高效液相色譜分析魚毒性藻類海洋卡盾藻溶血毒素
2012-04-12 00:00:00吳霓江天久江濤
摘 要 采用高效液相色譜技術(shù)(HPLC)分離和分析了海洋卡盾藻(香港株)溶血毒素的甲醇粗提物,通過對比不同流動相、檢測波長、等度和梯度洗脫方式,初步建立了分析其溶血毒素的HPLC 方法。結(jié)果表明,采用梯度洗脫的方法,海洋卡盾藻溶血毒素的粗提物在50 min 內(nèi)取得了較好地分離。色譜條件為C8 硅膠柱(4.6 mm×150 mm, 5 mm),流動相為乙腈和水,梯度洗脫(0~10 min, 60% →80% 乙腈; 10~40 min, 80% →90%乙腈; 40~50 min, 90% 乙腈);紫外檢測器檢測波長為205 和448 nm;流速為0.8 mL/min; 柱溫為25 ℃。用兔血紅細(xì)胞法對各個主要色譜峰進(jìn)行溶血活性檢測顯示,海洋卡盾藻(香港株)的溶血毒素至少含有5 種成分。光譜分析顯示一種成分的紫外吸收高峰在448 nm,一種未完全分離的混合組分的紫外吸收高峰為440 和446nm,另外3 種成分的紫外吸收高峰為205 nm。
關(guān)鍵詞 高效液相色譜法;海洋卡盾藻;溶血毒素