王衛(wèi)華，盧曉華，徐銳鋒，張慶合

（中國計(jì)量科學(xué)研究院化學(xué)所，北京 100013）

醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)分析

王衛(wèi)華，盧曉華，徐銳鋒，張慶合

（中國計(jì)量科學(xué)研究院化學(xué)所，北京 100013）

介紹了由中國計(jì)量科學(xué)研究院化學(xué)所負(fù)責(zé)實(shí)施的醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)情況，并針對(duì)該項(xiàng)目的檢測(cè)方法、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇、前處理方法等進(jìn)行了技術(shù)分析。21家參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)室對(duì)樣品1檢測(cè)結(jié)果滿意率85.7%，樣品2結(jié)果滿意率100%。建議實(shí)驗(yàn)人員在檢測(cè)中可通過空白加標(biāo)或應(yīng)用質(zhì)控樣品等手段提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。

3-氯-1，2-丙二醇；醬油；比對(duì)

氯丙醇具有致癌、生殖毒性等危害，其中以3-氯-1，2-丙二醇最為常見［1］。3-氯-1，2-丙二醇對(duì)食品的污染主要源于添加酸水解植物蛋白（HVP），我國在SB 10338–2000 《酸水解植物蛋白調(diào)味液》［2］中規(guī)定其最大允許限量為1 mg/kg，而在《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》征求意見稿中，擬將3-氯-1，2-丙二醇的限量定為0.4 mg/kg。由于食品中3-氯-1，2-丙二醇的測(cè)定涉及到多種前處理手段，操作較為復(fù)雜，中國計(jì)量科學(xué)研究院化學(xué)所選擇醬油中3-氯-1，2-丙二醇的測(cè)定項(xiàng)目組織了實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，用于了解各實(shí)驗(yàn)室在該檢測(cè)領(lǐng)域的整體水平，提升檢測(cè)能力。

1 參加實(shí)驗(yàn)室

此次比對(duì)報(bào)名參加的實(shí)驗(yàn)室共25家，每個(gè)參加實(shí)驗(yàn)室被賦予唯一實(shí)驗(yàn)室代碼，比對(duì)相關(guān)報(bào)告均按代碼標(biāo)識(shí)參加實(shí)驗(yàn)室。最終收回結(jié)果21家，均為國家級(jí)或省級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu)，具有醬油中氯丙醇測(cè)試項(xiàng)目的檢驗(yàn)資質(zhì)。

2 樣品制備

為考察實(shí)驗(yàn)室在SB10338–2000 《酸水解植物蛋白調(diào)味液》以及征求意見中的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2762 《食品中污染物限量》中分別規(guī)定的2個(gè)限量水平以及檢測(cè)限附近的檢測(cè)能力，設(shè)計(jì)了本底樣品以及0.4 mg/kg和1.0 mg/kg附近兩個(gè)濃度水平的樣品，每個(gè)濃度水平配制兩份樣品，最終配制濃度為樣品1：0.36，0.44 mg/kg，樣品2：0.90，1.10 mg/kg，每個(gè)濃度水平抽取1份樣品發(fā)放到比對(duì)實(shí)驗(yàn)室。

測(cè)試樣品的制備采用向釀造醬油中添加3-氯-1，2-丙二醇的方法。經(jīng)過對(duì)市場(chǎng)樣品的篩查，選擇質(zhì)量較為穩(wěn)定、未檢出3-氯-1，2-丙二醇的釀造醬油為原料。取足量原料置于潔凈的聚乙烯塑料桶中充分混合，靜置消泡后用于樣品制備。為了保證制備樣品的均勻性，采用3-氯-1，2-丙二醇水溶液進(jìn)行添加，根據(jù)設(shè)計(jì)的樣品濃度向醬油中添加適量溶液，以低速電磁攪拌方式充分混合樣品4 h以上，靜置過夜。最后將添加樣品及本底樣品均分裝至20 mL潔凈安瓿瓶中，于常溫下保存。

抽取樣品進(jìn)行均勻性測(cè)試，經(jīng)檢驗(yàn)證明制備的樣品均勻性良好。根據(jù)文獻(xiàn)［3］，醬油中3-氯-1，2-丙二醇穩(wěn)定性在兩個(gè)月以上，本次比對(duì)從發(fā)送樣品到回收結(jié)果報(bào)告僅用不到一個(gè)月時(shí)間，并在收回所有結(jié)果后對(duì)留存樣品進(jìn)行了測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明4個(gè)濃度添加樣品穩(wěn)定性良好。

3 比對(duì)結(jié)果

考慮到此次比對(duì)參加實(shí)驗(yàn)室數(shù)量較少，采用中位值、平均值等統(tǒng)計(jì)結(jié)果不能很好地反映各實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)，比對(duì)實(shí)施機(jī)構(gòu)在完成樣品制備后，也對(duì)樣品進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果證明測(cè)定值與制備值無明顯偏差，因此確定以樣品制備濃度值為指定參考值進(jìn)行結(jié)果判定。

由于樣品1和樣品2分別對(duì)應(yīng)兩個(gè)濃度，為便于數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，采用相對(duì)值進(jìn)行計(jì)算。對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果，按式(1)計(jì)算Z值：

式中：x——實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果；

X——指定參考值；

σ——變動(dòng)性度量值（目標(biāo)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差）。

以Z值評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果，若∣Z∣≤2，檢測(cè)結(jié)果為滿意；若2＜∣Z∣＜3，檢測(cè)結(jié)果為有問題；若∣Z∣≥3，檢測(cè)結(jié)果為不滿意或離群值。為了清晰表示各實(shí)驗(yàn)室參加本次考核活動(dòng)的結(jié)果，繪制了Z比分?jǐn)?shù)柱狀圖，見圖1、圖2。

結(jié)果表明，樣品1的比對(duì)結(jié)果中，代碼為9，20的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果為可疑；代碼為17的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果為不滿意；其余18家實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果均為滿意，占85.7%；樣品2的檢測(cè)結(jié)果均為滿意。

圖2 樣品2測(cè)定結(jié)果Z比分分布圖

4 技術(shù)分析

本次比對(duì)結(jié)果表明，大部分參加的實(shí)驗(yàn)室均具備3-氯-1，2-丙二醇檢測(cè)能力，但仍有少量實(shí)驗(yàn)室對(duì)較低濃度樣品的測(cè)定結(jié)果不滿意。從國際限量來看，歐盟對(duì)調(diào)味品中氯丙醇的限量為0.02 mg/kg［4］，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平提出更為嚴(yán)格的要求?，F(xiàn)根據(jù)比對(duì)信息進(jìn)行技術(shù)分析，以供相關(guān)檢測(cè)人員參考。

4.1 檢測(cè)方法

此次比對(duì)除代碼為003，024，025三家實(shí)驗(yàn)室采用了GB/T 18782–2002 《調(diào)味品中3-氯-1，2-丙二醇的測(cè)定》中規(guī)定的GC/MS外標(biāo)法測(cè)定外，其余實(shí)驗(yàn)室均采用GB/T 5009.191–2006 《食品中氯丙醇含量的測(cè)定》中規(guī)定的第一法——內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定，此次比對(duì)中兩種檢測(cè)方法得到的檢測(cè)結(jié)果無顯著性差異。根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，采用外標(biāo)法測(cè)定醬油中氯丙醇對(duì)實(shí)驗(yàn)操作要求較高，容易出現(xiàn)回收率不穩(wěn)定，導(dǎo)致結(jié)果偏差，而內(nèi)標(biāo)法可以對(duì)因?qū)嶒?yàn)、操作條件波動(dòng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成的影響起到很好的校正作用，定量結(jié)果相對(duì)穩(wěn)定，方法更為可靠。

4.2 選用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)室使用的3-氯-1，2-丙二醇純品分別來自Dr. E，SIGMA–ALDRICH，West-Chester，Chem. Service，純度標(biāo)稱值均在98%以上，3-氯-1,2-丙二醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來自中國計(jì)量科學(xué)研究院。內(nèi)標(biāo)純品分別來自Cambrige，CDNISOTOPES，SIGMA–ALDRICH，CIL，Dr. E，純度標(biāo)稱值均在98%以上，內(nèi)標(biāo)溶液來自中國計(jì)量科學(xué)研究院。從結(jié)果看不同來源的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)本次考核結(jié)果無影響，但從實(shí)驗(yàn)室使用便利性以及成本方面來考慮，使用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)更有優(yōu)勢(shì)。

4.3 樣品前處理方法

前處理主要使用國標(biāo)方法中自制Extrelut NT填料玻璃層析柱，少量實(shí)驗(yàn)室使用了固相萃取柱。根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，自制的層析柱由于每次填料力度不同，無法保證穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，導(dǎo)致樣品的回收率不穩(wěn)定；而商品化的固相萃取柱，柱子間差異不大，理論上回收率應(yīng)較穩(wěn)定。但是目前在測(cè)定醬油中氯丙醇時(shí)使用固相萃取柱進(jìn)行前處理的相關(guān)研究及文獻(xiàn)報(bào)道較少，不同的固相萃取柱在實(shí)驗(yàn)條件、結(jié)果準(zhǔn)確性、重復(fù)性等方面的差別還須進(jìn)一步研究和考察，以形成可推廣的前處理方法。

從衍生化條件來看，比對(duì)中各實(shí)驗(yàn)室使用的衍生化時(shí)間有20 min和30 min，衍生溫度為70℃和75℃，從結(jié)果看上述條件變化對(duì)本次考核結(jié)果無影響。七氟丁?；[唑衍生試劑在使用和保存過程中易受潮，可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，而層析柱中無水硫酸鈉的添加量若不足會(huì)導(dǎo)致除水不完全，不僅影響洗脫速度，多余的水分也會(huì)影響衍生效果。

5 結(jié)論

在即將頒布的GB 2762食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品中污染物限量》中，擬將3-氯-1，2-丙二醇的限量定為0.4 mg/kg，本次考核活動(dòng)中，在該限量水平，仍有個(gè)別實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果可疑或不滿意結(jié)果，應(yīng)分析檢測(cè)結(jié)果不確定度來源，加強(qiáng)該項(xiàng)目質(zhì)量控制，通過空白加標(biāo)實(shí)驗(yàn)或應(yīng)用質(zhì)控樣品等手段，加強(qiáng)對(duì)前處理和測(cè)定環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。

［1］ 劉紅麗，李永利，解魁，等.市售醬油中3-氯-1，2-丙二醇的測(cè)定［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2004，14(3): 342.

［2］ SB 10338–2000 酸水解植物蛋白調(diào)味液［S］.

［3］ 佟克興.醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測(cè)能力驗(yàn)證［J］.理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊(cè)，2008，44(4): 380–383.

［4］ 秦紅梅，金一和，黃飚，等.食品中3-氯丙醇的污染狀況及其毒性研究進(jìn)展［J］.中國公共衛(wèi)生，2002，18(12): 1 519–1 521.

Interlaboratory Comparison for Test Result on 3-chloro-1,2-propanediol in Soy Sauce

Wang Weihua， Lu Xiaohua， Xu Ruifeng， Zhang Qinghe
(National Institute of Metrology， P. R. China， Beijing 100013, China)

An interlaboratory comparison on 3-chloro-1，2-propanediol determination in soy sauce was performed by National Institute of Metrology. Result was discussed, and technical analysis was proceeded aim at the determination method，reference standard selection and pretreatment method. The satis fi ed rate of sample 1 was 85.7%, and sample 2 was 100% among 21 laboratories. Proceeding recovery rate experiments or using quality control samples were suggested in order to improve the accuracy of the test.

3-chloro-1,2-propanediol; soy sauce; interlaboratory comparison

O656.32

A

1008–6145(2012)03–0089–03

10.3969/j.issn.1008–6145.2012.03.025

聯(lián)系人：王衛(wèi)華；E-mail: wangwh@nim.ac.cn

2012–03–08