賴世平

（浙江省湖州市婦幼保健院病理科，浙江湖州 313000）

·論 著·

p16、EGFR在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義

賴世平

（浙江省湖州市婦幼保健院病理科，浙江湖州 313000）

目的探究p16和表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）在子宮內(nèi)膜增殖期、子宮內(nèi)膜增生過(guò)長(zhǎng)和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法運(yùn)用免疫組織化學(xué)Elivision法檢測(cè)p16、EGFR在子宮內(nèi)膜癌120例、子宮內(nèi)膜增殖期40例、單純型增生過(guò)長(zhǎng)40例、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)40例、非典型增生過(guò)長(zhǎng)40例組織中的表達(dá)情況。結(jié)果p16在子宮內(nèi)膜增殖期、單純型增生過(guò)長(zhǎng)、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)、非典型增生過(guò)長(zhǎng)、子宮內(nèi)膜癌的陽(yáng)性表達(dá)率依次降低，而EGFR蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于子宮內(nèi)膜增殖期（P＜0.01）。結(jié)論p16、EGFR的異常表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

子宮內(nèi)膜腫瘤；基因，p16；基因，erbB-1

子宮內(nèi)膜癌（carcinoma of the endometrium）是女性生殖器三大惡性腫瘤之一，其發(fā)病率占女性全身惡性腫瘤的7%，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，近年來(lái)發(fā)病率有上升趨勢(shì)［1］。p16是一個(gè)重要的多重腫瘤抑制基因，與細(xì)胞周期蛋白D競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合細(xì)胞周期依賴性激酶（cyclin dependent kinases 4，CDK4），參與細(xì)胞周期的調(diào)控，控制細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行負(fù)調(diào)控［2］，它與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道不一。表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）廣泛分布于人體各組織的細(xì)胞膜上，其在大多數(shù)腫瘤中過(guò)表達(dá)和（或）突變。較多文獻(xiàn)表明EGFR與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，已成為腫瘤治療的重要靶點(diǎn)［3］。本文對(duì)p16、EGFR在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)進(jìn)行研究，旨在探討兩者在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源及處理：收集2005年9月—2010年3月浙江省湖州市婦幼保健院病理科子宮內(nèi)膜病變組織蠟塊280例（子宮內(nèi)膜增殖期40例，單純型增生過(guò)長(zhǎng)40例，復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)40例，非典型增生40例，子宮內(nèi)膜癌120例）?；颊吣挲g23～65歲，平均50.1歲。所有病例術(shù)前均未行放療、化療和內(nèi)分泌治療。子宮內(nèi)膜癌手術(shù)病理分期采用國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2000年的標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期42例，Ⅱ期40例，Ⅲ期38例；組織學(xué)分級(jí)，G1期70例，G2～G3期50例；肌層浸潤(rùn)≤1/2有68例，＞1/2肌層浸潤(rùn)有52例。病理類型全部為子宮內(nèi)膜樣腺癌。

1.2 方法與試劑：采用免疫組織化學(xué)法（Elivision法），以上述病例的子宮內(nèi)膜組織蠟塊為標(biāo)本，采用3μm厚連續(xù)切片。鼠p16蛋白和EGFR抗體均購(gòu)自上海長(zhǎng)島公司。陽(yáng)性對(duì)照片亦為上海長(zhǎng)島公司提供，陰性對(duì)照采用PBS代替一抗。DAB顯色，蘇木素進(jìn)行復(fù)染。

1.3 結(jié)果評(píng)定：p16蛋白染色主要定位于細(xì)胞核，EGFR陽(yáng)性主要定位于細(xì)胞膜和（或）細(xì)胞漿，均以出現(xiàn)棕色信號(hào)者為準(zhǔn)（圖1，2），采用半定量積分法來(lái)判斷結(jié)果，先按染色強(qiáng)度打分，0分為無(wú)色，1分為淺黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色，染色強(qiáng)度依背景著色進(jìn)行對(duì)比；再按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比打分，0分為陰性，1分為陽(yáng)性細(xì)胞≤10%，2分為＞10%～50%，3分為＞50%～75%，4分為＞75%。依據(jù)兩者分?jǐn)?shù)相加之和所得總分進(jìn)行結(jié)果判定，0～1分為陰性（-），2～3分為弱陽(yáng)性（+），4～5分為中度陽(yáng)性（++），6分以上為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖1 EGFR在子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)（免疫組織化學(xué)×200）

圖2 p16在子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)（免疫組織化學(xué)×200）

2 結(jié) 果

p16在子宮內(nèi)膜增殖期陽(yáng)性率為72.5%、單純型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為70.0%、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為70.0%、非典型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為67.5%和子宮內(nèi)膜癌陽(yáng)性率為44.1%，陽(yáng)性表達(dá)率依次下降，其中子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)率與子宮內(nèi)膜增殖期相比，明顯降低，子宮內(nèi)膜癌中p16的陽(yáng)性表達(dá)率與子宮內(nèi)膜增殖期、單純型增生過(guò)長(zhǎng)、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)、非典型增生過(guò)長(zhǎng)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。EGFR在子宮內(nèi)膜增殖期陽(yáng)性率為22.5%、單純型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為30%、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為42.5%、非典型增生過(guò)長(zhǎng)陽(yáng)性率為52.5%和子宮內(nèi)膜癌陽(yáng)性率為70.8%，EGFR的表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌組較高，與增殖期、單純型增生過(guò)長(zhǎng)、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)、非典型增生過(guò)長(zhǎng)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01），p16與EGFR在子宮內(nèi)膜增生過(guò)程中的表達(dá)與子宮內(nèi)膜增殖期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。p16在子宮內(nèi)膜癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中陽(yáng)性率逐級(jí)降低，EGFR在子宮內(nèi)膜癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中陽(yáng)性率逐級(jí)升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在不同組織分級(jí)和不同浸潤(rùn)深度中，p16與EGFR的陽(yáng)性率都各不相同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表1 不同子宮內(nèi)膜組織中p16和EGFR的表達(dá)情況

表2 子宮內(nèi)膜樣癌中p16、EGFR的表達(dá)情況與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討 論

p16基因定位于人9號(hào)染色體短臂2區(qū)，由編碼148個(gè)氨基酸組成核結(jié)合蛋白。p16蛋白是細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶的抑制蛋白，是細(xì)胞周期調(diào)節(jié)物，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)起到負(fù)調(diào)控作用。人類多種惡性腫瘤中均存在p16基因的缺失、突變、轉(zhuǎn)錄和表達(dá)異常，故又稱此基因?yàn)槟[瘤抑制基因。p16基因甲基化可能是胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要因素，幽門螺桿菌感染可能與p16基因啟動(dòng)子甲基化率增高有關(guān)［4］。EGFR屬于酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族，其家族成員包括EGFR（HER-1）、HER-2、HER-3、HER-4共4種同源受體，其經(jīng)過(guò)細(xì)胞質(zhì)中銜接蛋白、酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子，從而激活基因的轉(zhuǎn)錄，指導(dǎo)細(xì)胞遷移、黏附、增殖、分化、凋亡。由于它在各種腫瘤組織中表達(dá)率不同，且與腫瘤的分化程度、惡性程度及浸潤(rùn)程度密切相關(guān)，基于這些特點(diǎn)，EGFR已成為目前腫瘤治療的重要靶點(diǎn)。EGFR基因擴(kuò)增是子宮內(nèi)膜癌最常見(jiàn)的遺傳學(xué)異常之一。李青等［5］發(fā)現(xiàn)EGFR可能參與了宮頸癌的發(fā)生，并且是宮頸癌發(fā)生的早期事件。EGFR蛋白過(guò)表達(dá)可能由EGFR基因擴(kuò)增或基因拷貝數(shù)增加所致。

本研究發(fā)現(xiàn)從子宮內(nèi)膜增殖期到單純型增生過(guò)長(zhǎng)，至非典型增生過(guò)長(zhǎng)，再至子宮內(nèi)膜癌，p16的表達(dá)依次下降和EGFR的依次升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而p16、EGFR在增生過(guò)長(zhǎng)中表達(dá)增生期與子宮內(nèi)膜增殖期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說(shuō)明p16，EGFR與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，并可以給子宮內(nèi)膜癌的治療提供一定依據(jù)，這與國(guó)內(nèi)張麗志等［6］的研究相同。p16在子宮內(nèi)膜癌的臨床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中陽(yáng)性率逐級(jí)降低，在不同的組織學(xué)分級(jí)以及不同的肌肉浸潤(rùn)程度，p16的陽(yáng)性率各不相同，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；EGFR在子宮內(nèi)膜癌的臨床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中陽(yáng)性率逐級(jí)升高，在不同的組織學(xué)分級(jí)以及不同的肌肉浸潤(rùn)程度，EGFR的陽(yáng)性率也各不相同，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明p16、EGFR的表達(dá)在一定程度上能反映出子宮內(nèi)膜癌的疾病進(jìn)展程度。

綜上所述，p16、EGFR表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后相關(guān)，兩者聯(lián)合檢測(cè)可為子宮內(nèi)膜良、惡性病變的鑒別及對(duì)子宮內(nèi)膜癌的診斷治療、評(píng)價(jià)預(yù)后等提供參考指標(biāo)，其表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為之間有一定內(nèi)在聯(lián)系，也可作為評(píng)價(jià)子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為的重要指標(biāo)之一。

［1］ 樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué)［M］.7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：272.

［2］ SERRANOM，HARMON GJ，BEACH D，et al.A new regulatory motif in C cell-cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4［J］.Nature，1993，366（16）：704-705.

［3］ NAKAMURA JL.The epidermal growth factor receptor in malignant gliomas：pathogenesis and therapeutic implications［J］. Expert Opin Ther Targets，2007，11（4）：463-472.

［4］ 魏國(guó)華，楊春雨，楊靜，等.Hp感染與P16基因甲基化在胃癌發(fā)展中的作用［J］.腫瘤防治研究，2011，38（1）：51-54.

［5］ 李青，紀(jì)捷，吳王飛，等.宮頸鱗狀上皮病變中EGFR蛋白表達(dá)及基因擴(kuò)增的臨床意義［J］.診斷病理學(xué)雜志，2010，17（6）：448-452.

［6］ 張麗志，崔滿華，白鳳玲.p16和p15基因在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)［J］.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2005，31（1）：118-119.

（本文編輯：劉斯靜）

R737.33

B

1007-3205（2012）03-0334-03

2011-08-23；

2012-02-10

賴世平（1982-），男，浙江湖州人，浙江省湖州市婦幼保健院技師，從事病理診斷研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.03.036