曾蔚欣，劉禮斌，唐菀晨，孫路路

跌打紫金丸是由土鱉蟲、乳香、沒(méi)藥、紅花、川芎、當(dāng)歸等15 味中藥材制備而成的大蜜丸，為傳統(tǒng)自擬處方制劑，臨床應(yīng)用多年，功能活血化瘀，通絡(luò)消腫。用于跌打損傷、閃腰岔氣、傷筋折骨等療效顯著。筆者對(duì)制劑中的8 味藥材進(jìn)行了鑒別，建立了該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 GB303 型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)，XSP－18S 型顯微鏡(南京江南光學(xué)儀器廠)，ZF－I 型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)，CQ50 超聲波清洗器(上海超聲儀器廠)，高效硅膠G 薄層板(20 cm×5 cm，安徽良臣硅源材料有限公司)。

1.2 試劑 跌打紫金丸(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院中藥制劑室生產(chǎn)，批號(hào):20110403)，水合氯醛、醋酸乙酯、環(huán)己烷、乙醚、苯、香草醛、硫酸均為分析純。

2 方法

2.1 顯微鑒別 (1)取跌打紫金丸1 丸，從中間切開(kāi)，挑取適量樣品，置載玻片中央，滴加水合氯醛試液2 滴，透化后裝片。置顯微鏡下觀察。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 樣品的制備 按制劑處方、制法和配制規(guī)程，制備跌打紫金丸樣品。

2.2.2 陰性對(duì)照品的制備 按制劑處方、制法和配制規(guī)程，制備跌打紫金丸陰性對(duì)照品3 份。其中第1 份不含當(dāng)歸、第2 份不含乳香、第3 份不含沒(méi)藥。

2.2.3 當(dāng)歸薄層色譜鑒別

2.2.3.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項(xiàng)下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，加醋酸乙酯30 ml，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? ml 溶解為供試品溶液。

2.2.3.2 陰性對(duì)照品溶液的制備 取2.2.2 項(xiàng)下制備的第1 份陰性對(duì)照樣品9 g，照供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.2.3.3 對(duì)照藥材溶液的制備 取當(dāng)歸對(duì)照藥材1 g，照供試品溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.3.4 薄層色譜法試驗(yàn) 參照中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述3 種溶液各5 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)距離15 cm，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。

2.2.4 乳香薄層色譜鑒別

2.2.4.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項(xiàng)下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，置具塞錐形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，間歇振搖3 次，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右颐? ml 使溶解，作為供試品溶液。

2.2.4.2 陰性對(duì)照品溶液的制備 取2.2.2 項(xiàng)下制備的第2 份陰性對(duì)照品9 g，照供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.2.4.3 對(duì)照藥材溶液制備 取乳香對(duì)照藥材1 g，照供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.4.4 照薄層色譜法試驗(yàn) 參照中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述三種溶液各5 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯－醋酸乙酯(19∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)距離15 cm，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。

2.2.5 沒(méi)藥薄層色譜鑒別

2.2.5.1 供試品溶液的制備 取2.2.1 項(xiàng)下制備的樣品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研勻，置具塞錐形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，間歇振搖3 次，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右颐? ml 使溶解，作為供試品溶液。

2.2.5.2 陰性對(duì)照品溶液的制備 取2.2.2 項(xiàng)下制備的第3 份陰性對(duì)照品9 g，照供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.2.5.3 對(duì)照藥材溶液制備 取沒(méi)藥對(duì)照藥材1 g，照供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.5.4 薄層色譜法試驗(yàn) 參照中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥB，吸取上述3 種溶液各5 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)距離15 cm，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。

3 結(jié)果

3.1 顯微鑒別結(jié)果 (1)土鱉蟲:體壁碎片黃色或棕紅色，有圓形毛窩，直徑8 ～24 μm，有的具長(zhǎng)短不一的剛毛;(2)熟大黃:草酸鈣簇晶大，直徑60 ～140 μm;(3)續(xù)斷:草酸鈣簇晶，直徑約45 μm，存在于淡棕色皺縮的薄壁細(xì)胞中，常數(shù)個(gè)排列成行;(4)紅花:花粉粒類圓形或橢圓形，直徑43 ～46 μm，外壁具短刺和點(diǎn)狀雕紋，有3 個(gè)萌發(fā)孔;(5)川芎:木栓細(xì)胞深黃棕色，表面觀呈多角形，微波狀彎曲。

3.2 薄層色譜鑒別結(jié)果

3.2.1 當(dāng)歸 供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)(Rf 值為0.58 和0.66)，陰性對(duì)照品相應(yīng)位置上無(wú)熒光斑點(diǎn)(圖1)。

3.2.2 乳香 供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)(Rf 值為0.25、0.42、0.57 和0.75)。陰性對(duì)照品相應(yīng)位置上無(wú)斑點(diǎn)(圖2)。

3.2.3 沒(méi)藥 供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)(Rf 值為0.33)。陰性對(duì)照品相應(yīng)位置上無(wú)斑點(diǎn)(圖3)。

4 討論

4.1 顯微鑒別 土鱉蟲的體壁、熟大黃、續(xù)斷的草酸鈣簇晶、紅花的花粉粒、川芎的木栓細(xì)胞各具顯著的顯微特征，在顯微鏡下易于識(shí)別。顯微鑒別法可作為上述五味藥材在本方中的定性鑒別方法。

4.2 薄層色譜鑒別

4.2.1 提取條件的選擇 文獻(xiàn)［1］報(bào)道的當(dāng)歸供試品溶液的制備較為復(fù)雜，耗時(shí)較長(zhǎng)。筆者簡(jiǎn)化了當(dāng)歸供試品溶液的制備，鑒別結(jié)果良好。乳香中含有約15 種萜類等揮發(fā)性成分及乳香酸等不揮發(fā)性成分［2－4］，沒(méi)藥亦含有約45 種揮發(fā)性成分［4］，二者均選用乙醚作為溶劑萃取。因乙醚極易揮發(fā)，無(wú)論采用回流提取，還是超聲提取的方法均對(duì)環(huán)境及操作者有很大的危害，故筆者采用“供試品中加入乙醚放置60 min，間歇振搖3 次，濾過(guò)”的提取方法。

4.2.2 展開(kāi)劑的選擇 在沒(méi)藥的薄層色譜研究中，曾以苯－醋酸乙酯(19∶1)為展開(kāi)劑［5］，薄層色譜顯示斑點(diǎn)重疊，展開(kāi)效果不理想。換用環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)后，薄層色譜主斑點(diǎn)分離較好。故采用環(huán)己烷－醋酸乙酯(8∶2)作為沒(méi)藥薄層色譜鑒別的展開(kāi)劑。

4.2.3 乳香、沒(méi)藥、當(dāng)歸3 味藥材的薄層色譜試驗(yàn)結(jié)果 斑點(diǎn)集中、層次清晰、重復(fù)性好，空白無(wú)干擾，具有可操作性，可作為上述3 味藥材在本方中的定性鑒別方法。

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