賀志華

盆腔炎性疾病是青春期及育齡女性常見的病癥。可造成異位妊娠、不孕及慢性盆腔等，對(duì)現(xiàn)代女性的生活質(zhì)量影響很大。炎癥的發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞因子的異常表達(dá)關(guān)系密切，重癥急性盆腔炎時(shí)內(nèi)毒素可刺激多種細(xì)胞合成，釋放大量炎性遞質(zhì)。但目前對(duì)于感染引發(fā)的免疫紊亂缺乏理論依據(jù)，臨床亦缺乏有效的評(píng)估指標(biāo)。因此，研究盆腔炎性白細(xì)胞計(jì)數(shù)與促炎細(xì)胞因子的相關(guān)性，具有重要的理論意義和潛在的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008 年1 月—2011 年12 月在我院門診確診重癥急性盆腔炎患者31 例。入選患者均符合急性盆腔炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且就診前1 周內(nèi)無用藥史?；颊咂骄挲g(35.8±7.5) 歲，平均病程(41.5 ±7.5) h。

1.2 治療藥物 頭孢曲松鈉(羅氏芬) 由上海羅氏制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)： 國(guó)藥準(zhǔn)字H10983038?？祴D炎膠囊由山東神州制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)： 國(guó)藥準(zhǔn)字Z20055634。

1.3 試劑盒及檢測(cè)儀器 ELISA 檢測(cè)試劑盒： 白介素－l (IL－l) 、白介素－6 (IL－6) 、干擾素－γ (IFN－γ) 均由美國(guó)PeproTech 公司生產(chǎn)，北京尚柏生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司分裝，ELX800 酶標(biāo)儀美國(guó)BIO－TEKS 公司生產(chǎn)。檢測(cè)儀器采用法國(guó)生產(chǎn)的ABX PENTRA60 血細(xì)胞分析儀。

1.4 治療方法 康婦炎與羅氏芬聯(lián)合用藥組： 將2g 羅氏芬注射液加入500ml 的5%葡萄糖注射液內(nèi)，行靜脈滴注治療，1次/d，療程為10d，口服中藥康婦炎膠囊1.2g/次，2 次/d，服用14d，治療結(jié)束后取靜脈血檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。

1.5 檢測(cè)方法 采患者靜脈血，采用雙抗夾心ELISA 法，單抗包被于酶標(biāo)板上，兔標(biāo)本中的ck 會(huì)與單抗結(jié)合。加入生物素化的二抗，它將與結(jié)合在單抗上的ck 結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，未結(jié)合的將被洗去。辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin將與二抗的生物素結(jié)合，多余的物質(zhì)會(huì)被洗掉。加入TMB 顯色。具體操作按照ELISA kit 操作說明進(jìn)行。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的光密度值，作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算每一血清樣本IL－1、IL－6、IFN－γ 的濃度。計(jì)算時(shí)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD 值應(yīng)減去空白孔的OD 值。標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品濃度采用Cruve Expert 1.3 軟件計(jì)算。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s) 形式表示，采用t 檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)和促炎因子IL－1、IL－6 和IFN－γ 的檢測(cè)結(jié)果 治療后，患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)和促炎因子IL－1、IL－6 和IFN－γ 顯著降低，t 檢驗(yàn)P 值分別為0.034、0.023、0.016 和0.008 (見表1) 。

2.2 治療前后患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化值和促炎因子IL－1、IL－6、IFN－γ 表達(dá)水平變化值之間相關(guān)性分析 分別以31 為患者的白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化值與促炎因子IL－1、IL－6、IFN－γ 表達(dá)水平變化值之間之間進(jìn)行相關(guān)性分析，其相關(guān)系數(shù)分別為0.9392、0.94763、0.2968，說明急性盆腔炎血象與促炎因子IL－1 (見圖1) 、IL－6 (見圖2) 之間具有良好的相關(guān)性，與干擾素IFN－γ 無相關(guān)性(見圖3) 。

表1 治療前后白細(xì)胞計(jì)數(shù)、IL－1、IL－6、IFN－γ 含量比較(±s)Table 1 Comparison of the content of WBC，IL－1，IL－6，IFN－γ before and after treatment

表1 治療前后白細(xì)胞計(jì)數(shù)、IL－1、IL－6、IFN－γ 含量比較(±s)Table 1 Comparison of the content of WBC，IL－1，IL－6，IFN－γ before and after treatment

組別 白細(xì)胞計(jì)數(shù)(109/L)IL－1(pg/mL)IL－6(pg/mL)IFN－γ(pg/mL)2.1 186.32 ±32.21 198.63 ±56.12 126.37 ±49.17治療后治療前1.6 110.23 ±45.32 153.97 ±45.61 60.25 ±36.41

圖1 急性盆腔炎患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)與細(xì)胞因子IL－1 相關(guān)分析圖Figure 1 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IL－1

圖2 急性盆腔炎患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)與細(xì)胞因子IL－6 相關(guān)分析圖Figure 2 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IL－6

圖3 急性盆腔炎患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)與細(xì)胞因子IFN－γ 相關(guān)分析圖Figure 3 Correlation analysis diagram of white blood cell count in patients with acute pelvic inflammatory cytokines and IFN－γ

3 討論

細(xì)胞因子(cytokine，CK) 是由一些特定的細(xì)胞產(chǎn)生分泌的可溶性蛋白分子，為細(xì)胞間可溶性化學(xué)信號(hào)之一，通過靶細(xì)胞表面的受體，經(jīng)由特有的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，調(diào)節(jié)細(xì)胞的基因表達(dá)和其他功能，可通過激活淋巴細(xì)胞增殖分裂、活化巨噬細(xì)胞的行為。促炎細(xì)胞因子主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，包括IL－1、IL－6、IFN－γ 等。IL－1 主要由單核和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生［1］，可刺激單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL－6 和腫瘤壞死因子； 誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化； 刺激中性粒細(xì)胞釋放炎癥遞質(zhì)； 促進(jìn)肝細(xì)胞合成急性時(shí)相蛋白等。全身或局部誘發(fā)的IL－1 可有力地啟動(dòng)、加強(qiáng)、延長(zhǎng)神經(jīng)系統(tǒng)(CNS) 疾病的炎癥反應(yīng)，與IL－1 相應(yīng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的改變可使白細(xì)胞滲到炎癥區(qū)。IL－6 是多功能炎性細(xì)胞因子，是炎性遞質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵成分，在炎癥反應(yīng)中起重要作用［2］。作為抗炎性細(xì)胞因子或遠(yuǎn)期細(xì)胞因子可平衡前炎癥細(xì)胞因子或早期細(xì)胞因子的損傷效應(yīng)，起到一定的保護(hù)作用。血清中IL－6 的含量會(huì)有不同程度上升因此其水平可用來判斷病情嚴(yán)重程度及預(yù)后，IL－1 與IL－6 相互作用影響、關(guān)系密切。干擾素 (interferon，IFN)是多功能細(xì)胞因子家族中的一員，是生物體內(nèi)一種適應(yīng)性機(jī)體保護(hù)糖蛋白，是機(jī)體自身產(chǎn)生的一種抵御病毒入侵、維持機(jī)體或細(xì)胞功能自我穩(wěn)定的防御性物質(zhì)［3］。

本研究結(jié)果顯示，急性盆腔炎患者血白細(xì)胞數(shù)隨血漿，IL－1 與IL－6 水平增高而呈明顯增加趨勢(shì)，而IFN－γ 與白細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)之間無明顯相關(guān)性。提示急性盆腔炎時(shí)白細(xì)胞數(shù)目的異常變化可能是IL－1 與IL－6 對(duì)多形核中性粒細(xì)胞趨化作用的結(jié)果。

1 Huber AR，Kunkel SL，Todd RF，et al. Regulation of transendothelial neutrophil migration by endogenous interleukin－8 ［J］. Science，1991，254 (5028) ： 99－102.

2 Maymon E，Romero R，Paeora P，et al. Evidenece for the partieipatin of interstitial collagenase (matrix metalloproteinase l) in preterm premature rupture of the membranes ［J］. Am J Obstet Gyneeol，2000，183(4) ： 914－920.

3 余傳霖，葉天星，陸德源，等. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)免疫學(xué)［M］. 上海： 上海教育出版社，1998： 36－49.