董金香，賈艾玲，董雪蓮，邱智東

(長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117 )

何首烏為臨床常用中藥,其入藥部位為干燥塊根，具有潤腸、解毒和截瘧之功,制首烏則有補肝腎、益經(jīng)血、壯筋骨、烏須發(fā)之效?，F(xiàn)代藥理研究證明,何首烏具有抗衰老、降血脂等多種藥理活性，主要活性成分為蒽醌及二苯乙烯甙。傳統(tǒng)工藝，何首烏中蒽醌類成分一般采用乙醇回流或煎煮法提取，但蒽醌類成分轉(zhuǎn)移率較低，本實驗對何首烏中蒽醌類成分的提取方法和提取工藝條件進行了優(yōu)選。

1 儀器與試藥

HA221-50-06型超臨界萃取裝置；TU-1810紫外可見分光光度計；大黃素對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:110756-200110，供含量測定用)。所用試劑均為色譜純和分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 總蒽醌的含量測定方法 按藥典要求及相關(guān)文獻[1-3]報道，以大黃素為對照品，采用紫外-可見分光光度法。

2.2 CO2-超臨界流體萃取法提取工藝條件的優(yōu)選

2.2.1 萃取溫度、壓力、時間的確定 采用正交試驗法,因素水平確定為萃取溫度(40、50、60 ℃)，萃取壓力(20、30、40 mpa)，萃取時間(1、2、3 h)，稱取破碎后的何首烏藥材各100 g，置于1L萃取釜內(nèi),按L9(34)表進行試驗，提取物用乙醇作為吸收劑，定容于50 mL量瓶中，以大黃素為檢測指標(biāo),測量提取物中總蒽醌的含量，優(yōu)選最佳提取條件。正交試驗表及試驗結(jié)果見表1，方差分析見表2。

表1 正交試驗表及實驗結(jié)果

表2 正交實驗方差分析表

根據(jù)上述結(jié)果，A因素對萃取影響最大，C因素影響最小，綜合分析確定最佳萃取條件為：溫度40 ℃，壓力20 mPa，時間1 h。

2.2.2 夾帶劑的選擇 何首烏中蒽醌類成分極性較大，在提取時應(yīng)加入夾帶劑，目前常用乙醇，我們分別考察了不同濃度乙醇及不同加入量對蒽醌提取量的影響。取粉碎后的何首烏藥材各100 g，按上述優(yōu)選出的最佳萃取條件，分別加入夾帶劑進行實驗。結(jié)果見表3。

表3 夾帶劑對總蒽醌提取量的影響

結(jié)果表明，加夾帶劑(乙醇)總蒽醌提取量明顯高于未加夾帶劑提取量，加入75%乙醇180 mL提取量最多。

2.3 何首烏藥材中總蒽醌提取方法的優(yōu)選 水煎煮法：取何首烏100 g，加8倍于藥材量的水，煎煮3次，每次1 h，濾液濃縮、干燥，測定干膏中總蒽醌含量為126.91 mg。 乙醇加熱回流法：取何首烏100 g，加8倍于藥材量的95%乙醇，提取3次，每次1 h，回收乙醇，濃縮、干燥，測定干膏中總蒽醌含量為141.95 mg。 CO2-超臨界流體萃取法：取何首烏100 g,按上述優(yōu)選的最佳工藝條件進行超臨界提取，測定提取物中總蒽醌含量為190.53 mg。結(jié)果表明，采用CO2-超臨界流體萃取得到的總蒽醌含量明顯高于煎煮法和回流法。

3 討論

CO2-超臨界流體萃取法是利用CO2處于超臨界狀態(tài)下具有的高密度、低黏度和擴散系數(shù)大的性質(zhì)提取有效成分，具有提取溫度低，有效成分提取率高，操作周期短等優(yōu)點。應(yīng)用該技術(shù)從藥材中提取有效成分具有良好的應(yīng)用前景。 本研究結(jié)果表明，何首烏藥材中蒽醌類成分采用CO2-超臨界流體萃取最佳工藝條件為:溫度40 ℃，壓力20 mPa，時間1 h，以75%乙醇為夾帶劑，加入量為藥材量的1.8倍。采用該方法提取，有效成分的提取率明顯高于傳統(tǒng)的煎煮法和回流法。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:附錄30.

[2]曹東東,徐雅娟.CO2-超臨界流體萃取漆大姑活性成分最佳工藝研究[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,24(1):31-32.

[3]劉臘娥,陳鋮.紫外分光光度法測定肛疾舒洗劑中大黃總蒽醌含量[J].中國藥業(yè),2005,14(3):39-40.