符春生，潘江慧 ，張古老，謝家和

（1.韶關(guān)市職業(yè)病防治醫(yī)院康復(fù)科，廣東 韶關(guān) 512026；2.贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科，江西 贛州341000；3.南昌大學(xué)研究生院醫(yī)學(xué)部2010級，南昌330006）

冠狀動脈粥樣硬化心臟病已成為危害人類健康最重要疾病之一，其主要病因是動脈粥樣硬化（AS）的形成。目前研究認為，AS形成的機制比較復(fù)雜，高脂血癥是其發(fā)生的重要原因，慢性炎癥貫穿其發(fā)展的全過程[1]。黃連解毒湯是中醫(yī)解毒清熱的名方，具有調(diào)脂﹑抗炎﹑抗免疫作用。本研究旨在探討黃連解毒湯抗AS的作用及其機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1）動物：健康日本雄性大耳白兔24只，體質(zhì)量（2.0±0.2）kg，年齡 6 個月左右，由贛州畜牧研究所提供。

2）藥品與試劑：黃連、黃柏、黃芩、梔子購于贛州醫(yī)藥公司，膽固醇購于湖南衡陽同仁化工廠，蛋黃粉購于安徽合肥康德食品化工廠，豬油購于贛州市農(nóng)貿(mào)市場。高敏C反應(yīng)蛋白（hs－CRP）ELISA試劑盒購自上海天呈生物制品有限公司，羊抗兔IgG購于武漢博士德生物工程有限公司。

3）主要儀器：日本OLYMPUS公司生產(chǎn)的全自動生化分析儀。

1.2 實驗方法

1）黃連解毒湯的制備：將黃連、黃柏、黃芩、梔子以 3∶2∶2∶3 的比例煎煮，分 2 次煎煮，第 1 次 60min（并過濾），第2次30min（并過濾），合并2次濾液，濃縮至1 g·mL-1，保存4℃冰箱備用。

2）分組與造模：將24只大耳白兔在適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，按隨機數(shù)字表法分為3組，即正常對照組、模型對照組、黃連解毒湯組，每組8只。正常對照組飼普通標準飼料，模型對照組、黃連解毒湯組先導(dǎo)管球囊損傷兔左側(cè)頸總動脈并喂飼高脂飼料（15%蛋黃粉、5%豬油、1%膽固醇、80%基礎(chǔ)飼），每日每只予100 g[1-2]；黃連解毒湯組同時每天灌胃黃連解毒湯液3mL·kg-1，而正常對照組、模型對照組給予等量生理水灌胃。

3）觀察指標與檢測方法：喂養(yǎng)12周后停藥禁食12 h，耳緣靜脈取血10mL，5mL用于做血脂檢測，檢測指標主要為 TC、TG、LDL-C、HDL-C；5 mL 用ELISA測定血清hs-CRP含量。同時用10%烏拉坦耳緣靜脈注射麻醉，分離左頸總動脈斑塊組織，采用免疫組織化學(xué)法測定組織hs-CRP含量，并肉眼觀察頸動脈病理學(xué)改變情況。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 血脂水平檢測結(jié)果

3組間血脂水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。模型對照組﹑黃連解毒湯組血脂水平均顯著高于正常對照組（P<0.01），黃連解毒湯組血脂水平顯著低于模型對照組（P<0.01）。 見表 1。

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

*P<0.01與正常對照組比較；△P<0.01與模型對照組比較。

組別 n TC TG LDL-C HDL-C正常對照組 8 1.72±0.86 1.16±0.56 1.06±0.50 0.46±0.21模型對照組 8 22.08±7.56* 5.67±1.78* 17.01±2.25* 3.12±1.20*黃連解毒湯組 8 8.26±1.89*△ 2.28±0.98*△ 4.05±0.91*△ 5.21±2.09*△

2.2 血清及斑塊組織hs-CRP含量檢測結(jié)果

3組間血清及斑塊組織hs-CRP含量比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。模型對照組﹑黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著高于正常對照組（P<0.01），黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著低于模型對照組（P<0.01）。見表2。

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

*P<0.01與正常對照組比較；△P<0.01與模型對照組比較。

Hs-CRP含量血清 ρ∕(mg·L-1） 斑塊組織∕%正常對照組 8 0.96±0.42 1.08±0.56模型對照組 8 21.91±5.02* 45.21±11.12*黃連解毒湯組 8 7.23±4.02*△ 20.06±5.06*△組別 n

2.3 頸動脈病理學(xué)改變情況

肉眼可見正常對照組內(nèi)膜光滑，無斑塊形成；模型對照組血管表面粗糙，內(nèi)膜面散在不規(guī)則隆突斑塊，顏色為瓷白色；黃連解毒湯組血管內(nèi)膜隆突斑塊減少，顏色淺黃。

3 討論

目前認為多種機制參與冠狀A(yù)S的發(fā)病，如脂質(zhì)浸潤、炎癥反應(yīng)、損傷應(yīng)答等。高脂血癥是其發(fā)生的重要原因，尤其是高LDL-C，它可以激活內(nèi)皮細胞和單核細胞，并使單核細胞吞噬脂質(zhì)形成泡沫細胞，導(dǎo)致斑塊的形成[3]。同時A S的發(fā)生是一個非常復(fù)雜的過程，慢性炎癥反應(yīng)貫穿A S發(fā)生發(fā)展全過程。炎癥會刺激單核細胞的遷移，平滑肌細胞的增殖，最終導(dǎo)致動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展[4-5]。hs-CRP作為一種急時相蛋白，不僅可以由肝臟產(chǎn)生，而且可以由AS血管壁中的巨噬細胞，平滑肌樣細胞以及脂肪組織產(chǎn)生[6]。目前認為hs-CRP不僅是AS的標記物，而且是AS的一個獨立危險因素[7]。hs-CRP水平能夠有助于預(yù)測冠心病患者發(fā)生心肌梗死危險性以及其預(yù)后情況[8]。黃連解毒湯是中醫(yī)清熱解毒的名方。有報道稱其有調(diào)脂、抗炎、抗免疫作用，降低動脈粥樣硬化大鼠血sICAM-1，sVCAM-1水平，抑制炎癥反應(yīng)，延緩動脈粥樣硬化發(fā)展[9]。相似的研究表明，黃連解毒湯能下調(diào)MCP-1/CCR2mRNA在主動脈的表達，減少局部炎癥反應(yīng)，進而減輕對血管的損害[10]。同樣也有報道，黃連解毒湯有調(diào)脂功能，其高劑量能有效調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝，降低 TC、TG、LDL-C，升高 HDL-C，提高機體抗氧化能力，抑制動脈粥樣硬化形成[11]。

本研究通過兔頸總動脈導(dǎo)管球囊損傷加高脂飲食建立兔AS模型，觀察黃連解毒湯對AS兔的血脂及血清、斑塊組織炎癥的影響。結(jié)果表明，黃連解毒湯具有降低AS兔的血清總膽固醇、甘油三酯、低密度膽固醇，升高高密度膽固醇的作用；可以減輕血清及斑塊組織的炎癥反應(yīng)，使血清及斑塊組織中的hs-CRP水平表達下降，減少內(nèi)膜面隆突斑塊形成。綜合上述，黃連解毒湯對高脂血癥兔具有調(diào)脂，抑制炎癥的進程，抗AS發(fā)展的作用。目前臨床上主要用他汀類、貝特類降脂治療冠心??；但這些藥物長期服用有較多的不良反應(yīng)；黃連解毒湯作為天然來源的中藥材有多靶點抗AS且作用緩和、不良反應(yīng)小等優(yōu)勢。因此，黃連解毒湯對防治高脂血癥及其相關(guān)疾病具有良好的現(xiàn)實意義。

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