吳劍楊 黃燕爾

（中山市人民醫(yī)院，廣東 中山 528403）

血清總膽汁酸（TBA）在臨床肝病診斷中應(yīng)用較廣，由于其靈敏性高，在常規(guī)肝功檢測正常的結(jié)果下，可以及時發(fā)現(xiàn)肝實質(zhì)細(xì)胞的微小壞死，從而改善預(yù)后[1]。此外，還可以區(qū)別膽汁淤積和高膽紅素血癥。但在臨床檢測中我們發(fā)現(xiàn)TBA在血脂試劑之后檢測，結(jié)果會出現(xiàn)較大偏差。因此我們擬對此現(xiàn)象進(jìn)行定量分析，并探討相關(guān)的防范措施。

1 資料與方法

1.1 一般資料

血清：健康體檢患者的混合血清。儀器：羅氏Modular PP全自動生化分析儀。試劑：TC（總膽固醇），TG（三酰甘油），HDL-C（高密度脂蛋白）和LDL-C（低密度脂蛋白），均為羅氏公司配套試劑，TBA（總膽汁酸）由北京利德曼科技有限公司提供。

1.2 方法

①徹底清潔，維護(hù)儀器。重點對試劑針，樣本針，攪拌針和沖洗臺管道進(jìn)行清洗，并對儀器性能進(jìn)行調(diào)試，以減少儀器誤差。②污染定量試驗。取混合血清10份，做TBA檢測，連續(xù)10次，取其平均值作為TBA的參考值。然后取混合血清10份，做TC檢測后接著做TBA檢測，連續(xù)10次，取其平均值作為TC對TBA的影響值A(chǔ)。采用同樣方法得到TG，HDL-C和LDL-C對TBA的影響值。③污染糾正試驗。在儀器主操作界面下，點擊“設(shè)置”—“交叉污染”，在界面上半部分選擇“HDL-C、LDL-C中R2”和“TC，TG中R1”，在界面下半部分選中“TBA-R2，TBA-R1”，確定后返回主界面。取混合血清，重復(fù)步驟②中的血脂對TBA的影響值方法，得到影響值B。

1.3 數(shù)據(jù)處理

SPSS12.0軟件處理相關(guān)數(shù)，P＜0.05為統(tǒng)計學(xué)差異具有顯著性，t檢驗計量資料。

2 結(jié) 果

污染定量試驗如表1所示，TC，TG，HDL-C和LDL-C影響值均顯著大于TBA參考值（均P＜0.01），偏差從大到小依次為：TC，HDL-C，LDL-C，TG。污染糾正試驗如表2所示，TC，TG，HDL-C和LDL-C影響值均大于TBA參考值，但均無顯著性差異（均P＞0.05）。

表1 污染定量試驗統(tǒng)計(均測量10次)

表2 污染糾正試驗統(tǒng)計(均測量10次)

3 討 論

自動生化分析儀可大大提高檢測效率，對于檢測工作量大的醫(yī)院檢驗科室來說非常適用。但其也存在一定的局限性，主要表現(xiàn)為：由于采用同一根試劑針吸取試劑，為了保證效率，清洗程序快速短暫，對于高濃度試劑來說，試劑針很難被清洗干凈[2]。對于部分檢測項目來說，可能前一項目檢測的殘留成分會被帶到后一項目的檢測成分中，并發(fā)送生化反應(yīng)，導(dǎo)致后面檢測項目的結(jié)果偏離。雖然一定范圍內(nèi)的偏離基本不會影響到對病情的判斷，但若偏離太大，則可能導(dǎo)致誤判，后果是非常嚴(yán)重的，所以對其進(jìn)行分析并采取防范措施是非常必要的。

TBA的測定方法很多，循環(huán)酶法在臨床上應(yīng)用較為廣泛。其基本原理是[3]：TBA與3α-HSDH和Thio-NAD發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成3-酮類固醇和Thio-NADH。3-酮類固醇在3α一HSDH和Thio-NADH作用下生成Thio-NAD和TBA ，生成的Thio-NAD和TBA繼續(xù)循環(huán)反應(yīng)，使微量的TBA得到放大。從而使TBA成為臨床可被檢測到的水平。血脂試劑成分相對較復(fù)雜，但已經(jīng)有文獻(xiàn)報道[4]，其可能含有氧化型輔酶1（NAD+）和氧化型輔酶2（NADP+），其可導(dǎo)致反應(yīng)被進(jìn)一步放大，從而導(dǎo)致TBA測量值偏高。本次試驗雖無法證實血脂試劑是否含有上述成分，但檢測結(jié)果嚴(yán)重偏高，已經(jīng)影響到對病情的判斷，所以血脂試劑對TBA的檢測影響是確實存在的，而且非常顯著。

最徹底的防范方法是每次檢測后進(jìn)行徹底清洗，但其已經(jīng)失去了自動生化分析儀的高效意義，而且臨床實際情況也不允許。臨床上也有考慮合理安排檢測項目次序[5]，以減少污染，但由于批量大而且隨機(jī)性大，實際情況也不理想。我們采用儀器軟件中提供的項目間試劑交叉污染屏蔽功能來排除試劑間干擾，從表2可以得知，其誤差均在可接受范圍內(nèi)，但儀器在進(jìn)行污染試驗前經(jīng)過了徹底清洗，其雖然是一種不錯的方法，在臨床實際中效果的穩(wěn)定性究竟如何，還有待考慮。目前還沒有一種可行性強(qiáng)，同時抗污染效果佳的方法，因此可以考慮綜合運(yùn)用多種方法。首先，對待檢試劑的生化，物理性質(zhì)以及可能發(fā)生的反應(yīng)要非常熟悉，其次，盡量合理安排檢測次序，并運(yùn)用儀器軟件的設(shè)置來減小污染。最后，儀器應(yīng)定期維護(hù)和清洗。從而最大程度的減小誤差，為臨床診療提供客觀參考。

[1] 唐衡,桂滿元,易斌.血脂檢測試劑對總膽汁酸測定結(jié)果的影響及防范措施[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2009,38(10):92-95.

[2] 于嘉屏.全自動生化分析儀及其試劑問化學(xué)污染對檢測結(jié)果的影響[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(11):1301-1302.

[3] 鄧正輝,張華,李龍平.生化試劑對膽汁酸測定的交叉污染及防范措施[J].中國實用醫(yī)藥,2008,3(10):55-56.

[4] 陳繼中,李旭光,唐吉斌.試劑攜帶污染對血清總膽汁酸測定結(jié)果的影響及消除措施[J].檢驗醫(yī)學(xué),2006,21(3):228-230.

[5] 李新,征孫寶云,康云平.日立7600生化分析儀交叉污染及防范措施的探討[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗,2007,25(1):27-28.