余 淵

湖北省黃石市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，湖北 黃石 435002

番茄紅素 (lycopene)是番茄中的紅色素，是胡蘿卜素的母體化合物，是迄今為止自然界中被發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)抗氧化劑之一［1］。番茄紅素可以有效地清除人體內(nèi)的自由基，使機(jī)體的器官和組織免受傷害，增強(qiáng)機(jī)體免疫力［2］。黃芪(Leguminosae)有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效?，F(xiàn)代藥理研究證明，黃芪有顯著的免疫增強(qiáng)作用。近年將番茄紅素與黃芪常常配伍使用 (如保健食品番茄紅素膠囊)，本實驗探討了番茄紅素黃芪顆粒對氣虛小鼠免疫功能的影響，現(xiàn)將實驗結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

昆明種小白鼠，體重20±2 g，購于湖北省疾控中心實驗動物研究中心 (批號:SCXK(鄂)2008－0005)。番茄紅素 (Lycored公司生產(chǎn)，110363)，黃芪顆粒 (江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:1106196)。

1.2 方法

1.2.1 實驗分組與給藥

100只小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組，模型組、番茄紅素黃芪高劑量組、番茄紅素黃芪中劑量組、番茄紅素黃芪低劑量組共5組。每組20只，10只供對臟器指數(shù)及血清溶血素形成的影響實驗使用，另外10只供小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測定實驗使用。按照60kg人體計算，藥物用量分為番茄紅素黃芪高劑量組 (黃芪30g、番茄紅素150mg)、番茄紅素黃芪中劑量組 (黃芪15g、番茄紅素75mg)、番茄紅素黃芪低劑量組 (黃芪3g、番茄紅素15mg)，小鼠用量按體重計算，為處方中人體用量的10倍。用純凈水稀釋成高、中、低濃度分組灌胃，空白對照組只灌胃給予等量的純凈水，每天1次，灌胃給藥14d，第5～10d，除空白組外，給藥物同時，皮下注射氫化可的松(50mg/kg)，后4d停止造模，空白組和模型組給于生理鹽水，其他各組給予藥物。

1.2.2 對臟器指數(shù)的影響［3］

治療組末次給藥后，小鼠稱重，頸椎脫臼處死，解剖，稱取脾臟、胸腺濕重，計算臟器指數(shù)。

臟器指數(shù)=臟器重量 (mg)/體重 (g)。

1.2.3 對血清溶血素形成的影響［4］

給藥第12d小鼠腹腔注射5% 雞紅細(xì)胞生理懸液0.2 mL進(jìn)行免疫，第14天取血分離血清。取血清0.2 mL加入裝有1 mL生理鹽水的反應(yīng)管中，隨后加入5% 雞紅細(xì)胞0.5 ml和10% 豚鼠血清1 mL。37℃溫育30 min，移至冰上終止反應(yīng)，離心取上清液1 mL加都氏試劑3 mL，搖勻放置10min，用分光光度計于540 nm波長讀取吸光度值。

1.2.4 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測定［3］

小鼠第14d給藥后腹腔注射1%雞紅細(xì)胞溶液，1～1.5h后將小鼠斷椎處死，腹腔注射1ml生理鹽水，按摩腹腔，在腹部中央將皮膚剪一小口，吸取約0.2ml腹腔液滴于載玻片上，水平涂片，將玻片放在濕盒內(nèi)，37℃孵育30min后，用生理鹽水沖洗，自然晾干后用Giemsa－wright染液染5min。再用生理鹽水淋洗。晾干后油鏡下觀察，計數(shù)200個巨噬細(xì)胞中吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)。

吞噬百分率=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/200巨噬細(xì)胞。

吞噬指數(shù)=被吞噬雞紅細(xì)胞數(shù)/200巨噬細(xì)胞。

2 結(jié)果

2.1 對臟器指數(shù)的影響

與空白對照組比較，模型組胸腺和脾臟臟器指數(shù)均明顯減低 (P＜0.01)。與模型對照組相比較，番茄紅素黃芪高、中劑量組胸腺和脾臟臟器指數(shù)均明顯增加 (P＜0.01，P＜0.05)，番茄紅素黃芪低劑量組胸腺和脾臟臟器指數(shù)有增加，但差異不明顯 (P＞0.05)，見表1。

表1 各組小鼠胸腺和脾臟臟器指數(shù)比較 (mg/g，x±SD)

2.2 番茄紅素黃芪對血清溶血素形成的影響

番茄紅素黃芪對血清溶血素形成的影響結(jié)果見表2。與空白組比較，模型組溶血素下降明顯 (P＜0.05)。番茄紅素黃芪高、中、低劑量組明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。番茄紅素黃芪高、中劑量組已恢復(fù)到正常水平，與正常組比較，P＞0.05。

表2 番茄紅素黃芪對血清溶血素形成的影響結(jié)果(x±SD)

2.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測定結(jié)果

番茄紅素黃芪對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響結(jié)果見表3。與模型組比較，番茄紅素黃芪各組均能增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能，中、高劑量組效果更明顯，低劑量組P ＜0.05，中、高劑量組P ＜0.01。

表3 番茄紅素黃芪對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 (x±SD)

3 討論

胸腺與脾臟是機(jī)體重要的免疫器官，巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)中最先對抗原產(chǎn)生反應(yīng)的細(xì)胞之一，巨噬細(xì)胞吞噬功能是反映非特異性免疫功能的常用指標(biāo)之一。溶血素能間接反應(yīng)抗體生成的多少，而抗體是血清殺滅病原體的重要活性物質(zhì)，是體液免疫的標(biāo)志。

番茄紅素和黃芪單用均具有增強(qiáng)免疫的作用，本實驗選用免疫器官、血清溶血素、巨噬細(xì)胞吞噬功能三種測定免疫功能的方法來研究番茄紅素黃芪配伍對免疫低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示番茄紅素黃芪顆粒能明顯提高小鼠免疫器官增長指數(shù)、增加巨噬細(xì)胞吞噬功能、提高血，(3g、15mg)也有調(diào)節(jié)作用。本實驗為番茄紅素和黃芪增強(qiáng)免疫的臨床應(yīng)用提供了客觀實驗依據(jù)。

［1］梅曉巖，孟憲軍，梁婧婧．番茄紅素抗氧化活性的研究［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34(11):2315－2317．

［2］張月華，韓婷，蔡頌文．番茄紅素的生理功能及其臨床意義［J］．公共衛(wèi)生與臨床醫(yī)學(xué)，2009，5(3):211－216．

［3］中華人民共和國衛(wèi)生部．保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范［S］．2003．

［4］羅曉麗，楊侃，孫明．黃芪扶正湯對免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)功能［J］．中南大學(xué)學(xué)報 (醫(yī)學(xué)版)，2009，34(6):555－558．