胞群,G-6-PD缺乏細胞和正常細胞,在女性雜合子外周血中G-6-PD缺失紅細胞與正常紅細胞之比的這種顯著性差異就會導致其臨床表現(xiàn)各異[2]。

        G-6-PD活性測定是通過單位時間生成NADPH的量來反映紅細胞G-6-PD活性[3],但是單測G6PD活性不能排除由其他原因引起的G6PD活性升高或降低(如紅細胞增多癥,標本吸量不準確,貧血,標本溶血,凝血,陳舊,污染等)。高鐵血紅蛋白還原試驗法(MHB-RT)是目前國內(nèi)常用于篩查G-6-PD活性試驗之一,其優(yōu)點在于不需要昂貴的試劑或儀器,操作簡單,可用于普查,但存在假陽性。一般認為,G-6-PD缺乏患者高鐵血紅蛋白還原率31%~75%是雜合子型,還原率小于30%是純合子型(為顯著缺陷)。G6PD/6PGD比值測定是一種表型診斷,會因各種因素漏診或誤診一部分雜合子女性[4]。

        從檢測結果分析,生化分析儀進行G6PD活性檢測分析陽性檢出率與高鐵血紅蛋白還原試驗法檢出比例相同,均為10.8%,G6PD/6PGD比值法陽性檢測比率為12.1%,但G6PD活性檢測可以在自動生化分析儀上重復檢測,重復性測量避免誤差是其他方法所沒有的。

        這三種生化檢測的方法都相對較簡單,尤其是生化儀檢測,雖然準確性上還不及基因檢測,但在基層醫(yī)院開展對育齡婦女的篩查是十分有幫助的,篩選后對可疑對象再做進一步檢查有利于節(jié)約醫(yī)療成本,更有益于提高出生人口的質(zhì)量。

        [1]應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:173.

        [2]徐小蘭,王楓,楊蓉,等.南昌地區(qū)10792例新生兒G6PD缺乏癥篩查結果分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2005,13(8):85.

        [3]梁棟偉,區(qū)麗群.生化儀直接測定G6PD 活性的臨床應用[J].檢驗醫(yī)學與臨床2007,4(8):709-710.

        [4]區(qū)麗群,崔金環(huán),林蔚,等.應用G6PD/6PGD比值法檢測育齡夫婦62磷酸葡萄糖脫氫酶[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2004,19(4):31.

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