龔英峰
(唐山市灤縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,063700)
蛋白質(zhì)是人體生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ),在人體組成與新陳代謝中意義重大,在病理和生理情況下,各種血清蛋白質(zhì)的濃度和組分間的比例可發(fā)生改變。蛋白質(zhì)在堿性環(huán)境中帶負(fù)電,在電場中向陽極泳動,由于各種蛋白質(zhì)的顆粒大小、等電點(diǎn)及所帶電荷多少不同,所以在電場中的泳動速度也不同。血清蛋白電泳就是利用這一原理將各組蛋白分開。電泳后從陽極開始依次為白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β和γ球蛋白區(qū)帶。各區(qū)帶的改變與人體病理及生理情況密切相關(guān)。醋酸纖維素薄膜電泳是傳統(tǒng)的電泳方法,但是由于醋酸纖維素薄膜雜質(zhì)多,含大量的纖維和金屬離子,造成電泳速度慢,分離不良,并有嚴(yán)重的電滲現(xiàn)象,而瓊脂糖凝膠則具有微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),所以隨著電泳技術(shù)的不斷發(fā)展,瓊脂糖凝膠電泳已經(jīng)逐步替代醋酸纖維素薄膜電泳并實(shí)現(xiàn)了自動化,且操作簡單;另外它的最大優(yōu)點(diǎn)是幾乎不吸附蛋白質(zhì),因此電泳無拖尾現(xiàn)象,分離清晰、分辨率高,更適用于對大量標(biāo)本的常規(guī)分析,易于普及,所以血清蛋白電泳技術(shù)已經(jīng)在各個醫(yī)院普遍開展用于疾病的診斷和預(yù)后的判斷[1]。我們利用法國Sebia半自動瓊脂糖凝膠電泳儀對本地區(qū)待產(chǎn)婦和育齡未孕健康女性的血清蛋白電泳圖譜進(jìn)行比較和分析,為臨床研究孕婦的生理提供參考。
1.1 對象 選擇2010-11—2011-01在我院住院的待產(chǎn)婦100例為實(shí)驗(yàn)組,年齡23~39歲,平均年齡(30.03±5.78)歲。選擇同期門診的育齡未孕健康女性75例作為對照組,年齡22~35歲,平均年齡(28.20±5.30)歲。
1.2 儀器和試劑 法國Sebia公司HYDRASYS半自動電泳儀和配套試劑盒、日立7060全自動生化分析儀、德國利德曼公司總蛋白試劑。
1.3 方法 收集實(shí)驗(yàn)組及對照組空腹血液標(biāo)本,先檢測總蛋白,再進(jìn)行蛋白電泳分析:取10 μL血清加樣、電泳、干燥以及染色、脫色、干燥,最后取出凝膠板用掃描儀進(jìn)行掃描定量。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采SPSS 15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。計(jì)量資料比較采用分組樣本資料t檢驗(yàn)。
通過本研究我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組總蛋白濃度(TP)、白蛋白(ALB)百分比顯著低于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);實(shí)驗(yàn)組α1、α2、β球蛋白百分比顯著高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);實(shí)驗(yàn)組γ球蛋白百分比與對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05,表1)。
表1 實(shí)驗(yàn)組與對照組血清蛋白電泳結(jié)果比較±s)
表1 實(shí)驗(yàn)組與對照組血清蛋白電泳結(jié)果比較±s)
組別 例數(shù) TP(g/L) ALB(%) α1(%) α2(%) β(%) γ(%)實(shí)驗(yàn)組 100 58.2±6.6 50.2±6.2 5.1±0.9 13.9±1.7 15.2±2.5 15.0±3.0對照組 75 70.2±5.2 65.4±3.4 2.5±0.4 9.0±0.7 8.6±1.1 14.6±1.7
血清蛋白電泳是臨床疾病診療中常用的技術(shù)之一,目前已經(jīng)自動化。自動化的瓊脂糖凝膠電泳可以很好地分離各組蛋白區(qū)帶并通過掃描儀準(zhǔn)確地算出各區(qū)帶蛋白所占的百分比,若同時(shí)結(jié)合總蛋白濃度則可對各區(qū)帶蛋白進(jìn)行定量。瓊脂糖凝膠電泳的廣泛應(yīng)用為肝臟疾病、腎臟疾病以及M蛋白血癥等疾病的診斷提供了可靠的依據(jù)。
正常妊娠時(shí),為滿足胎兒的發(fā)育與生長,母體發(fā)生一系列適應(yīng)性的變化,并且在高水平的雌、孕激素的影響下,血清蛋白組分發(fā)生明顯變化[2]。母體在妊娠期的血容量平均增加45%[3],此時(shí)由于血液稀釋而使總蛋白濃度降低;另外由于孕婦腎小球?yàn)V過率的增加,蛋白質(zhì)從尿中丟失也隨之增加[3],由于白蛋白分子量較小所以丟失較多,本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示實(shí)驗(yàn)組白蛋白降低比較顯著與此相符。α1抗胰蛋白酶、α1脂蛋白和甲狀腺素結(jié)合球蛋白存在于α1球蛋白區(qū),有報(bào)道[4]稱孕婦體內(nèi)α1抗胰蛋白酶隨孕周增加而減少,另有報(bào)道[5]α1脂蛋白在妊娠及高雌激素血癥時(shí)可輕度增加,所以實(shí)驗(yàn)組α1球蛋白比例增加與其體內(nèi)α1脂蛋白以及甲狀腺素結(jié)合球蛋白增加有關(guān)。α2、β球蛋白增加是由銅藍(lán)蛋白、低密度脂蛋白及轉(zhuǎn)鐵蛋白增加所引起的。妊娠婦女銅藍(lán)蛋白升高是其對體內(nèi)銅、鐵代謝改變的一種適應(yīng),是一種正常的生理現(xiàn)象[6];轉(zhuǎn)鐵蛋白增加,是妊娠婦女對生理性貧血的一種代償。孕婦血中免疫球蛋白IgG輕度下降、IgD增高、IgA和IgM水平基本不變[3],由于免疫球蛋白大多存在于γ球蛋白區(qū),所以這可能是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)組γ球蛋白無明顯變化的根本原因。
綜合以上資料分析說明,待產(chǎn)婦血清蛋白成分的改變是一種正常的生理現(xiàn)象,在將血清蛋白電泳技術(shù)用于臨床疾病診療時(shí)應(yīng)注意妊娠所帶來的影響。
[1]龔英峰.腎病患者血清蛋白電泳圖譜分析[J].中國療養(yǎng)醫(yī)學(xué),2012,21(1):33-34.
[2]鐘蘭,林瑜,蔡玉玲,等.待產(chǎn)婦與不同疾病患者血清蛋白電泳圖譜的鑒別分析[J].中國婦幼保健,2007,22(34):4927-4930.
[3]周新,涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:432-433.
[4]裘儉,黃雅萍,張玲玲,等.妊娠婦女血中α1-抗胰蛋白酶與纖維蛋白原相關(guān)性研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2000,4(4):160-161.
[5]金梅枝,付雪芹.血清蛋白電泳的臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥指南,2007(5):111-112.
[6]呂合作,胡守芬,陳治文.孕婦血清銅藍(lán)蛋白氧化酶活力的變化[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2000,25(4):242-243.