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        高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量

        2012-06-09 16:03:39鄧云天時(shí)東海
        關(guān)鍵詞:冰醋酸咳喘綠原

        鄧云天 時(shí)東海

        (1 江蘇省蘇州君安藥業(yè)有限公司,蘇州215129;2 江蘇省蘇州雷奧生物科技有限公司,蘇州215104)

        高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量

        鄧云天1時(shí)東海2

        (1 江蘇省蘇州君安藥業(yè)有限公司,蘇州215129;2 江蘇省蘇州雷奧生物科技有限公司,蘇州215104)

        目的 建立高效液相色譜法測定小兒咳喘口服液中綠原酸的含量。方法 Agela Promosil C18(250mm×4mm,5μm)分析柱,流動(dòng)相為乙腈∶1%冰醋酸(11∶89),流速為1.0ml?min-1,檢測波長為327nm。結(jié)果 綠原酸與其他組分分離良好。線性范圍為0.1032~1.032μg,相關(guān)系數(shù)r=0.9998,平均加樣回收率為98.93%(RSD= 0.4%)。結(jié)論 本法簡便、準(zhǔn)確可靠,可用于該藥的質(zhì)量控制。

        高效液相色譜;小兒咳喘口服液;綠原酸

        1 儀器與試藥

        儀器高效液相色譜儀戴安U3000,Sartorias電子天平(CPA-225D);綠原酸(110753-200413),中國藥品生物制品檢定所提供小兒咳喘口服液為市售品;試藥甲醇、乙腈為色譜純,其余試劑均為分析純,水為超純水。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件 色譜柱:Agela Promosil C18 (4.6mm× 100mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈∶1%冰醋酸(11∶89),流速為1.0mL?min-1,檢測波長為327nm,柱溫為30℃,進(jìn)樣量10μl。

        2.2 溶液的制備 精密稱定綠原酸對照品10.32mg,用甲醇制成濃度為20.64μg?mL-1的溶液,作為對照品溶液(見圖1)。精密量取本品1ml,精密加入60%甲醇1ml搖勻,作為供試品溶液(見圖2)。按處方中稱取除金銀花外的藥材適量,照文獻(xiàn)[1]中方法制得陰性對照溶液(見圖3)。

        2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 在上述條件色譜下,精密吸取上述對照品溶液5、10、20、30、50μl,注入液相色譜儀,測得峰面積。以對照品峰面積為縱坐標(biāo),以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,并以最小二乘法計(jì)算得回歸方程:Y = 321451X+6851,Y =0.9998,綠原酸在0.1032μg~1.032μg范圍內(nèi)有良好線性關(guān)系。

        2.4 精密度試驗(yàn) 取同供試品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,結(jié)果綠原酸RSD為0.68%(n=6)。

        2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液,間隔4h進(jìn)樣1次,共間隔24h,結(jié)果綠原酸RSD為1.01%(n=7)。

        2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號樣品6份,分別按本法處理后進(jìn)行測定,結(jié)果綠原酸平均含量為41.11μg?ml-1,RSD為1.33%(n=6)。

        2.7 加樣回收試驗(yàn) 精密量取已知含量的小兒咳喘口服液6份1ml,精密加入對照品溶液1ml、1ml、2ml、 2ml、3ml、3ml,照本法制備供試品溶液,按本法進(jìn)行含量測定并計(jì)算回收率見表1。

        2.8 樣品的測定 精密量取3個(gè)批號的樣品各2份,按本法制得供試品溶液,按本法進(jìn)行含量測定結(jié)果批號為20111203,20111010,20120111的樣品綠原酸含量分別為41.11μg?ml-1,39.41μg?ml-1,45.37μg?ml-1。

        3 討論

        曾用不同比例甲醇-0.4%磷酸,甲醇-1%冰醋酸,乙腈-0.4%磷酸,乙腈-1%冰醋酸作為流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn),其中以乙腈-1%冰醋酸作為流動(dòng)相,綠原酸保留時(shí)間適中,而且能有效抑制綠原酸拖尾現(xiàn)象,基線平穩(wěn),綠原酸峰處無干擾雜質(zhì)峰。該方法簡單準(zhǔn)確,可行,可用于綠原酸的質(zhì)量控制。

        表1 樣品中綠原酸回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

        圖1 對照品

        圖2 樣品

        圖3 陰性對照

        [1] 中國國家藥典委員會(huì)·中華人民共和國藥典2010年版一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:485

        Determination of Chlorogenic Acid Pediatric Kechuan Oral Liquid By HPLC

        Deng yuntian1Shi donghai2(1 Jiangsu Suzou Junan Medical Corporation,Suzhou 215129,China; 2 Jiangsu Suzou Leiao Biological Science and Technology Ltd, Suzhou 215104 ,China)

        Objective To establish a HPLC method for the determination of pediatric Kechuan oral liquid on the content of chlorogenic acid. Methods Agela Promosil C18(250mm×4mm,5μm) column, the mobile phase consisted of acetonitrile -1% glacial acetic acid (11∶89), the flow rate was 1.0ml?min-1, the detection wavelength was 327 nm. Results Chlorogenic acid and other components were separated well. The linear range was 0.1032~1.032μg, the correlation coefficient r=0.9998, the average recovery rate was 98.93% (RSD= 0.4%). Conclusion This method is simple, accurate and reliable, and can be used for the quality control of drugs.

        High performance liquid chromatography; Pediatric Kechuan oral liquid; Chlorogenic acid

        10.3969/j.issn.1672-2779.2012.15.108

        1672-2779(2012)-15-Ⅲ-01

        蘇玲

        2012-06-07)

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