劉傳喜 阮 崢 丁 旭
(吉林大學第四醫(yī)院,吉林 長春 130011)
新生兒溶血病在我國由于ABO血型及Rh血型不不合造成的新生兒溶血?。℉ND),前者較為常見。研究證實孕婦產前IgG抗-A(B)水平的高低與ABO HDN的發(fā)病率盡管沒有絕對的一致性,但有高度的相關性[1,2]。孕婦血清中的IgG類抗-A和抗-B的效價測定可以幫助預測和判斷HDN的發(fā)生和程度[3]。本人用微柱凝集技術(MGI)檢測孕婦血型Ig類血型抗體效價水平。
來自2010年1月至2011年6月來我院婦科門診就診的O型孕婦共計248人,年齡24~38歲,孕期為12~38周,其中配偶A型116人,B型102人,AB型23人,孕婦RhD陰性7人,配偶RhD陽性。
0.8%ABO反定型紅細胞懸液和抗人球微柱凝膠卡(均長春博訊生物技術有限責任公司生產)批號:20091209、20101103;0.2mol/L 2-巰基乙醇(2ME)(上海血液生物醫(yī)藥責任有限公司);TO-3A型血型血清學用離心機和FYQ免疫微柱孵育器(長春博研科學生物儀器有限責任公司);電熱恒溫水箱( 天津市泰斯特儀器有限公司)。
1.3.1 標本預處理
取200μL孕婦血清標本和200μL 0.2mol/L 2-巰基乙醇應用液充分混勻,試管加塞蓋置37℃水浴60min,充分裂解血清中IgM類抗體,吸經2-ME處理的血清用生理鹽水做倍比稀釋,稀釋度分別為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512,留待進行平行試驗。
1.3.2 MGI
取微柱凝膠試劑卡做好標記在微孔內各加入50μL與孕婦配偶相同血型的0.8%標準紅細胞懸液,再依次加入上述處理的稀釋度為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512的血清50μL,置專用孵育器內37℃孵育15min,再放入專用離心機離心5min(900轉/分,2min;1500轉/分,3min),結果判定以出現(xiàn)1+號凝集的最高稀釋度的倒數(shù)為抗體效價。
結果判定以出現(xiàn)1+號凝集的最高稀釋度的倒數(shù)為IgG抗-A(B)和抗-D的價效,IgG抗-A(B)價效≥64為異常,抗-D檢出者為陽性,未檢出者為陰性。
在所檢測的241例O型血孕婦中,配偶血型組合(O-A)、(O-B)、(O-AB)的例數(shù)116、102和23,抗體效價≥64有81例,異常檢出例占總數(shù)的33.6%(81/241)其中IgG抗-A測定有139,例效價≥64有36例,異常檢出占總抗-A的14.9%(36/241),IgG抗-B測定有125例,例效價≥64有45例18.67%(45/241)。結果見表1。其中19例gG抗-A(B)效價≥64,O型血孕婦所生新生兒作HDN血清學檢查,結果見表2。
表1 241例O型血孕婦血清IgG抗-A(B)效價與例數(shù)分布
表2 19例O型血孕婦血清中IgG抗-A(B)效價于HDN關系
新生兒溶血?。℉DN)是指母嬰血型不合引起的同族免疫性溶血。有報道說ABO溶血病占新生兒溶血的85.3%,Rh溶血病占14.6%,MN溶血病占0.1%。ABO血型不合中約1/5發(fā)病,RhD血型不合者約1/20發(fā)病。本病主要是母嬰間血型不合而產生同族血型免疫反應的遺傳性疾病。其次是RH系統(tǒng),胎兒由父母新方面遺傳來的顯性抗原恰為母親所缺少,此抗原侵入母體,產生免疫抗體,通過胎盤絨毛膜進入胎兒血循環(huán)與胎兒紅細胞凝集、使之破壞而出現(xiàn)溶血,引起貧血、水腫、脾腫大和生后短時間內出現(xiàn)進行性重度黃疸,甚至發(fā)生膽紅素腦病。常導致胎兒早期流產或新生兒貧血,甚至造成新生兒死亡等嚴重后果。已知的可發(fā)生新生兒溶血病的20多個血型系統(tǒng)200余個血型抗原中,以ABO系統(tǒng)最為常見,其次RH系統(tǒng),每個血型系統(tǒng)在遺傳上都是獨立的,并按孟德爾法則遺傳。引起新生兒溶血病以的ABO系統(tǒng)為最多,次為Rh系統(tǒng),ABO血型系統(tǒng)引起防新生兒溶血病的比例比RH系統(tǒng)多[1]。檢測母親血清中是否存在IgG性質抗-A(B)抗體及效價,就可對ABO系統(tǒng)HDN發(fā)生進行預測,ABO溶血病通常以母親為O型,子女為A型或B型的發(fā)病率為高[2],所以IgG-A(B)水平的測定對胎兒溶血癥狀的減輕,新生兒HDN發(fā)病率的降低有著非常重要的意義。對待妊娠約20周的、ABO血型不合的孕婦,特別是存在原因不明的流產、早產、死胎等情況的,需要動態(tài)監(jiān)測血型抗體效價,若母親的IgG-A(B)≥128,結果很可能是嬰兒已經受害,若IgG-A(B)≥512,幾乎98.1%發(fā)病[3]。表2結果表明新生兒HCN發(fā)病率與母體內的IgG 血型效價呈正相關[4]。此時就需要格外重視,并積極采取措施降低孕婦體內IgG水平。
HDN的發(fā)病率隨著母體內的IgG類血型抗體水平增高而增大,所以對母體IgG-A(B)和抗-D效價進行有效的檢測,可避免免疫性溶血的發(fā)生,有利于早期診斷和治療。我院采用微柱凝膠免疫試劑卡檢測IgG血型抗體效價孕婦進行產前干預治療,可明顯降低HDN的發(fā)病率。
[1]劉達莊.免疫血液學[M].上海:上??茖W技術出版社,1981:76-77.
[2]達莊.免疫血液學[M].上海:上??茖W技術出版社,2002:128-131.
[3]孫悅玲,施選性,金春子,等.O型流產婦女再孕與IgG抗體效價的關系[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2005,13(10):68-69.
[4]武建,孔惠良,方美玉,等.孕婦體內ABO血型血清抗體動態(tài)觀察[J].臨床血液學雜志(輸血與檢驗版),2007,4(3):102-103.