蔡亞萍

（福州市工業(yè)產(chǎn)品生產(chǎn)許可證審查技術(shù)中心，福建 福州 350000）

滅多威為氨基甲酸酯類內(nèi)吸型廣譜殺蟲(chóng)劑，其穩(wěn)定性較差，尤其在通風(fēng)、日光或較高溫度下會(huì)迅速分解；滅多威代謝物為滅多威肟，化學(xué)分子式為C3H7NOS，相對(duì)分子量為105，其穩(wěn)定性比較高［1－2］。除蟲(chóng)脲的化學(xué)分子式為 C14H9ClF2N2O2，是屬于苯甲酰脲類農(nóng)藥，能夠抑制昆蟲(chóng)幾丁質(zhì)合成，使昆蟲(chóng)變態(tài)受阻，不能蛻皮而致死［3］。殺螟丹化學(xué)名稱為1，3－二－ （氨基甲酰硫）－2－二甲基氨基丙烷，是殺蠶毒素類殺蟲(chóng)劑，具有內(nèi)吸、胃毒、觸殺等多種作用，效果迅速，持效期長(zhǎng)，殺蟲(chóng)譜廣，對(duì)鞘翅目、半翅目、直翅目、薊馬等害蟲(chóng)均有很好的防治效果［4－5］。隨著人們對(duì)食品中農(nóng)藥殘留的意識(shí)也逐漸加強(qiáng)，農(nóng)藥殘留的監(jiān)測(cè)也日益受到重視。我國(guó)關(guān)于茶葉中滅多威的殘留量限量是3 mg／kg，除蟲(chóng)脲的限量是20mg／kg，殺螟丹的限量是20mg／kg。

目前在土壤、蔬菜和水果等基質(zhì)比較簡(jiǎn)單的樣品中對(duì)滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的殘留分析較多，而相對(duì)于基質(zhì)比較復(fù)雜的茶葉中對(duì)滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的殘留分析方法報(bào)道較少［6－19］。本研究采用HPLC－MS／MS法對(duì)茶葉中滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的殘留進(jìn)行分析，該方法具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，并在實(shí)際樣品檢測(cè)應(yīng)用中結(jié)果良好，能滿足日常茶葉中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析測(cè)定要求。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑

試驗(yàn)采用Agilent1200LC／6410MS色譜－串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。所用試劑均為色譜純，水為超純水。滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（1μg／mL）：分別準(zhǔn)確稱取1．0010g、1．0013g和1．0027g，用甲醇溶解定容10mL，再分別準(zhǔn)確量取10μL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容，得到1μg／mL混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，置于冰箱于4℃下保存。

1．2 色譜－質(zhì)譜條件

色譜條件：Agilengt Zorbax XDB C18色譜柱（2．1mm×50mm，3．5μm）；流動(dòng)相：乙腈－1‰甲酸水，流速：200μL／min，進(jìn)樣量10μL。

質(zhì)譜條件：滅多威、殺螟丹以電噴霧 （ESI）正離子電離模式；除蟲(chóng)脲以負(fù)離子模式電離。電噴霧電壓4000V；干燥氣 （氮?dú)猓囟?50℃，流量9．00L／min；霧化氣 （氮?dú)猓毫?75．8kPa；多反應(yīng)監(jiān)測(cè) （MRM）模式檢測(cè)，質(zhì)譜分析參數(shù)見(jiàn)表1。

1．3 試驗(yàn)方法

稱取粉碎茶樣約5g于50mL具塞三角瓶中，加25mL乙腈提取液，于 （43±2）℃的震蕩器中震蕩提取45min，冷卻后轉(zhuǎn)移至具塞試管或離心管靜置澄清。以5mL乙腈＋甲苯 （3∶1）預(yù)洗Cleanet TPT小柱，棄去淋洗液。加入2mL提取液，用25mL乙腈＋甲苯 （3∶1）洗脫液洗脫，KD瓶收集以上洗脫液。于45℃水浴上氮吹至干，加2mL甲醇溶解，過(guò)0．2μm濾膜，上機(jī)檢測(cè)。

表1 滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的質(zhì)譜分析參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2．1 萃取溶劑的選擇

滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹均屬于有機(jī)磷類農(nóng)藥。乙腈對(duì)極性物質(zhì)的提取效率比較好，從基體中提取的共提干擾物較少，相對(duì)于乙酸乙酯和正己烷等萃取溶劑來(lái)說(shuō)，選用乙腈作為萃取溶劑，對(duì)滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的提取效率較為理想。

2．2 凈化條件的選擇

對(duì)于茶葉樣品，考慮到樣品的極性及提取液中色素等大量復(fù)雜成分的存在，試驗(yàn)選用了Cleanet TPT小柱，以進(jìn)一步除去樣品中的復(fù)雜干擾物質(zhì)，達(dá)到較好的凈化效果。使用不同比例的乙腈、甲苯混合溶液作為洗脫溶劑時(shí)，當(dāng)乙腈、甲苯比例為3∶1能達(dá)到最好的洗脫效果，因此選擇乙腈＋甲苯（3∶1）溶液為洗脫液。

2．3 儀器條件的選擇

2．3．1 液相色譜條件的選擇 為了能更好實(shí)現(xiàn)3種農(nóng)藥的同步分離，對(duì)色譜方法的流動(dòng)相做了優(yōu)化。對(duì)比了乙腈＋甲酸水溶液、甲醇＋乙酸銨水溶液、甲醇＋甲酸水溶液、乙腈＋乙酸銨水溶液等4種流動(dòng)相的色譜效果。試驗(yàn)表明，用乙腈－1‰甲酸水進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，能達(dá)到較好分離效果。最終優(yōu)化的儀器條件為：色譜柱C18柱， （3．5μm，50mm×2．1mm）；流動(dòng)相： （A）1‰ 甲酸水溶液， （B）乙腈 （表2）；柱溫：30℃；流速：200 μL／min；進(jìn)樣量10μL。

2．3．2質(zhì)譜條件的選擇 滅多威、殺螟丹以電噴霧（ESI）正離子電離模式，除蟲(chóng)脲以負(fù)離子模式電離，實(shí)現(xiàn)3種農(nóng)藥的定性定量分析。

2．4 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

在儀器工作條件下對(duì)滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量濃度對(duì)其峰面積進(jìn)行線性回歸，結(jié)果 （表3）表明：3種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度在0．1～10μg／mL范圍內(nèi)呈線性。

2．5 方法的回收率

取6份茶葉各5．00g，分別加入適量的滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法處理后測(cè)定滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表3 回收試驗(yàn)結(jié)果 （n＝6）

表4 回收試驗(yàn)結(jié)果 （n＝6）

3 小結(jié)

本試驗(yàn)建立了HPLC－MS／MS檢測(cè)茶葉中的滅多威、除蟲(chóng)脲和殺螟丹的方法，采用乙腈－1‰甲酸水作為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，方法重現(xiàn)性好，操作簡(jiǎn)便，并且靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均符合農(nóng)藥殘留技術(shù)測(cè)定要求，適用于茶葉的日常檢測(cè)。

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