吳學(xué)煒，付光宇，王 瑞，史小芹，胡秀麗

(鄭州安圖綠科生物工程有限公司，河南 鄭州 450016)

在全世界范圍內(nèi)，卵巢癌是導(dǎo)致婦女癌癥相關(guān)死亡中的第4大常見(jiàn)原因。卵巢癌早期癥狀不明顯，無(wú)成熟的早期診斷方法，因此，大多數(shù)患者在確診時(shí)已是晚期［1］。卵巢癌5 a生存率約20% ～30%。80%左右的卵巢癌患者表達(dá)CA125，約有20%卵巢癌患者不表達(dá)CA125，并且血清中CA125的敏感性與腫瘤分期有關(guān)，約有50%的Ⅰ期患者CA125升高，而Ⅳ、Ⅴ期可達(dá)到80% ～90%［2］。人附睪上皮分泌蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)在正常卵巢組織中低表達(dá)，在卵巢癌組織中過(guò)度表達(dá)，尤其在鑒別診斷良性盆腔腫瘤和卵巢癌病變時(shí)具有重要意義。HE4與CA125有相似的敏感性，與盆腔良性疾病相比，HE4對(duì)于盆腔惡性腫瘤患者的特異性更高，而且使用卵巢惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)模型(risk of ovarian malignancy algorithm，ROMA)可以幫助評(píng)估患上皮細(xì)胞型卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)性，作者綜合評(píng)估將HE4、CA125聯(lián)合ROMA在卵巢癌及盆腔良性疾病中的診斷意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2010年2月至2012年4月經(jīng)病理學(xué)確診的患者共計(jì)203例，其中卵巢癌患者68例，年齡 38 ～83 歲，平均年齡(55.93 ±11.82)歲;盆腔良性疾病患者135例(包括子宮肌瘤32例，卵巢囊腫48例，子宮內(nèi)膜異位55例)，年齡35～79歲，平均年齡(45.96±9.47)歲。隨機(jī)選取健康體檢女性40例作為健康女性對(duì)照者，年齡36～74歲，平均年齡(53.9 ±11.64)歲。

1.2 方法 所有受試對(duì)象均清晨空腹靜脈采血，置于未加抗凝劑的真空采血管中，室溫靜置15 min，離心(3000 r·min－1，10 min)后取上清，置于 －80 ℃冰箱待測(cè)。血清HE4測(cè)定ELISA試劑盒購(gòu)自瑞典康乃格公司;血清CA125測(cè)定使用美國(guó)Abbott公司Architect CA125試劑盒。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) HE4＞150 mol·L－1為陽(yáng)性，CA125＞35 u·mL－1為陽(yáng)性，根據(jù)康乃格HE4說(shuō)明書(shū)中的用于評(píng)估絕經(jīng)前和絕經(jīng)后的盆腔腫瘤婦女患有上皮細(xì)胞型卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)的惡性卵巢癌計(jì)算公式來(lái)計(jì)算每個(gè)樣本的預(yù)測(cè)指數(shù)PI。絕經(jīng)前婦女:預(yù)測(cè)指數(shù)(PI)=－12.0+2.38×LN［HE4］+0.0626 × LN［CA125］，絕經(jīng)后婦女:預(yù)測(cè)指數(shù)(PI)= －8.09+1.04 × LN［HE4］+0.732 ×LN［CA125］，ROMA 值(%)=exp(PI)/［1+exp(PI)］×100。

患惡性卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估計(jì)算公式用于將婦女歸以發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞型卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)分組。為了保證HE4和CA125的特異性水平為75%，使用了下列臨界點(diǎn)。絕經(jīng)前婦女:ROMA值≥12.9%=具有上皮細(xì)胞型卵巢癌的高風(fēng)險(xiǎn)性，ROMA值＜12.9%=具有上皮細(xì)胞型卵巢癌的低風(fēng)險(xiǎn)性;絕經(jīng)后婦女:ROMA值≥24.7%=具有上皮細(xì)胞型卵巢癌的高風(fēng)險(xiǎn)性，ROMA值＜24.7%=具有上皮細(xì)胞型卵巢癌的低風(fēng)險(xiǎn)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以ˉx±s表示，比較用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組患者血清中HE4、CA125水平及ROMA值

卵巢癌組HE4、CA125水平和ROMA值高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)。盆腔良性疾病組CA125水平和ROMA值高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);盆腔良性疾病組HE4水平與健康組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。提示HE4單項(xiàng)檢測(cè)在婦科良惡性疾病鑒別診斷中有重要意義。見(jiàn)表1。

表1 不同患者血清中HE4、CA125和ROMA水平比較

2.2 HE4、CA125和ROMA值的敏感性和特異性比 較結(jié)果 見(jiàn)表2。

表2 不同患者HE4、CA125和ROMA值敏感性和特異性比較 %

3 討論

CA125是卵巢上皮性類癌的相關(guān)性抗原，由胚胎期上皮細(xì)胞所分泌，在上皮性卵巢惡性腫瘤細(xì)胞中高度表達(dá)［3］。血清CAl25是卵巢癌尤其是卵巢漿液性癌的首選標(biāo)志物。但臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，在早期上皮性卵巢癌中不到50%的患者CAl25水平升高，大約有20%的上皮性卵巢癌不表達(dá)CA125，但在其他婦科良性疾病及生理?xiàng)l件下CA125可陽(yáng)性表達(dá)，進(jìn)而限制了血清CA125的臨床應(yīng)用。

HE4(又稱WFDC2)蛋白結(jié)構(gòu)含4個(gè)二硫鍵核心區(qū)域的乳清酸性蛋白家族，HE4基因編碼一段長(zhǎng)度為13000的蛋白，在其成熟的糖基化形式時(shí)，該蛋白相對(duì)分子質(zhì)量約為20000～25000，是包含有2個(gè)WFDC結(jié)構(gòu)域的單鏈［4－6］。HE4首先在附睪遠(yuǎn)端的上皮組織中被發(fā)現(xiàn)，并且被認(rèn)為可能是一種與精子成熟相關(guān)的蛋白抑制劑。HE4在多個(gè)正常組織(包括呼吸道和生殖道組織以及卵巢癌組織)的上皮內(nèi)均有所表達(dá)。不僅在細(xì)胞水平上有所表達(dá)，分泌型HE4已經(jīng)在卵巢癌患者的血清中檢測(cè)到有高水平表達(dá)［3－5，7－8］。作為診斷上皮性卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物，HE4具有無(wú)可比擬的優(yōu)越性。Havrilesky等［9］通過(guò)檢測(cè)不同分期的卵巢癌患者血清中的 HE4發(fā)現(xiàn)，Ⅰ、Ⅱ期的敏感性為82.70%，Ⅲ期為92.50%，特異性為 86.30%。HE4 在卵巢癌早期(Ⅰ、Ⅱ期)其診斷敏感性(64.3%)高于CA125(42.9%)，兩者聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率在卵巢癌Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期高于任一單項(xiàng)檢測(cè)。

本研究中選取了卵巢癌組、盆腔良性疾病組與健康對(duì)照組進(jìn)行血清HE4和CA125水平比較，結(jié)果顯示，卵巢癌組血清HE4、CA125水平高于健康對(duì)照組，盆腔良性疾病組血清CA125水平高于健康對(duì)照組，而HE4水平與健康對(duì)照組相近，提示HE4在盆腔良惡性疾病鑒別診斷中明顯優(yōu)于CA125。單項(xiàng)檢測(cè)HE4的敏感性和特異性均高于CA125，HE4和CA125聯(lián)合檢測(cè)有助于早期發(fā)現(xiàn)上皮性卵巢癌。絕經(jīng)前HE4和CA125特異性分別是100.00%和74.53%，也說(shuō)明了HE4對(duì)于卵巢癌的早期診斷具有重要意義。

本研究結(jié)果還顯示，絕經(jīng)后患者ROMA值風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的敏感性和診斷符合率分別為88.68%和86.59%，較HE4和CA125單項(xiàng)都高，在臨床上可提高上皮性卵巢癌診斷的敏感度。而絕經(jīng)前后，ROMA值陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為31.43%、90.38%，敏感性分別為73.33%、88.68%，特異性分別為 77.36%、82.76%，絕經(jīng)前，CA125假陽(yáng)性樣本的升高致使ROMA值的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值降低，這正說(shuō)明了ROMA值為什么主要用于絕經(jīng)后預(yù)測(cè)上皮性卵巢癌的原因。Molina等［2］認(rèn)為HE4作為一種新的腫瘤標(biāo)志物，與CA125聯(lián)合，通過(guò)ROMA方法，絕經(jīng)前后陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別44.40%、88.90%，敏感性分別為 74.10%、95.20%，特異性分別為88.90%、83.10%，與本研究結(jié)果一致［1］。

由于ROMA是應(yīng)用國(guó)外患者資料建立的經(jīng)驗(yàn)?zāi)Ｐ停詫?duì)于我國(guó)患者的情況，還需要結(jié)合臨床、病史對(duì)上皮性卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)價(jià)值加以驗(yàn)證。

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