張 丹

湖南省長沙市省兒童醫(yī)院皮膚科，湖南長沙 410000

胎傳梅毒(Congenital syphilis，CS)又稱先天梅毒，是梅毒螺旋體經(jīng)由母體胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)使胎兒受染而引起的新生兒、嬰兒和兒童梅毒[1]。為了及時(shí)落實(shí)干預(yù)措施，對其進(jìn)行早期診斷十分重要。目前在胎傳梅毒的診斷中，主要是以臨床癥狀和血清學(xué)結(jié)合的方法來進(jìn)行判別。因此，探索早期、敏感和特異的實(shí)驗(yàn)室診斷策略就十分必要。本研究采用甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(Toluidine red unheated serum test，TRUST)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(T.pallidum particle agglutination，TPPA)和梅毒螺旋體免疫吸附試驗(yàn) (T.pallidum enzyme－ linked i mmunosorbent assay，TPELISA)3種技術(shù)，對157例胎傳梅毒患兒血清進(jìn)行檢測，現(xiàn)將比較結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院2009年1月—2011年8月共診斷出157例胎傳梅毒患兒，診斷符合《中國疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)一性病診斷標(biāo)準(zhǔn)》。其中年齡最小1d，最大3月，男性92例，女性65例。

1.2 試劑和方法

非特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)采用上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的TRUST試劑盒，特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)借助日本富士瑞必歐株氏會(huì)社生產(chǎn)的TPPA試劑盒用被動(dòng)血凝法檢測，以及上?？迫A生物工程股份公司生產(chǎn)的TP－IgMELISA試劑盒檢測IgM。所用試劑都在有效期內(nèi)，嚴(yán)格按照各試劑的說明書規(guī)范操作。

1.3 儀器

酶標(biāo)儀為 Bio－Rad MODEL680， 洗板機(jī)為 Bio－Rad MODEL1575，恒溫孵箱為廣州深華公司的GSP－9050MBE隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，不同方法間的差異比較采用McNemar非參數(shù)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α取0.05。

2 結(jié)果

所有樣本TPPA檢測均為陽性，3種血清學(xué)檢測全部為陽性者 93例。TRUST陽性檢出率為 59.24%， 與 TPPA、TP－IgMELISA檢測結(jié)果有明顯差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而TP－IgM－ELISA和 TPPA2組方法檢測結(jié)果的符合率為 98.09%（154/157），其檢測結(jié)果間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 157例梅毒抗體陽性者TRUST、TPPA和TP-IgM-ELISA檢測結(jié)果

3 討論

從抗原抗體反應(yīng)原理上看，現(xiàn)階段廣泛用于實(shí)際工作中的梅毒血清學(xué)檢測手段主要分為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)2組。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢測的是由螺旋菌誘導(dǎo)胞膜損傷產(chǎn)生的抗磷脂抗體（即反應(yīng)素）。此類試驗(yàn)操作簡單，成本低，是監(jiān)測療效的唯一推薦試驗(yàn)。但由于抗磷脂抗體為非特異性抗體，存在假陽性問題，受檢樣本的抗體濃度過高，也可能存在前帶反應(yīng)即假陰性問題[2]。TRUST試驗(yàn)就是其中一種，實(shí)際操作中在白色卡片上判讀紅色凝塊的陽性結(jié)果比較容易，操作簡便、快捷，文獻(xiàn)報(bào)道其檢出率和重復(fù)性強(qiáng)于快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）。本研究中TRUST的陽性檢出率為59.24%，漏檢率可見一斑。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)是用梅毒螺旋體或其成分做抗原來檢測樣本中的抗螺旋體抗體，具有較高的敏感性和特異性。應(yīng)用此類方法檢測到抗梅毒螺旋體抗體表明受檢者曾有暴露，但陽性結(jié)果并不能反應(yīng)受檢者治療情況，因此尚不能用于治療效果的評價(jià)。TPPA和TP－IgM－ELISA即屬此類。TPPA是將特異性梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上，以排除非特異性反應(yīng)，有較高敏感性和特異性。本研究結(jié)果顯示TPPA的陽性檢測率為100%，提示其敏感性好，且目前已被參比實(shí)驗(yàn)室用于確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，其特異性達(dá)到98%～100%[3]，較之具有同等敏感性熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA－ABS），成本相對較低，操作簡單。但在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，該方法所需試劑價(jià)格較貴，結(jié)果判讀不能自動(dòng)化，依賴于肉眼觀察，不適合應(yīng)用于大規(guī)模的樣本檢測。TP－IgM－ELISA借助了酶放大系統(tǒng)，使其敏感性并不低于TPPA，本研究結(jié)果證實(shí)了二者的符合率高達(dá)98.09%，且差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而且此法檢測的是血清TP－IgM水平，IgM相對分子量大，不能通過胎盤屏障，從理論上講，妊娠末3個(gè)月的胎兒如感染梅毒螺旋體，即可主動(dòng)合成針對病原菌的IgM抗體。因此，此法不但可作為梅毒活動(dòng)性感染的的監(jiān)測，且尤其適合早期胎傳梅毒的診斷。

綜上，本研究證實(shí)了TP－IgM－ELISA具有較高的診斷符合率，且操作便于標(biāo)準(zhǔn)化控制，實(shí)驗(yàn)試劑相對低廉，可以取代TRUST和TPPA作為胎傳梅毒的首選血清學(xué)診斷方法。

[1]陳祥生.該國梅毒流行現(xiàn)狀及防治策略[J].國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志,2008,35(2):73－77.

[2]黃志明,周佳慧,羅榮華，等.妊娠梅毒 TRUST滴度及產(chǎn)前干預(yù)對先天梅毒發(fā)病的影響[J].中國熱帶醫(yī)學(xué),2009,8(9):1408－1410.

[3]陳祥生.該國梅毒流行現(xiàn)狀及防治策略[J].國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志,2008,35(2):73－77.