海凈納
Micro-Snap是一項采用改良ATP生物熒光反應(yīng)的快速檢測系統(tǒng),能夠用來檢測不同種類樣本中的特定細菌。這種新的生物熒光拭子(MicroSnap)通過配套使用一種新的低成本高靈敏光度計(Hygiena公司Ensure多功能監(jiān)控系統(tǒng)),可檢測出各種類型樣品中的低水平特定細菌,最長7小時就能得到結(jié)果。這項具有諸多優(yōu)勢的實用技術(shù)首批推出的是大腸菌群、腸桿菌和大腸桿菌檢測拭子。該技術(shù)后續(xù)將會用于更多其他指示菌和病原菌的快速檢測。
一、背景
ATP生物熒光技術(shù)在不同行業(yè)的成功應(yīng)用已有30年歷史。它作為一種非特異性生物量監(jiān)控系統(tǒng)已經(jīng)成功用于各類食品、化妝品和醫(yī)藥品行業(yè),而其中應(yīng)用最廣泛的就是衛(wèi)生檢測。
ATP生物熒光法的最主要應(yīng)用就是通過對非特異性有機殘留物的測定來對清潔和衛(wèi)生狀況做出快速、直接和客觀的評價。ATP檢測在醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)中感染的控制方面的應(yīng)用新近得到了英國健康保護署(Health Protection Agency)的推薦。它也被執(zhí)法和稽查審計人員作為一種干預(yù)工具來評價衛(wèi)生狀況和查明問題所在區(qū)域。
二、技術(shù)
Micro-Snap技術(shù)將新的試劑配方和ATP生物熒光反應(yīng)與特異性酶底物偶聯(lián)在一起,從而在保留高靈敏度的同時,第一次將ATP檢測用于特定細菌測定。特定細菌所具有的酶(如β-半乳糖苷酶和β-葡糖醛酸酶)在催化這些底物的過程中發(fā)出光子,這些光子能被一種新的高靈敏手持式光度計(Ensure多功能監(jiān)控系統(tǒng))檢測到。
Micro-Snap檢測拭子獨特的配方和包裝使得其操作簡便易用,既可以在實驗室使用,也可以在偏遠地區(qū)或現(xiàn)場使用。
Micro-Snap拭子反應(yīng)過程:
ATP+特異性底物+熒光素酶—特異性診斷酶→光
三、性能
與傳統(tǒng)方法相比,Micro-Snap生物熒光檢測技術(shù)具有高特異性和靈敏度(見表1)。樣本中細菌數(shù)量越高檢測時間越短,低數(shù)量的細菌(1~5個菌)檢測時間也只需7小時左右(見表2)。
表1 Micro-Snap的靈敏度和特異性
表2 Micro-Snap的檢測限
Micro-Snap檢測拭子的技術(shù)原理使其能夠不會受到來自樣品ATP的本底干擾。同時早期和高靈敏的檢測也消除了傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)中因其他競爭性微生物生長所導(dǎo)致的干擾問題。
圖1 綠葉沙拉中大腸桿菌的檢測
圖1顯示,在>10,000個自然菌叢存在的條件下,將5個大腸桿菌接種至沙拉懸液中,不到7個小時即可檢出。高接種量的樣本檢測時間更短。
四、應(yīng)用
Micro-Snap腸桿菌、大腸菌群和大腸桿菌快速檢測拭子可以用于以下方面:
(1)評價清潔度的表面衛(wèi)生檢測,包括工業(yè)加工過程和醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)有無受到糞便污染;
(2)質(zhì)量和安全檢測,包括工業(yè)加工中的原材料或成品、工藝水、飲用水等;
(3)快速確認(rèn)平板上生長的相關(guān)菌落(檢測時間2分鐘)。
五、總結(jié)
Micro-Snap生物熒光拭子能在7小時左右檢測出低水平(1~5CFU)的特定細菌污染,而大多數(shù)傳統(tǒng)微生物檢測方法或替代方法則需要至少18~24小時方能給出結(jié)果。Micro-Snap系統(tǒng)操作簡單易用,配套Ensure多功能監(jiān)控系統(tǒng)可以在同一個工作日內(nèi)給出檢測結(jié)果,從而使用戶能及時得到有價值的信息。