陳飛

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)是參與紅細(xì)胞代謝的一種重要酶，其缺陷可導(dǎo)致紅細(xì)胞代謝障礙而引起溶血性貧血，大多是遺傳性疾病，主要靠臨床篩查發(fā)現(xiàn)，本文采用全自動(dòng)生化分析儀速率法,分光光度法,高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)等方法比較對(duì)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) 缺乏篩查效率的比較。

1 基本資料和方法

1.1 基本資料

我院近2年1036例孕檢樣本，年齡在21～38歲之間，采用在檸檬酸葡萄糖抗凝劑（ACD）抗凝血中加入適量乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝劑,4℃冷藏保存。

1.2 使用儀器

全自動(dòng)生化儀(日立7020)，分光光度計(jì)（上海江儀）。

1.3 方法

1.3.1 G6PD活性檢測(cè) 采用廣州科方公司提供的G6PD試劑盒，抗凝血離心取紅細(xì)胞層20ul到含有1ml溶血?jiǎng)?試劑盒配備)試管里，待紅細(xì)胞溶解后立即在生化儀上檢測(cè)（注意：紅細(xì)胞溶解后到上機(jī)檢測(cè)時(shí)間約8分鐘，最長(zhǎng)必須在25分鐘之內(nèi)）。G6PD活性表達(dá)單位為U/L，小于1300為缺乏，大于3600為增高，介于其二者中間的為正常值，所有操作步驟及參數(shù)必須按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3.2 G6PD/6PGD比值法 采用廣州米基公司提供的試劑盒，取兩管，各加50ul溶血液，加熱20分后加中止液2ml，在650NM分光光度計(jì)上檢測(cè)兩管吸光度,S1/S2正常值為比值大于 1.05，缺乏者比值小于0.95，但若比值介于其二者之間即為高度懷疑，所有操作步驟及參數(shù)必須按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。參考值1.0～2.3。

1.3.3 高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn) 使用分光光度計(jì)按照《 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中步驟嚴(yán)格執(zhí)行操作［1］。高鐵血紅蛋白還原率小于75% 為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)后,采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 共1036例患者標(biāo)本,生化分析儀進(jìn)行G6PD活性檢測(cè)時(shí),檢測(cè)結(jié)果為正常的有924例，結(jié)果大于3600U/L的有42份,結(jié)果＜1300U/L的標(biāo)本有70份。

2.2 共1036例患者標(biāo)本,高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果陰性的有924例（高鐵血紅蛋白還原率大于75%）,陽(yáng)性結(jié)果有112例(高鐵血紅蛋白還原率小于75%)。

2.3 共1036例患者標(biāo)本，G6PD/6PGD比值法測(cè)定時(shí)檢測(cè)結(jié)果正常的為910例（比值大于1.05），缺乏者為98例（比值小于0.95），28例高度懷疑（比值介于0.95與1.05之間）。

3 討論

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥是遺傳性紅細(xì)胞酶病中最常見(jiàn)的一種，G-6-PD基因定位于Xq28，G-6-PD缺乏為性連鎖的不完全顯性遺傳。因此，帶有變異基因的男性會(huì)發(fā)病，該異常基因不會(huì)從父親遺傳給兒子，只會(huì)從母親遺傳給兒子。女性G-6-PD缺乏雜合子有兩個(gè)紅細(xì)胞群，G-6-PD缺乏細(xì)胞和正常細(xì)胞，在女性雜合子外周血中G-6-PD缺失紅細(xì)胞與正常紅細(xì)胞之比的這種顯著性差異就會(huì)導(dǎo)致其臨床表現(xiàn)各異［2］。

G-6-PD活性測(cè)定是通過(guò)單位時(shí)間生成NADPH的量來(lái)反映紅細(xì)胞G-6-PD活性［3］，但是單測(cè)G6PD活性不能排除由其他原因引起的G6PD活性升高或降低（如紅細(xì)胞增多癥，標(biāo)本吸量不準(zhǔn)確，貧血，標(biāo)本溶血，凝血，陳舊，污染等）。高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)法（MHB-RT）是目前國(guó)內(nèi)常用于篩查G-6-PD活性試驗(yàn)之一，其優(yōu)點(diǎn)在于不需要昂貴的試劑或儀器，操作簡(jiǎn)單，可用于普查，但存在假陽(yáng)性。一般認(rèn)為,G-6-PD缺乏患者高鐵血紅蛋白還原率31%～75%是雜合子型，還原率小于30%是純合子型(為顯著缺陷)。G6PD/6PGD比值測(cè)定是一種表型診斷,會(huì)因各種因素漏診或誤診一部分雜合子女性［4］。

從檢測(cè)結(jié)果分析,生化分析儀進(jìn)行G6PD活性檢測(cè)分析陽(yáng)性檢出率與高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)法檢出比例相同，均為10.8%，G6PD/6PGD比值法陽(yáng)性檢測(cè)比率為12.1%,但G6PD活性檢測(cè)可以在自動(dòng)生化分析儀上重復(fù)檢測(cè)，重復(fù)性測(cè)量避免誤差是其他方法所沒(méi)有的。

這三種生化檢測(cè)的方法都相對(duì)較簡(jiǎn)單，尤其是生化儀檢測(cè)，雖然準(zhǔn)確性上還不及基因檢測(cè)，但在基層醫(yī)院開(kāi)展對(duì)育齡婦女的篩查是十分有幫助的，篩選后對(duì)可疑對(duì)象再做進(jìn)一步檢查有利于節(jié)約醫(yī)療成本，更有益于提高出生人口的質(zhì)量。

［1］應(yīng)嫵,王毓三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:173.

［2］徐小蘭,王楓,楊蓉,等.南昌地區(qū)10792例新生兒G6PD缺乏癥篩查結(jié)果分析［J］.中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2005,13(8):85.

［3］梁棟偉，區(qū)麗群.生化儀直接測(cè)定G6PD 活性的臨床應(yīng)用［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床2007,4(8):709-710.

［4］區(qū)麗群,崔金環(huán),林蔚,等.應(yīng)用G6PD/6PGD比值法檢測(cè)育齡夫婦62磷酸葡萄糖脫氫酶［J］.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(4):31.