液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定生物樣本全基因組DNA甲基化
2012-04-12 00:00:00彭思遠(yuǎn)張潔田美平王展林申河清
摘 要 建立了基于液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜的分析方法,對生物樣本中全基因組DNA 甲基化水平進(jìn)行定量測定。首先將DNA 從生物樣本中提取出來,將DNA 片段酶解為單核苷,利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定胞嘧啶核苷和5-甲基胞嘧啶核苷的含量,從而計算出其全基因組DNA 甲基化率。利用該法研究了暴露于全氟辛烷磺酸的L-02 細(xì)胞、10 例原發(fā)性肝癌病例血漿樣本和10 例對照血漿樣本的全基因組DNA 甲基化水平,得出了它們的總甲基化率變化的初步結(jié)果。本方法操作簡單,具有很高的靈敏度和穩(wěn)定性,為研究生物樣本,尤其是臨床上易得但DNA 含量極低的血漿樣本的總甲基化水平提供了思路。
關(guān)鍵詞 DNA 甲基化;液相色譜;質(zhì)譜;血漿;細(xì)胞;全氟辛烷磺酸