聶延君，鞏麗萍，謝元超

(山東省食品藥品檢驗(yàn)所，山東濟(jì)南250101)

藥物溶出度(dissolution rate)是指藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等固體制劑在規(guī)定的介質(zhì)中溶出的速率和程度。溶出度是影響藥物吸收及生物利用度的重要因素，溶出度的研究和應(yīng)用促進(jìn)了藥物研制水平，強(qiáng)化了藥品質(zhì)量控制手段，在藥物的研制、生產(chǎn)和指導(dǎo)臨床用藥方面具有重要的意義。

隨著新藥研究的快速發(fā)展，新的藥物品種及制劑層出不窮，在現(xiàn)代藥品檢驗(yàn)工作中，所需的藥物對(duì)照品也日益增多。但在實(shí)際工作中經(jīng)常遇到?jīng)]有或缺少藥物對(duì)照品的情況，自身對(duì)照法正是一種不需對(duì)照品即可快速檢驗(yàn)藥品的檢測(cè)方法，是我國(guó)首創(chuàng)并已在抗生素類藥物溶出度測(cè)定中廣泛應(yīng)用，由于該法不需對(duì)照品，可以有效排除輔料和其他組分的干擾，已有不少研究證明該法亦可應(yīng)用于中藥制劑的溶出度測(cè)定。

本文將綜述溶出度研究的發(fā)展歷程以及自身對(duì)照法在抗生素類藥物和中藥制劑中的應(yīng)用，以為廣大藥品檢驗(yàn)工作者提供參考。

1 溶出度研究的發(fā)展概況

溶出度的研究大致經(jīng)歷了以下幾個(gè)階段［1］:①1879年～1960年溶出度理論的建立:1897年Noyes和Whitney提出了溶出速率方程，即Noyes－Whitney方程，dC/dt=K(Cs－C)這是溶出度測(cè)定的基本原理。1904年Nernet和Brunner將Fick擴(kuò)散定律應(yīng)用于Noyes－Whitney方程;②1950年～1980年溶出度與生物利用度相關(guān)性研究:1951年Edwards對(duì)阿司匹林片進(jìn)行了研究，并指出阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用取決于藥物在胃腸道內(nèi)的溶出速率［1］;Smolen等介紹了有關(guān)溶出與生物利用度曲線近似一致的概念［2］，溶出度逐漸成為國(guó)際公認(rèn)的檢驗(yàn)藥品質(zhì)量的重要措施。1967年美國(guó)處方集(NF)12版第二補(bǔ)充版最先介紹了緩釋片與膠丸的溶出度試驗(yàn)。隨后，1975年的英國(guó)藥典1973年補(bǔ)充版、1981年第十改正日本藥局方都收載了溶出度檢測(cè)項(xiàng)目。1977年中國(guó)藥典開始收載溶出度［3］;③1980年～2000年溶出度逐漸成為研制和評(píng)價(jià)口服制劑質(zhì)量的重要工具;④2000年～至今溶出度的研究拓展到生物藥劑學(xué)領(lǐng)域。

溶出量的計(jì)算方法有三種:①吸收系數(shù)法;②對(duì)照品法;③自身對(duì)照法。在實(shí)際應(yīng)用中，吸收系數(shù)法和對(duì)照品法是常用的兩種方法，但這兩種方法存在著一定缺陷，如當(dāng)藥物制劑中有的輔料有紫外吸收時(shí)，就會(huì)對(duì)溶出結(jié)果產(chǎn)生影響，使得結(jié)果偏高，有的竟會(huì)超過標(biāo)示量的110%［4］;另外，溶出度所需的對(duì)照品與含量測(cè)定項(xiàng)下所用的對(duì)照品不一定完全一致，含量測(cè)定項(xiàng)下應(yīng)用的對(duì)照品，其標(biāo)定通常采用HPLC法，而像抗生素類藥中對(duì)照品則采用微生物法標(biāo)化，與溶出度采用化學(xué)法測(cè)定之間有些差異，對(duì)測(cè)定結(jié)果將產(chǎn)生誤差［5］。自身對(duì)照法是目前中國(guó)藥典中抗生素類藥物溶出度測(cè)定的獨(dú)有測(cè)定方法，乙酰螺旋霉素最先采用該法［6］，2000年版中國(guó)藥典將抗生素品種固體制劑的溶出度測(cè)定方法幾乎都改成自身對(duì)照法［7］。

2 溶出度自身對(duì)照法

自身對(duì)照法是取同批號(hào)的樣品10片，研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于平均片重1片的重量，按標(biāo)示量用溶出介質(zhì)稀釋到所需濃度，過濾，取續(xù)濾液作為自身對(duì)照溶液［6］。該法具有以下優(yōu)點(diǎn):①不需對(duì)照品或標(biāo)準(zhǔn)品即可快檢驗(yàn)，非常適合企業(yè)、藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)藥物質(zhì)量的監(jiān)督檢驗(yàn);②消除了藥物輔料及復(fù)方制劑中其他成分對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾［8］。自身對(duì)照法目前主要應(yīng)用于抗生素藥物的測(cè)定，更是以其特有的優(yōu)點(diǎn)在中國(guó)藥典中占有了一席之地。

2.1 在抗生素類藥物檢驗(yàn)中的應(yīng)用 抗生素類藥物中多組分抗生素的紫外吸收與效價(jià)關(guān)系難以確定，使得對(duì)照品可能與被測(cè)藥物組分及組分比例不一致，使用對(duì)照品不能正確反映藥物的溶出［9］，自身對(duì)照法可以很好解決這一難題，是一大創(chuàng)新，自身對(duì)照法受到了越來越多的關(guān)注。為避免出現(xiàn)溶出度有超出100%的不合理現(xiàn)象，謝元超等［10］建議頭孢氨芐片的樣品液和對(duì)照液采用同濃度、同步稀釋的方法進(jìn)行溶出度測(cè)定。孫國(guó)紅等［11］在對(duì)阿莫西林膠囊溶出度研究中發(fā)現(xiàn)，阿莫西林的溶出度與自身對(duì)照液濃度有關(guān)，當(dāng)自身對(duì)照液稀釋初始濃度大于1.5 mg·L－1時(shí)，溶出度隨初始濃度的增加而增大，而濃度小于1.5 mg·L－1時(shí)，溶出度不隨自身對(duì)照液濃度的變化，原因是當(dāng)濃度過大時(shí)，主藥溶解不完全，而輔料、濾膜等對(duì)阿莫西林有吸附作用。

自身對(duì)照法不僅適用于單一組分的藥物制劑溶出度測(cè)定，對(duì)多組分的藥物也有很重要的應(yīng)用價(jià)值。謝元超等［12］對(duì)多組分的麥白霉素片進(jìn)行了溶出度研究發(fā)現(xiàn)原測(cè)定方法不合理，測(cè)得的溶出度均偏高，多數(shù)在110%以上。采用同批號(hào)的麥白霉素片作自身對(duì)照時(shí)，由于同批麥白霉素片的濃度與其紫外吸收值存在線性關(guān)系，可以有效排除輔料的干擾，這樣測(cè)得的溶出結(jié)果更加科學(xué)合理，起到了控制溶出度質(zhì)量的目的。頭孢丙烯膠囊含有E和Z兩種異構(gòu)體，不同樣品的組分不恒定，而對(duì)照品中每個(gè)組分的量不太可能與樣品組成一致，張雷等［13］采用自身對(duì)照法測(cè)定頭孢丙烯膠囊，很好地解決了這一問題。劉谷欲等［14］以多組分的制霉菌素片為模型片，建立了制霉菌素片溶出度自身對(duì)照法的規(guī)范性方法，提出以0.2 mol·L－1十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質(zhì)。楊開金利用自身對(duì)照法建立了吉他霉素片的溶出度測(cè)定方法，并針對(duì)藥物的理化性質(zhì)選出了合適的溶出介質(zhì)［15］。

2.2 在復(fù)方制劑中的應(yīng)用 自身對(duì)照法不需對(duì)照品，只需藥物充分溶解后的濃度與吸收值成線性關(guān)系，就可以采用自身對(duì)照法，所以自身對(duì)照法也適用于復(fù)方、多組分的固體制劑溶出度測(cè)定。國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載的頭孢氨芐甲氧芐啶膠囊溶出度檢查采用對(duì)照品對(duì)照的高效液相色譜法，該法操作、計(jì)算均較繁瑣，謝元超等［16］采用自身對(duì)照法測(cè)定溶出度，結(jié)果自身對(duì)照法更簡(jiǎn)便易行，能準(zhǔn)確反映樣品溶出情況。對(duì)于復(fù)方磺胺甲惡唑片溶出度測(cè)定，美國(guó)藥典采用高效液相法分離磺胺甲惡唑和甲氧芐啶，然后用對(duì)照品分別測(cè)定，謝元超等［17］采取了自身對(duì)照法，不需分離兩成分，簡(jiǎn)便快速，能正確反應(yīng)藥物的質(zhì)量。周希英等［18］測(cè)定慶大霉素碳酸鉍膠囊溶出度時(shí)發(fā)現(xiàn)膠囊的囊材可與藥物之間發(fā)生交聯(lián)作用，遇衍生化試劑時(shí)產(chǎn)生渾濁，影響測(cè)定結(jié)果，故需要在對(duì)照溶液中加入空膠囊溶解，以便克服樣品液和對(duì)照液測(cè)定中存在的誤差。

2.3 在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用 由于中藥制劑的成分復(fù)雜，其制備多為傳統(tǒng)工藝，手段較為原始，偽品摻假嚴(yán)重，中藥制劑質(zhì)量參差不齊?！吨袊?guó)藥典》對(duì)于中藥制劑的檢查項(xiàng)目也僅局限于外觀、鑒別、含量檢查等。中藥市場(chǎng)走向國(guó)際化并要被國(guó)際認(rèn)可，就必須嚴(yán)格規(guī)范中藥制劑的質(zhì)量，指明作用效力，因此很有必要制定一套更加嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系。隨著中藥質(zhì)量控制現(xiàn)代化的發(fā)展，許多化學(xué)藥品質(zhì)量控制的理念與方法在中藥質(zhì)量控制中得到了應(yīng)用，溶出度測(cè)定也逐步用于中藥制劑的質(zhì)量控制。在大多數(shù)情況下，中藥制劑溶出度和生物利用度存在相關(guān)性，而生物利用度研究耗時(shí)耗力，溶出度無疑成為控制中藥質(zhì)量的有力措施［19］。中藥溶出度測(cè)定方法首選紫外分光光度法(包括比色法)［9］，其中自身對(duì)照法由于操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，數(shù)據(jù)獲取直接;可有效排除了制劑中輔料等因素的干擾，可以更準(zhǔn)確的反映藥物的溶出情況;不需要購(gòu)買對(duì)照品，無需流動(dòng)相等試劑損耗，大大降低檢驗(yàn)成本，節(jié)能環(huán)保，非常適合多組分的中藥溶出度測(cè)定，也符合中藥整體性的原則。何慶園等［20］選用同批號(hào)的舍尼通片作自身對(duì)照，消除了輔料和其他組分的干擾，建立了舍尼通片的溶出度測(cè)定方法。王淑梅等［21］以丹參水溶性成分丹參素為指標(biāo)，以自身對(duì)照法測(cè)定復(fù)方丹參片的溶出度，能夠作為其質(zhì)量控制的一種方法。阮?。?2，23］以 0.1 mol·L－1鹽酸為溶出介質(zhì)，利用自身對(duì)照法對(duì)三黃片和牛黃解毒片分別進(jìn)行溶出度試驗(yàn)，均能有效評(píng)定三黃片和牛黃解毒片的質(zhì)量。韋娟［24］利用自身對(duì)照法對(duì)三個(gè)不同廠家的蒲地蘭消炎片進(jìn)行了溶出度研究，發(fā)現(xiàn)各廠家之間藥品溶出度差異較大，自身對(duì)照法可用于評(píng)定中藥制劑的溶出度質(zhì)量。黃獻(xiàn)［25］紫外掃描了不同廠家的芒果止咳片，發(fā)現(xiàn)吸收?qǐng)D譜基本一致，在259 nm均有吸收，這與該藥的有效成分芒果苷的特征吸收峰一致，進(jìn)而采用自身對(duì)照法對(duì)四個(gè)廠家的芒果止咳片進(jìn)行溶出度比較，認(rèn)為其建立的溶出度測(cè)定方法能夠?yàn)樵撍幍纳a(chǎn)工藝改進(jìn)以及質(zhì)量控制提供依據(jù)。莫志江等［26］以溶劑為空白，全波長(zhǎng)掃描銀杏葉片溶液，發(fā)現(xiàn)其在265 nm的吸收峰與銀杏葉的主要有效成分黃酮苷類的特征吸收峰基本相符，因此選用自身對(duì)照法建立了銀杏葉片體外溶出度測(cè)定方法，認(rèn)為其所建立的方法簡(jiǎn)單穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。

3 展望

針對(duì)中藥制劑的特殊性，袁海龍還提出了基于化學(xué)分析和生物效價(jià)檢測(cè)的中藥固體制劑體外評(píng)價(jià)的管理新模式，認(rèn)為國(guó)家藥品審評(píng)部門應(yīng)針對(duì)每一種中藥固體制劑，參照化學(xué)藥物的方法，公布溶出試驗(yàn)參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)“化學(xué)－生物”溶出譜、該制劑的溶出度試驗(yàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等以供全國(guó)藥品生產(chǎn)企業(yè)參照?qǐng)?zhí)行［16］。

由于不同廠家的生產(chǎn)工藝不同，中藥制劑質(zhì)量差異較大，有必要增加溶出度檢查項(xiàng)目。自身對(duì)照法測(cè)定藥物溶出度具有針對(duì)性強(qiáng)，能減少誤差，消除干擾的優(yōu)點(diǎn)，可以準(zhǔn)確、方便、快捷的測(cè)定中藥制劑溶出度，因此自身對(duì)照法具有很好的推動(dòng)和應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)也存在不足和局限性，如當(dāng)藥物制劑本身含量不合格時(shí)，測(cè)得的溶出度可能是合格，使溶出度和含量沒有直接關(guān)系，減少了質(zhì)量評(píng)價(jià)各項(xiàng)目間的關(guān)聯(lián)性;輔料有吸附作用影響藥物溶出時(shí)，將影響溶出度結(jié)果等等［27］，這些可以用其他方法補(bǔ)充和完善。

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