堿性橙與蛋白間的特異性與非特異性作用熒光光譜比較
2012-04-12 00:00:00雷紅濤唐秋實黃文凱ChenSitu劉英菊孫遠明
摘 要 將堿性橙與抗體的作用、堿性橙與牛血清白蛋白(BSA)間的作用分別作為特異性作用和非特異性作用模型,采用熒光光譜法固定激發(fā)波長為280 nm,掃描不同溫度下堿性橙與抗體和牛血清白蛋白兩種相互作用,在300~600 nm 的發(fā)射波長,比較了兩種相互作用的差異。結果表明,堿性橙與抗體結合為單一的靜態(tài)猝滅過程,二者之間的作用力主要為靜電作用力;在溶液中,二者以摩爾比1∶1 結合,結合常數(shù)為3.88×104 L/mol(25 °C),3.73×104 L/mol(37 °C)和2.35×104 L/mol(45 °C);堿性橙距抗體分子色氨酸殘基最短距離(r)為5.52 nm。堿性橙與BSA 的結合也為靜態(tài)猝滅,作用力為靜電作用力。但堿性橙與抗體作用過程中形成了激基復合物,與BSA 則不形成激基復合物。
關鍵詞 堿性橙;抗體;牛血清白蛋白(BSA);相互作用;熒光光譜