王 磊，呂 剛，曹 陽(yáng)，智曉東，于德水，范中凱，嚴(yán) 鵬，賈志強(qiáng)，劉 超

(1遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州 121001;2遼寧醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院)

周圍神經(jīng)損傷臨床常見(jiàn)［1］。如何促使損傷的周圍神經(jīng)功能恢復(fù)和神經(jīng)再生達(dá)到術(shù)前水平，目前尚無(wú)確切、有效的方法［2，3］。促甲狀腺激素釋放激素(TRH)是由下丘腦合成和分泌的一種三肽［4］，具有使呼吸加深加快、血壓升高、中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮等生理作用。2011年11月～2012年3月，本研究通過(guò)靜注TRH治療兔周圍神經(jīng)損傷，觀察其促進(jìn)周圍神經(jīng)再生的效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及試劑 雄性健康新西蘭兔12只，清潔級(jí)，體質(zhì)量4～4.5 kg。TRH由上海生物制品藥廠生產(chǎn)，劑型為粉末狀，500 μg/支。

1.2 坐骨神經(jīng)損傷神經(jīng)再生室模型的制作及分組12只新西蘭白兔腹腔麻醉后，俯臥位，無(wú)菌條件下分離右側(cè)坐骨神經(jīng)，在距梨狀肌下緣0.5 cm處剪斷。取一段硅膠管，顯微鏡下用9-0無(wú)創(chuàng)尼龍線將神經(jīng)遠(yuǎn)近端外膜與硅膠管壁縫合，神經(jīng)遠(yuǎn)近端分別引入管中，保持?jǐn)喽碎g隙5 mm。建立坐骨神經(jīng)損傷神經(jīng)再生室模型。12只動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，各6只。對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組分別于耳緣靜脈注射生理鹽水TRH 40 μg各40 mL，1次/d。1個(gè)月為1個(gè)療程，間隔1個(gè)月進(jìn)行下個(gè)療程，共2個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo) ①大體觀察:傷口組織的愈合狀態(tài)、有無(wú)肌肉萎縮、足底潰瘍、有無(wú)炎癥及周圍組織與神經(jīng)粘連情況。②組織學(xué)觀察:術(shù)后4、12周，兩組分別取2只兔再生神經(jīng)橫切干中段及橋接體遠(yuǎn)端5 mm處的神經(jīng)段。HE染色和Loyez蘇木素染色，觀察再生神經(jīng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)，并于1 000倍光鏡下記錄單位視野內(nèi)的有髓纖維數(shù)。再分別取2只兔術(shù)側(cè)再生神經(jīng)制作超薄切片，透射電鏡下觀察軸突和髓鞘等超微結(jié)構(gòu)。③電生理檢查:術(shù)后4、12周每組各取2只動(dòng)物在麻醉下行神經(jīng)電生理檢查，用MEB-2200肌電圖/誘發(fā)電位儀檢測(cè)傷側(cè)坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MCV)以及復(fù)合肌肉動(dòng)作電位波幅(MAP)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用方差分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組動(dòng)物一般情況 動(dòng)物傷口均一期愈合。用藥第6周，實(shí)驗(yàn)組發(fā)生輕度足底潰瘍2只，余有局部紅腫，輕度厭食2只;對(duì)照組無(wú)厭食情況，3只輕度足底潰瘍，余均呈局部紅腫。

2.2 兩組有髓纖維生成情況 ①光鏡觀察結(jié)果:術(shù)后4周，兩組均有一定數(shù)量的有髓纖維及少量結(jié)締組織生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組一定數(shù)量再生纖維軸突及雪旺細(xì)胞，其排列規(guī)則、致密整齊、結(jié)構(gòu)均勻;對(duì)照組則排列紊亂、稀疏，并可見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。術(shù)后12周，兩組有髓纖維數(shù)量均有所增加，實(shí)驗(yàn)組橋接體中段及遠(yuǎn)端均可見(jiàn)再生纖維排列規(guī)則、分布均勻、髓鞘較厚;對(duì)照組則數(shù)量較少，分布不均，髓鞘較薄。②電鏡觀察結(jié)果:術(shù)后4周實(shí)驗(yàn)組再生纖維髓鞘規(guī)則，并可見(jiàn)增殖的雪旺細(xì)胞;對(duì)照組再生纖維髓鞘形態(tài)極不規(guī)則，排列紊亂。術(shù)后12周，實(shí)驗(yàn)組再生纖維髓鞘形態(tài)規(guī)則、較厚、內(nèi)表層完整;對(duì)照組則形態(tài)不規(guī)則、較薄、內(nèi)表層部分解離。

2.3 兩組術(shù)后4、12周再生有髓纖維數(shù)比較 見(jiàn)表1。

表1 兩組術(shù)后4、12周再生有髓纖維數(shù)比較(±s)

表1 兩組術(shù)后4、12周再生有髓纖維數(shù)比較(±s)

注:與術(shù)后同一時(shí)間對(duì)照組相比，*P＜0.05

組別 再生有髓纖維(條)橋接體遠(yuǎn)端 橋接體中段實(shí)驗(yàn)組術(shù)后4 周 70.67 ± 6.34* 68.82 ± 5.89*術(shù)后12 周 113.47 ±12.03* 84.24 ± 5.91*對(duì)照組術(shù)后4 周 62.24 ± 8.31 59.36 ±10.21術(shù)后12周82.32 ±14.57 73.36 ± 4.47

2.4 兩組術(shù)后4、12周傷側(cè)坐骨神經(jīng)MAP、MCV比較 見(jiàn)表2。

表2 兩組術(shù)后4、12周傷側(cè)坐骨神經(jīng)MAP、MCV 比較( ±s)

表2 兩組術(shù)后4、12周傷側(cè)坐骨神經(jīng)MAP、MCV 比較( ±s)

注:與術(shù)后同一時(shí)間對(duì)照組相比，*P＜0.05

組別 MAP(mV) MCV(m/s)實(shí)驗(yàn)組術(shù)后4 周 4.30 ±2.13* 9.25 ±3.01*術(shù)后12 周 6.90 ±2.53* 16.82 ±2.94*對(duì)照組術(shù)后4 周 2.20 ±1.56 4.45 ±2.26術(shù)后12周2.51 ±2.31 5.26 ±2.21

3 討論

周圍神經(jīng)損傷是骨科常見(jiàn)疾病，自體神經(jīng)移植是常用的治療方法［5，6］，然而神經(jīng)移植后再生速度非常慢，治療效果不理想。TRH可作用于機(jī)體很多器官和組織，對(duì)其生長(zhǎng)、代謝和組織分化等方面有重要影響［7］。TRH的作用由其受體介導(dǎo)，而 TRH受體廣泛存在于于大腦、脊髓背角和腹角及外周神經(jīng)等組織中。TRH對(duì)呼吸系統(tǒng)的作用主要表現(xiàn)為呼吸頻率增加、潮氣量稍減少、肺通氣量不變或略增加，微量TRH注入腦室或中樞核團(tuán)內(nèi)即可引起明顯的呼吸增快效應(yīng)［8］。TRH對(duì)心血管中樞也有明顯的興奮作用，主要表現(xiàn)為血壓升高、心率加快［9］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)TRH在通過(guò)增加交感神經(jīng)活動(dòng)而引起外周血管收縮、血壓升高的同時(shí)，對(duì)腦血管產(chǎn)生擴(kuò)張效應(yīng)，增加腦血流量，并伴有腦代謝增加。但TRH的腦血管擴(kuò)張作用只在腦血流量減少的情況下才出現(xiàn)，而對(duì)清醒動(dòng)物在正常血壓情況下，對(duì)腦血管阻力無(wú)作用。TRH以神經(jīng)遞質(zhì)或神經(jīng)調(diào)節(jié)物的形式作用于中樞神經(jīng)，促進(jìn)麻醉后意識(shí)和呼吸的恢復(fù)，增強(qiáng)乙酰膽堿誘發(fā)的興奮性反應(yīng)，對(duì)脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元具有類似谷氨酸的興奮性作用［8，9］。由此認(rèn)為，TRH可能是腦內(nèi)一種內(nèi)源性興奮性物質(zhì)，并在脊髓運(yùn)動(dòng)功能中起重要的調(diào)節(jié)作用［10］。

本研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)兔靜注TRH后4、12周，實(shí)驗(yàn)組再生纖維排列規(guī)整、結(jié)構(gòu)均勻，髓鞘厚，數(shù)量多，明顯優(yōu)于對(duì)照組。電生理檢查結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組損傷側(cè)坐骨神經(jīng)的MAP、MCV均優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明靜注TRH能夠有效促進(jìn)周圍神經(jīng)的再生。

本研究中實(shí)驗(yàn)組一次靜注的TRH劑量為40 μg，動(dòng)物均未出現(xiàn)甲亢的癥狀。用TRH治療外周神經(jīng)損傷時(shí)應(yīng)掌握適當(dāng)?shù)闹委焺┝?，這仍需進(jìn)一步研究。有學(xué)者［11］曾用TRH治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病，取得肯定的療效，且沒(méi)有甲亢和心功能障礙發(fā)生，這表明TRH有希望在合適濃度及劑量下安全應(yīng)用于人體。本研究為臨床應(yīng)用TRH靜注治療外周神經(jīng)損傷患者打下了理論基礎(chǔ)。

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