楊麗杰，牟 陽(yáng)，王金華，胡寶榮，張 婧

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，黑龍江 哈爾濱 150001)

苯佐卡因軟膏為醫(yī)院制劑，是苯佐卡因單方制劑，具有局部麻醉作用，臨床用于皮膚瘙癢與黏膜和創(chuàng)面、潰瘍面及痔瘡的鎮(zhèn)痛等。目前醫(yī)院制劑質(zhì)量規(guī)范的含量測(cè)定方法為永停滴定法，而永停滴定儀的適用范圍較窄。本試驗(yàn)的目的是通過高效液相色譜法檢測(cè)苯佐卡因軟膏的含量，建立一個(gè)準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)方法。

1 儀器與試藥

Waters 600高效液相色譜系統(tǒng)(2996檢測(cè)器、717自動(dòng)進(jìn)樣器、Empower數(shù)據(jù)系統(tǒng));BP211D 10萬(wàn)分之一天平(德國(guó)Sartorius公司)。苯佐卡因?qū)φ掌?藥用原料，永停滴定法測(cè)得含量為99.2%);苯佐卡因軟膏(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬一院制劑室);甲醇為色譜純，水為超純水(自劑)，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

分析柱:SinoChrom ODS－BP 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:甲醇－水－冰醋酸(80∶20∶0.5);柱溫:25℃;流速:1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):291 nm。

2.2 溶液配制

取105℃干燥至恒重的苯佐卡因?qū)φ掌?00 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度搖勻，得苯佐卡因?qū)φ掌啡芤?質(zhì)量濃度為 100 μg/mL)。取苯佐卡因軟膏0.10 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇30 mL，置超聲水浴中加熱溶解(水浴溫度40℃)，待溶液降至室溫，加甲醇至刻度搖勻，得供試品溶液。另吸取空白基質(zhì)(除苯佐卡因外的軟膏基質(zhì))0.10 g，同法制備空白溶液。

2.3 波長(zhǎng)選擇及專屬性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液10 μL進(jìn)樣，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，得最大吸收波長(zhǎng)?？瞻兹芤汉凸┰嚻啡芤悍謩e進(jìn)樣10 μL。結(jié)果顯示苯佐卡因在291 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而其他成分在該波長(zhǎng)處無吸收，故選擇291 nm波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)，取空白基質(zhì)和苯佐卡因沒有干擾。將空白基質(zhì)和供試品按2.1項(xiàng)下操作所得溶液和對(duì)照品溶液，各取10 μL進(jìn)樣，得色譜圖。由圖1可見，方法專屬性強(qiáng)，且雜質(zhì)不影響主成分測(cè)定。

2.4 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:分別進(jìn)樣苯佐卡因?qū)φ掌啡芤?.5，5.0，10.0，15.0，20.0，30.0 μL，以對(duì)照品質(zhì)量濃度 C(μg/mL)為縱坐標(biāo)、峰面積 A為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y=1.19×106X －2.75 ×105，r=0.999886(n=6)。結(jié)果表明，苯佐卡因質(zhì)量濃度在2.50～40.00 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 高效液相色譜圖

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品適量，6份，置具塞錐形瓶中，分別加入苯佐卡因?qū)φ掌?份，按2.1項(xiàng)下條件測(cè)定供試品的苯佐卡因量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 苯佐卡因加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

精密度試驗(yàn):取同一批號(hào)樣品5份，用甲醇將樣品稀釋成含苯佐卡因約100 μg/mL的待測(cè)溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別測(cè)定其峰面積。結(jié)果其 RSD小于0.14%，表明方法精密度良好。

2.5 樣品含量測(cè)定

取3批樣品，按照2.2項(xiàng)下供試品溶液的配制方法處理樣品，進(jìn)樣10 μL，記錄峰面積值，計(jì)算樣品中藥物的標(biāo)示量百分含量。結(jié)果批號(hào)分別為20091013，20100104，20100305的樣品標(biāo)示百分含量分別為 100.08% ，101.30% ，99.96%。

3 討論

苯佐卡因軟膏為黑龍江省醫(yī)院制劑品種，筆者醫(yī)院制劑室生產(chǎn)該藥，療效得到了廣大醫(yī)療工作者的認(rèn)可，檢測(cè)方法為永停滴定法，但該方法存在檢測(cè)靈敏度不好、誤差較大的不足。文獻(xiàn)[3]報(bào)道了苯佐卡因脂質(zhì)體凝膠的檢測(cè)[3]。苯佐卡因軟膏有采用紫外分光光度法檢測(cè)的報(bào)道[1]，且有關(guān)苯佐卡因其他劑型的研究報(bào)道[2－3]，但未見苯佐卡因軟膏高效液相色譜法測(cè)定的報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在本試驗(yàn)條件下基質(zhì)成分對(duì)苯佐卡因的檢測(cè)沒有影響，具有出峰時(shí)間適當(dāng)，操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。因此，該方法可用于該制劑的含量測(cè)定。

[1]王 瑞，張 淼.紫外分光光度法測(cè)定苯佐卡因軟膏中苯佐卡因的含量[J].第一軍醫(yī)大學(xué)分校學(xué)報(bào)，2005，28(1):65－66.

[2]茅志安，姚健康，張 艷.高效液相色譜法測(cè)定炎痛凈乳膏中雙氯芬酸鈉和苯佐卡因的含量[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2002，19(2):149－150.

[3]單萍萍，郭 靜，申國(guó)慶.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定抗敏止癢水中兩組分含量[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2007，27(9):1319－1320.