劉岳松，張永和

(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2.長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長春 130021)

三苦滴丸是通過三七、苦碟子分別提取精制，得到三七總皂苷、苦碟子總黃酮2個(gè)有效部位，制成滴丸劑，用于中醫(yī)胸痹(冠心病心絞痛)心血瘀阻證[1-3]的治療。本實(shí)驗(yàn)旨在通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討三苦滴丸活血化瘀作用機(jī)制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品 三苦滴丸：長春中醫(yī)藥大學(xué)研發(fā)中心提供，規(guī)格：0.3 g/粒，含生藥7.5 g,批號(hào)：030310。復(fù)方丹參滴丸：規(guī)格：27 mg/粒，天津天士力制藥股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字Z10950111，批號(hào):100309。鹽酸異丙腎上腺素注射液：上海禾豐制藥有限公司，批號(hào):100201。肝素：上海生物化學(xué)制藥廠，批號(hào)：072010。烏拉坦：中國醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司，批號(hào)：080412。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠，雌雄兼用，體質(zhì)量250～270 g。由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。合格證號(hào)：SCXK-(吉)2007-0003。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 MP120-1電子稱：上海第二天秤儀器廠;TYXN-96多功能血液凝集儀,上海通用機(jī)電技術(shù)研究所;血液流變儀，北京泰諾德BV-100型;小動(dòng)物血栓生成儀,YLS-14B，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 血瘀證模型動(dòng)物血液流變學(xué)實(shí)驗(yàn)方法 血瘀證模型的復(fù)制：于末次給藥后30 min造模，按1 mg/kg鹽酸腎上腺素對(duì)除空白組以外的動(dòng)物進(jìn)行皮下注射。注射給藥2 h后，將所有組別的動(dòng)物放入冰水中(4 ℃)浸泡5 min,然后將其撈出，2 h后再次注射相同劑量的鹽酸腎上腺素。禁食不禁水20 h后，20%烏拉坦溶液(5 mL/kg體質(zhì)量)麻醉后經(jīng)腹主動(dòng)脈穿刺取血，肝素抗凝。采用血液流變儀測試不同切變率下的全血黏度。

2.2 大鼠頸動(dòng)脈刺激法 選用Wistar大鼠50只,隨機(jī)將其分為對(duì)照組、陽性藥(復(fù)方丹參滴丸250 mg/kg體質(zhì)量)對(duì)照組，三苦滴丸高劑量組1.48 g/kg體質(zhì)量、中劑量組0.74 g/kg體質(zhì)量、低劑量組0.37 g/kg體質(zhì)量，分籠飼養(yǎng)，每組10只。1次/d，連續(xù)灌胃1周。模型組給予蒸餾水1 mL/100 g。于末次給藥30 min后腹腔注射麻醉。切開頸部皮膚，剝離左側(cè)頸總動(dòng)脈，用YSL-14B小動(dòng)物血栓生成儀電刺激頸主動(dòng)脈，觀察主動(dòng)脈血流變化率(%)。

2.3 動(dòng)-靜脈旁路血栓模型 給藥劑量方法同上，末次給藥30 min后，對(duì)大鼠注射腹腔給藥麻醉。在頸部正中切口，首先做氣管插管，確保在手術(shù)過程中大鼠呼吸順暢、剝離右側(cè)頸總動(dòng)脈以及左側(cè)頸外靜脈。先將插管(插入前管內(nèi)充滿肝素生理鹽水)一端插入靜脈，插入后從插管注射肝素5 u/kg，另一端插入頸動(dòng)脈。手術(shù)完成后開啟動(dòng)脈夾，血流由動(dòng)脈端流入頸靜脈15 min后中斷，立刻取出插管中的絲線，濾紙吸干后采用微量電子天秤稱取其血栓濕重(mg)，總重量減去絲線重量即為血栓濕重(mg)，烘干24 h后稱血栓干重。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 三苦滴丸對(duì)血瘀證模型動(dòng)物全血黏度的影響 見表1。

3.2 三苦滴丸對(duì)大鼠動(dòng)脈血栓形成后血流變化率的影響 見表2。

表1 三苦滴丸對(duì)血瘀證模型動(dòng)物全血黏度的影響±s,n=10)

表2 三苦滴丸對(duì)大鼠動(dòng)脈血栓形成后血流變化率的影響±s,n=10)

3.3 三苦滴丸對(duì)大鼠血栓模型動(dòng)物血栓形成的影響 見表3。

表3 實(shí)驗(yàn)各組大鼠動(dòng)脈血栓重量的比較±s，n=10)

4 討論

采用大鼠血瘀證模型實(shí)驗(yàn)證明低切變率下三苦滴丸高劑量組動(dòng)物的全血黏度降低(P<0.05)，中、低劑量組也有下降趨勢(shì)，表明三苦滴丸對(duì)瘀血證大鼠不同切變率下的全血黏度均有明顯的改善作用，說明了三苦滴丸能有效的改善心肌損傷部位的紅細(xì)胞聚集程度，對(duì)局部心肌損傷具有一定保護(hù)作用。通過采用電刺激大鼠頸總動(dòng)脈血栓形成法造成血管壁損傷，產(chǎn)生血栓形成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)三苦滴丸高、中劑量組能明顯延長大鼠頸總動(dòng)脈血栓形成(堵塞動(dòng)脈程度)時(shí)間。采用動(dòng)-靜脈旁路血栓形成模型發(fā)現(xiàn)三苦滴丸高劑量組和中劑量組動(dòng)物靜脈血栓濕重和干重量均有明顯減少[4-5]。

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