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        G6PD不同檢驗(yàn)方法比較

        2012-08-15 00:44:10陳飛
        當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2012年4期
        關(guān)鍵詞:脫氫酶比值生化

        陳飛

        葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)是參與紅細(xì)胞代謝的一種重要酶,其缺陷可導(dǎo)致紅細(xì)胞代謝障礙而引起溶血性貧血,大多是遺傳性疾病,主要靠臨床篩查發(fā)現(xiàn),本文采用全自動(dòng)生化分析儀速率法,分光光度法,高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)等方法比較對(duì)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) 缺乏篩查效率的比較。

        1 基本資料和方法

        1.1 基本資料

        我院近2年1036例孕檢樣本,年齡在21~38歲之間,采用在檸檬酸葡萄糖抗凝劑(ACD)抗凝血中加入適量乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝劑,4℃冷藏保存。

        1.2 使用儀器

        全自動(dòng)生化儀(日立7020),分光光度計(jì)(上海江儀)。

        1.3 方法

        1.3.1 G6PD活性檢測(cè) 采用廣州科方公司提供的G6PD試劑盒,抗凝血離心取紅細(xì)胞層20ul到含有1ml溶血?jiǎng)?試劑盒配備)試管里,待紅細(xì)胞溶解后立即在生化儀上檢測(cè)(注意:紅細(xì)胞溶解后到上機(jī)檢測(cè)時(shí)間約8分鐘,最長(zhǎng)必須在25分鐘之內(nèi))。G6PD活性表達(dá)單位為U/L,小于1300為缺乏,大于3600為增高,介于其二者中間的為正常值,所有操作步驟及參數(shù)必須按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。

        1.3.2 G6PD/6PGD比值法 采用廣州米基公司提供的試劑盒,取兩管,各加50ul溶血液,加熱20分后加中止液2ml,在650NM分光光度計(jì)上檢測(cè)兩管吸光度,S1/S2正常值為比值大于 1.05,缺乏者比值小于0.95,但若比值介于其二者之間即為高度懷疑,所有操作步驟及參數(shù)必須按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。參考值1.0~2.3。

        1.3.3 高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn) 使用分光光度計(jì)按照《 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中步驟嚴(yán)格執(zhí)行操作[1]。高鐵血紅蛋白還原率小于75% 為陽(yáng)性。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)后,采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

        2 結(jié)果

        2.1 共1036例患者標(biāo)本,生化分析儀進(jìn)行G6PD活性檢測(cè)時(shí),檢測(cè)結(jié)果為正常的有924例,結(jié)果大于3600U/L的有42份,結(jié)果<1300U/L的標(biāo)本有70份。

        2.2 共1036例患者標(biāo)本,高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果陰性的有924例(高鐵血紅蛋白還原率大于75%),陽(yáng)性結(jié)果有112例(高鐵血紅蛋白還原率小于75%)。

        2.3 共1036例患者標(biāo)本,G6PD/6PGD比值法測(cè)定時(shí)檢測(cè)結(jié)果正常的為910例(比值大于1.05),缺乏者為98例(比值小于0.95),28例高度懷疑(比值介于0.95與1.05之間)。

        3 討論

        葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏癥是遺傳性紅細(xì)胞酶病中最常見(jiàn)的一種,G-6-PD基因定位于Xq28,G-6-PD缺乏為性連鎖的不完全顯性遺傳。因此,帶有變異基因的男性會(huì)發(fā)病,該異常基因不會(huì)從父親遺傳給兒子,只會(huì)從母親遺傳給兒子。女性G-6-PD缺乏雜合子有兩個(gè)紅細(xì)胞群,G-6-PD缺乏細(xì)胞和正常細(xì)胞,在女性雜合子外周血中G-6-PD缺失紅細(xì)胞與正常紅細(xì)胞之比的這種顯著性差異就會(huì)導(dǎo)致其臨床表現(xiàn)各異[2]。

        G-6-PD活性測(cè)定是通過(guò)單位時(shí)間生成NADPH的量來(lái)反映紅細(xì)胞G-6-PD活性[3],但是單測(cè)G6PD活性不能排除由其他原因引起的G6PD活性升高或降低(如紅細(xì)胞增多癥,標(biāo)本吸量不準(zhǔn)確,貧血,標(biāo)本溶血,凝血,陳舊,污染等)。高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)法(MHB-RT)是目前國(guó)內(nèi)常用于篩查G-6-PD活性試驗(yàn)之一,其優(yōu)點(diǎn)在于不需要昂貴的試劑或儀器,操作簡(jiǎn)單,可用于普查,但存在假陽(yáng)性。一般認(rèn)為,G-6-PD缺乏患者高鐵血紅蛋白還原率31%~75%是雜合子型,還原率小于30%是純合子型(為顯著缺陷)。G6PD/6PGD比值測(cè)定是一種表型診斷,會(huì)因各種因素漏診或誤診一部分雜合子女性[4]。

        從檢測(cè)結(jié)果分析,生化分析儀進(jìn)行G6PD活性檢測(cè)分析陽(yáng)性檢出率與高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)法檢出比例相同,均為10.8%,G6PD/6PGD比值法陽(yáng)性檢測(cè)比率為12.1%,但G6PD活性檢測(cè)可以在自動(dòng)生化分析儀上重復(fù)檢測(cè),重復(fù)性測(cè)量避免誤差是其他方法所沒(méi)有的。

        這三種生化檢測(cè)的方法都相對(duì)較簡(jiǎn)單,尤其是生化儀檢測(cè),雖然準(zhǔn)確性上還不及基因檢測(cè),但在基層醫(yī)院開(kāi)展對(duì)育齡婦女的篩查是十分有幫助的,篩選后對(duì)可疑對(duì)象再做進(jìn)一步檢查有利于節(jié)約醫(yī)療成本,更有益于提高出生人口的質(zhì)量。

        [1]應(yīng)嫵,王毓三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:173.

        [2]徐小蘭,王楓,楊蓉,等.南昌地區(qū)10792例新生兒G6PD缺乏癥篩查結(jié)果分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2005,13(8):85.

        [3]梁棟偉,區(qū)麗群.生化儀直接測(cè)定G6PD 活性的臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床2007,4(8):709-710.

        [4]區(qū)麗群,崔金環(huán),林蔚,等.應(yīng)用G6PD/6PGD比值法檢測(cè)育齡夫婦62磷酸葡萄糖脫氫酶[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(4):31.

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