凝膠層析和離子交換層析結(jié)合法純化高鹽發(fā)酵液中谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶
2012-04-12 00:00:00張莉麗張?zhí)m威杜明韓雪易華西張英春張艷禾馬微
分析化學(xué) 2012年8期
摘 要 采用凝膠層析和離子交換層析相結(jié)合的方法分離純化高鹽培養(yǎng)基中的谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶，優(yōu)化的凝膠層析的條件，上樣量6 mL，流速為0.25 mL/min;離子交換層析的上樣量50 mL，流速為3 mL/min。酶被純化了4.22 倍，比活力達17.33 U/mg 蛋白，回收率為77.5% 。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜鑒定、蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫比對結(jié)果表明，純酶與AAN01353 是同種蛋白質(zhì)。
關(guān)鍵詞 谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶;分離純化;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;凝膠層析;離子交換層析
