呂書為，雷紅濤，孫遠明*

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東省食品質(zhì)量安全重點實驗室，廣東 廣州 510642)

魚用麻醉劑安全性研究進展

呂書為，雷紅濤，孫遠明*

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東省食品質(zhì)量安全重點實驗室，廣東 廣州 510642)

魚用麻醉劑能有效降低魚類長途運輸過程中的傷亡率，已在某些國家漁業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用，但其殘留及安全性問題一直受到關(guān)注。目前有關(guān)魚用麻醉劑的綜述很少，為此本文對魚用麻醉劑的類別、毒理學(xué)研究結(jié)果、麻醉劑在魚體中積累與凈化的影響因素等進行了綜述，并對我國魚用麻醉劑的使用和管理提出了部分建議。

魚用麻醉劑；毒理學(xué)；殘留凈化；建議

魚用麻醉劑是一類能不同程度抑制魚腦感覺中樞，使魚失去反射動作的物質(zhì)，其作用原理為：首先抑制腦的皮質(zhì)(觸覺喪失期)，再作用于基底神經(jīng)節(jié)與小腦(興奮期)，最后作用于脊髓(麻醉期)[1-2]。目前，國際在漁業(yè)生產(chǎn)與科學(xué)研究上對魚用麻醉劑的應(yīng)用極為廣泛，而國內(nèi)近年也開始普遍使用。其使用目的通常是使魚體鎮(zhèn)靜，降低魚體新陳代謝和魚的應(yīng)激反應(yīng)，減少躁動、以免致傷、便于運輸，提高魚的商品價值。

目前，國內(nèi)外研究者對于魚用麻醉劑的作用機制[3]、使用方法[2]、影響藥效的因素[4-5]、血液成分和魚的應(yīng)激性關(guān)系等研究[6-7]較多，對麻醉劑的安全性、反復(fù)麻醉對魚類的危害，殘留麻醉劑對人體的風(fēng)險和影響等則研究較少。2010年11月廈門首次查獲一起用臨床齒科麻醉劑丁香酚麻醉活魚以求提高存活率的案件，因為我國相關(guān)法規(guī)和信息的缺乏，引發(fā)了消費者對中國魚用麻醉劑的擔(dān)憂和恐慌[8]。為此，本文將綜述各種魚用類麻醉劑的毒理學(xué)特性和麻醉劑在魚體中積累與凈化的影響因素，以期為我國魚用麻醉劑的使用和管理提供一些信息和借鑒。

1 各種魚類麻醉劑的毒理學(xué)特性

1.1 魚安定

魚安定(MS-222)化學(xué)成分主要為間氨基苯甲酸乙醋甲烷磺酸鹽，易溶于水。研究發(fā)現(xiàn)，幼魚抵抗MS-222毒性比成年魚低[9-10]。施氏鱘幼魚24、48、72、96h的MS-222試劑半數(shù)致死量(LD50)為：61.67、58.22、56.90、56.90mg/L，安全質(zhì)量濃度為15.57mg/L；羅非魚24、96h的MS-222試劑LD50為：88.84mg/L和76.18mg/L。

目前，美國、歐盟、加拿大等國家允許魚安定作為魚用麻醉劑，并且美國限定休藥期為21d，最大殘留量(MRL)為1μg/mL，加拿大休藥期為5d。

1.2 丁香油

丁香油的有效成分為丁香酚(含量為85%～95%)、甲基丁子香酚[11]。其活性成分是丁香酚，無色或蒼黃色液體，有強烈的丁香香氣，難溶于水，若用于魚類浸浴麻醉，需用乙醇助溶。雖然國際上普遍認為丁香油及其組分是安全的牙科粘固粉和食品添加劑[12-13]，聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)、世界衛(wèi)生組織(WHO)丁香酚的每日容許攝入量(ADI)為2.5mg/kg[14]；歐盟(CE)[15]甲基丁香酚ADI值為5mg/kg，且我國允許含丁香酚香料(食用香料起到抑菌防腐作用的活性物質(zhì)是精油，含85%～92%丁香酚)用于加工火腿腸等需長時間保藏的食品中，除了具有調(diào)味作用外，還具有重要的防腐抑菌功能[16]。但若作為魚用麻醉劑，丁香油的安全性并不普遍接受。美國國家毒理學(xué)計劃(NTP)發(fā)布的毒理學(xué)數(shù)據(jù)顯示，甲基丁香酚是潛在致癌物質(zhì)[11]。施氏鱘幼魚24、48、72、96h的丁香酚試劑LD50分別為[9]：26.37、22.17、18.00、16.22mg/L，安全質(zhì)量濃度為4.7mg/L。虹鱒魚10min和96h的丁香酚試劑LD50、LD0.1、LD99.9分別為：81.1、63.9、100.1mg/L和14.1、12.5、16.2mg/L，安全質(zhì)量濃度為30mg/L。

血液生化指標(biāo)是機體內(nèi)環(huán)境數(shù)據(jù)的重要來源，依據(jù)此可考察魚體受藥物影響的程度[17]。Velisek等[18]從急性毒性、血液生化學(xué)、病理組織檢查三方面研究丁香油對虹鱒魚的麻醉，發(fā)現(xiàn)魚血、肝、脾、顱神經(jīng)及尾側(cè)腎臟等組織沒有發(fā)生病理變化。

日本允許丁香油作為魚用麻醉劑使用[19-20]，藥浴劑量為50～200μg/mL，休藥期為7d，最高殘留量(MRL)設(shè)定為50ng/mL。另外，允許丁香油作為魚用麻醉劑的國家還有新西蘭、澳大利亞、智利等[21]。

1.3 AQUI-S

異丁香酚是魚用麻醉劑AQUI-S的活性成分，歐盟(CE)[22]異丁香酚ADI值為5mg/kg，純度達90%，含12%的順式結(jié)構(gòu)和88%的反式結(jié)構(gòu)，易溶于水[23]。目前尚未有異丁香酚用于魚用麻醉的毒理學(xué)研究。

澳大利亞、智利、法羅群島、韓國和新西蘭等國家批準(zhǔn)AQUI-S作為休藥期為零的魚用麻醉劑[21-24]。雖然歐洲也允許AQUI-S作為魚用麻醉劑，但MRL和休藥期尚未公布[25]。

1.4 苯佐卡因

苯佐卡因的化學(xué)物質(zhì)為對氨基苯甲酸乙酯，難溶于水，若用于魚類浸浴麻醉，需用乙醇助溶。羅非魚24、96h的苯佐卡因試劑LD50為：44.49mg/L和22.61mg/L；若苯佐卡因與MS-222按1:1比例混合，對羅非魚24、96h的LD50為63.35mg/L和30.39mg/L；結(jié)合MS-222對羅非魚的毒理學(xué)數(shù)據(jù)，研究發(fā)現(xiàn)，在同等劑量條件下，苯唑卡因?qū)α_非魚的毒性比MS-222強；若將兩種藥物等比例混合后，在24h毒性實驗中則呈現(xiàn)拮抗作用，在96h毒性實驗中卻呈現(xiàn)協(xié)同作用[10]。

目前僅挪威批準(zhǔn)該藥物作為魚用麻醉劑，休藥期為21d[10,21]。

1.5 二氧化碳

雖然二氧化碳對動物組織沒有毒害作用，但若在魚局部組織中積累過多將麻醉過度，也會導(dǎo)致魚窒息死亡[26]。在對鯽魚進行麻醉實驗中，程君暉等[26]研究發(fā)現(xiàn)麻醉鯽魚的碳酸質(zhì)量濃度高于620μg/mL時，魚類存活率大為降低。同時金一春等[27]研究發(fā)現(xiàn)，以直接往裝有的水體中注氣的方式麻醉白斑狗魚，其CO2分壓大于0.1MPa或者注入CO2、O2(體積比1:1)的混合氣體時間大于17min(8℃)、14min(13℃)時，會導(dǎo)致魚死亡率的提升。

1.6 2-苯氧基乙醇

2-苯氧基乙醇微溶于水，作為魚用麻醉劑時常需乙醇助溶。用試劑質(zhì)量濃度為26.7mg/mL的2-苯氧基乙醇分別對鯉魚和虹鱒魚進行急性毒性實驗[28-29]：鯉魚和虹鱒魚10min的LD50、LD0.1、LD99.9分別為0.39、0.3、0.5mL/L 和0.17、0.13、0.26mL/L，96h 的LD50、LD0.1、LD99.9分別為0.46、0.34、0.92mL/L和0.25、0.21、0.30mL/L；而后，Velisek等[28-29]以2-苯氧基乙醇0.30mL/L的劑量對鯉魚和虹鱒魚進行藥浴麻醉，通過評定魚體的血液生化學(xué)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)該濃度對鯉魚是安全濃度，而對虹鱒魚并不安全。

國際上尚未規(guī)定2-苯氧基乙醇的MRL值，且歐盟不允許其作為漁藥使用[30-31]。

除以上幾種魚用麻醉劑外，見諸報道的魚用麻醉劑還有一些。喹哪啶及喹哪啶硫酸鹽原液對魚類的呼吸黏膜有較強刺激性；三氯乙醛和尿烷是潛在的致癌物質(zhì)；乙醚雖是低毒物質(zhì)，但對人的神經(jīng)系統(tǒng)有影響；巴比妥類藥物影響胎兒腦細胞的發(fā)育，或可引起胎兒腭裂和兔唇或致癌等；鹽酸普魯卡因魚體殘留主要發(fā)生在魚血漿中，僅小部分在肝臟，而普魯卡因?qū)θ酥袠猩窠?jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)有副作用[4,32-36]。

2 麻醉劑在魚體中積累與凈化的影響因素

魚用麻醉劑的安全性問題，體現(xiàn)在人體通過攝食攝入過量的魚類麻醉藥物而對健康造成影響。因而對于麻醉劑浸浴過的食用魚，通常需要一定的休藥期。而休藥期的長短取決于魚體對體內(nèi)殘留藥物的凈化能力以及麻醉劑的種類、麻醉方式(如浸浴時間、浸浴溫度和藥物濃度)[37]。

2.1 魚自身因素

魚的代謝情況各有差異，不同種類的魚對不同的麻醉劑，甚至對同一麻醉劑不同含量的反應(yīng)沒有顯著的規(guī)律性。但一般情況下，體質(zhì)量越大所需麻醉劑含量越高，Oikawa等[38]用MS-222對鯛科魚進行研究，發(fā)現(xiàn)魚的體質(zhì)量與相應(yīng)的有效劑量、藥物在魚體的積累和凈化效率成正比。Oikawa測得了真鯛體質(zhì)量(m)與MS-222的有效濃度(CE)的關(guān)系式為CE＝79m0.0549(實驗魚的數(shù)量N＝30，相關(guān)系數(shù)r＝0.936)。此外，魚的年齡與相應(yīng)的有效劑量、藥物在魚體的積累和凈化效率也成正比，這主要因為魚仔用皮膚呼吸，而魚真皮下的血管容量有限，不利藥物快速進入麻醉部位，但成年魚通過魚鰓呼吸，可加快藥物積累和凈化的速率[39-40]。

2.2 麻醉劑種類

魚體的藥物積累和凈化與麻醉劑種類有關(guān)，不同種類的魚用麻醉劑在魚體中的殘留部位和殘留量，以及在魚體內(nèi)的凈化方式、凈化時間各有差異。例如，使用不同藥物分別對虹鱒魚浸浴麻醉后，血液殘留量丁香酚為10.53μg/mL[41]，苯佐卡因為27μg/mL[42]，魚肌肉殘留異丁香酚為55.4μg/g[43]。

2.3 浸浴溫度

溫度影響魚體對麻醉藥物的積累和凈化，這與提升溫度加快了魚呼吸頻率有關(guān)[44]。Stehly等[45]在不同溫度下，研究AQUI-S對6種魚類的麻醉效果，發(fā)現(xiàn)魚體進入麻醉狀態(tài)所需時間受溫度影響較大，溫度越高，麻醉時間越短。主要是因為提高溫度可加快魚鰓的呼吸作用，從而使得更多的有效麻醉劑成分通過魚鰓進入魚組織達到麻醉效果。

2.4 浸浴鹽度、p H值、溶氧量

在高的鹽濃度下，魚為調(diào)節(jié)自身滲透壓平衡必消耗較多的能量，需要更多的氧氣，使得麻醉藥物在魚體的積累和凈化速率隨魚呼吸頻率的加快而加快[46-47]。Ghazilou等[46]通過對里海三文魚的藥浴麻醉研究，發(fā)現(xiàn)劑量、鹽度、pH值3因素對丁香油的麻醉效果影響顯著，同時也間接說明此3因素顯著影響麻醉劑在魚體內(nèi)的積累和殘留。

2.5 重復(fù)麻醉

對魚類進行重復(fù)麻醉，可降低魚體凈化自身體內(nèi)殘留麻醉劑的能力。Kildea等[48]研究丁香酚麻醉劑在銀鱸體內(nèi)積累和清除時發(fā)現(xiàn)：首次用丁香酚對銀鱸進行麻醉，48h后未在魚體中檢出丁香酚，但若是使用丁香酚對銀鱸二次充分麻醉，一個星期后，可在銀鱸肌肉中檢出殘留的丁香酚。

3 存在的問題和展望

水產(chǎn)長途運輸中運用麻醉劑是一種降低魚類傷亡，避免魚鮮度和質(zhì)量的下降的有效方法。因而隨著漁業(yè)的發(fā)展，魚用麻醉劑在國內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的應(yīng)用成為一種必然的趨勢。有些魚用麻醉劑不僅有良好的麻醉效果，而且經(jīng)濟廉價，已經(jīng)在國際上普遍用來進行大規(guī)模的活魚運輸。然而目前國內(nèi)對各類魚用麻醉劑尚缺少有效的法規(guī)規(guī)范，缺少使用標(biāo)準(zhǔn)，但事實上部分品種已經(jīng)在市面普遍使用。因為監(jiān)管制度的滯后，缺乏對魚用麻醉劑使用安全性的權(quán)威判定，如不及時加以引導(dǎo)和監(jiān)管，可能會越來越多的引起公眾對魚用麻醉劑安全性的擔(dān)憂和恐慌，影響社會安定，同時也不利于漁業(yè)經(jīng)濟的健康發(fā)展。

因此，筆者認為，我國相關(guān)部門有必要逐步開展如下幾方面工作：1)參考國際普遍使用的魚用麻醉劑，例如MS-222、丁香油、AQUI-S等，同時結(jié)合我國國情，盡快制定出臺允許使用的魚用麻醉劑列表；2)制定管理規(guī)范，加強監(jiān)管，尤其對于一些國際上公認副作用較大不適合作為魚用麻醉劑的化學(xué)物質(zhì)監(jiān)控，防止可能濫用的發(fā)生；3)對于安全性尚未定論或有潛在應(yīng)用價值的魚用麻醉劑，應(yīng)深入進行安全性研究，譬如苯佐卡因、2-苯氧基乙醇、乙醚等；4)積極開發(fā)高效、低殘留或無殘留的魚類麻醉劑，應(yīng)著重關(guān)注誘導(dǎo)期短、麻醉時間長、肌肉殘留量小、安全范圍大、反復(fù)使用對人和魚的危害小、價格低的新型麻醉劑作為魚用麻醉劑的開發(fā)方向。這樣，我國魚用麻醉劑的使用將越來越規(guī)范，必將對我國魚類運輸、銷售、消費者的健康保障發(fā)揮積極作用。

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Research Progress in Safety of Fish Anesthetics

Fish anesthetics can efficiently reduce the casualty rate of fish during long-distance transportation. Therefore, fish anesthetics have been widely used in fishery production in some countries. However, the residues of such anesthetics and the safety of fish have gained public concerns. In the present paper, the toxicology and the factors affecting accumulation and elimination of anesthetic residues are reviewed. Several prospects and suggestions are also provided for the future application and administration of fish anesthetics in China.

fish anesthetics；toxicology；residue elimination；proposal

TS254.7

A

1002-6630(2012)01-0267-04

2011-02-22

農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項 (201003008-08)；廣東省科技計劃項目(2009A01010004；2009B040500002)；廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項目(2010A090200084)

呂書為(1987—)，男，碩士研究生，研究方向為食品質(zhì)量與安全。E-mail：ciweihw@163.com

*通信作者：孫遠明(1956—)，男，教授，博士，研究方向為食品質(zhì)量與安全、食品化學(xué)。E-mail：ymsun@scau.edu.cn