摘要：以郁金香品種“粉色印記”的鱗片為外植體，研究鱗片部位以及不同激素組合對愈傷組織誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明：誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基是MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.5mg/L，誘導(dǎo)率為45%，鱗片上段是誘導(dǎo)愈傷組織的最佳鱗片部位，誘導(dǎo)率為65%。

關(guān)鍵詞：郁金香；鱗片；激素；愈傷組織

中圖分類號：S682.263文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1674-0432（2012）-02-0059-1

郁金香(Tulipa gesneriana )位居我國進(jìn)口花卉之首，其生產(chǎn)依賴大量進(jìn)口的原因主要是傳統(tǒng)的栽培方式繁殖系數(shù)低，品種退化嚴(yán)重[1，2]。組織培養(yǎng)技術(shù)是解決這些問題的有效途徑。筆者首次研究郁金香品種“粉色印記”愈傷組織誘導(dǎo)的鱗片部位和最佳激素組合，為規(guī)模化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

郁金香品種“粉色印記”。

1.2 試驗(yàn)方法

將郁金香鱗片和莖段分離，挑選無病斑的材料。用自來水將鱗片洗凈，然后在超凈工作臺中用70%酒精消毒1min，再用0.1%的升汞消毒8-10min，取出后用無菌水沖洗3-5次，鱗片橫切成上、中、下3部分，大小約0.8cm×0.8cm的方塊，以MS為愈傷組織誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)基，分別附加不同濃度的6-BA和NAA，共設(shè)16個(gè)處理（具體處理見表1），其中蔗糖含量為3%，瓊脂條含量為0.7%，pH調(diào)至5.8。培養(yǎng)溫度為（24±2℃），每天光照12h，光照強(qiáng)度為2000lx[3，4，5]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素組合對郁金香鱗片愈傷組織誘導(dǎo)的影響

將郁金香上段鱗片接種在編號為1-16的不同激素組合的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，約8d后，在大多數(shù)鱗片切口處或鱗片邊緣產(chǎn)生少量淡黃綠色的愈傷組織，隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加，愈傷組織的發(fā)生由鱗片邊緣擴(kuò)展到鱗片表面，出現(xiàn)白色突起。愈傷組織逐漸增加，培養(yǎng)20d后，統(tǒng)計(jì)郁金香愈傷組織的誘導(dǎo)情況，結(jié)果見表2。

由表2可以看出，這16種培養(yǎng)基誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織的情況各不相同，在誘導(dǎo)頻率上差異明顯，其中15號培養(yǎng)基對鱗片愈傷組織誘導(dǎo)率最高，達(dá)到45%，且愈傷組織疏密適中，顏色呈乳白色。因此，在NAA與6-BA配比的16中培養(yǎng)基中以15號培養(yǎng)基為最佳培養(yǎng)基。

2.2 不同鱗片部位對郁金香愈傷組織誘導(dǎo)的影響

將郁金香鱗片切成上、中、下3段，大小為0.82cm×0.8cm，分別接種于MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，10d后鱗片開始變綠，隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加，鱗片不斷發(fā)生變化，22d后鱗片凹面出現(xiàn)白色突起，形成愈傷組織。統(tǒng)計(jì)鱗片不同部位形成愈傷組織的情況，試驗(yàn)結(jié)果見表3。試驗(yàn)中觀察到上段鱗片愈傷組織長勢良好，顏色為白色，愈傷組織誘導(dǎo)率最高。中段和下段鱗片形成愈傷組織較少，誘導(dǎo)率較低。因此，上段鱗片為誘導(dǎo)愈傷組織的最佳部位，誘導(dǎo)率為65%。

3 討論

在郁金香鱗片愈傷組織的誘導(dǎo)中，激素的種類和濃度具有重要作用，郁金香鱗片對不同激素組合反應(yīng)不同。同時(shí)，不同鱗片部位產(chǎn)生愈傷組織的情況也不同。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，郁金香“粉色印記”鱗片愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA2.0mg/L+6-BAmg/L，誘導(dǎo)率為45%，最佳鱗片部位為上段，誘導(dǎo)率為65%。本試驗(yàn)的成功完成，為郁金香的快繁提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊永剛，代漢萍，胡新穎，等.郁金香器官離體培養(yǎng)再生小鱗莖的研究[J].園藝學(xué)報(bào)，2006，33(5):1133-1136.

[2] 陸文梁，王雪潔，郭仲琛.金香組織培養(yǎng)及器官分化的研究[J].園藝學(xué)報(bào)，1986，13(1):55-60.

[3] 李鶯，杜瑞春，唐建云，等.不同植物生長調(diào)節(jié)劑對益母草愈傷組織誘導(dǎo)的影響.西安文理學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，12(1):43-47.

[4] 曹昆，李霞.不同激素種類和配比對秤錘樹愈傷組織誘導(dǎo)的影響研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科技，2001，36(118):10-12.

[5] 聞麗，張日清，李典軍.不同激素配比對油茶花藥愈傷組織形成的影響.經(jīng)濟(jì)林研究，2005，23(4):21-23.

作者簡介：張莉恒（1990-），女，本科，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院生物工程學(xué)院學(xué)生。

通訊作者：王霞，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院生物工程學(xué)院講師。